慶大霉素誘導(dǎo)的急性腎損傷大鼠腎髓質(zhì)UTA表達(dá)研究

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1、上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文慶大霉素誘導(dǎo)的急性腎損傷大鼠腎髓質(zhì)UT-A表達(dá)研究姓名：金曄申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（腎?。┲笇?dǎo)教師：蔣更如20061001上海交通大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名：日期：年月日5上海交通大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校

2、有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)上海交通大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□，在年解密后適用本授權(quán)書。本學(xué)位論文屬于不保密□。（請(qǐng)?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“√”）學(xué)位論文作者簽名：指導(dǎo)教師簽名：日期：年月日日期：年月日6慶大霉素誘導(dǎo)的急性腎損傷大鼠腎髓質(zhì)UT-A表達(dá)研究摘要目的：研究慶大霉素誘導(dǎo)的大鼠急性腎損傷后不同時(shí)間腎髓質(zhì)組織尿素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)改變；不同劑量的慶大霉素誘導(dǎo)大鼠急性腎

3、損傷后腎髓質(zhì)組織尿素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)變化。方法：65只50天齡，體重170-180g的雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為四組：(1)對(duì)照組(Cont組，n=15)，用等量生理鹽水代替慶大霉素腹腔注射；(2)慶大霉素組Ⅰ(Gent組Ⅰ，n=20)，腹腔注射慶大霉素(上海中西制藥有限公司，批號(hào)050605，國藥準(zhǔn)字H31022243),140mg/KgBW/day，每日一次，共7天，制備成急性腎損傷模型；在實(shí)驗(yàn)的第1天，第3天，第7天和第14天從Gent組Ⅰ及Cont組分別取5只大鼠留取24小時(shí)尿后，處死大鼠并觀察:①腎功能指標(biāo),24小時(shí)尿量(UV)、血清肌

4、酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、尿滲透壓;②腎組織形態(tài)學(xué)改變,光鏡觀察腎皮質(zhì)和髓質(zhì)結(jié)構(gòu)的改變;③用RT-PCR方法觀察腎髓質(zhì)組織勻漿UT-A1mRNA表達(dá)量的變化。（3）慶大霉素組Ⅱ(Gent組Ⅱ，n=5),腹腔注射慶大霉素140mg/KgBW/day或200mg/KgBW/day或400mg/KgBW/day，每日一次，共3天，制備成急性腎損傷模型，在實(shí)驗(yàn)的第3天處死大鼠，用RT-PCR方法觀察腎髓質(zhì)組織勻漿UT-A1mRNA表達(dá)量的變化。(4)慶大霉素組Ⅲ(Gent組Ⅲ，n=25),腹腔注射慶大霉素，400mg/KgBW/day，每日一8次

5、，共3天，制備成急性腎損傷模型。在實(shí)驗(yàn)的第2小時(shí)，第6小時(shí)，第24小時(shí)，第48小時(shí)，第72小時(shí)處死大鼠，用RT-PCR方法觀察腎髓質(zhì)組織勻漿UT-A1mRNA表達(dá)量的變化。結(jié)果：（1）Gent組Ⅰ于實(shí)驗(yàn)的第3天和第7天UV、SCr、BUN水平顯著高于Cont組，p<0.05；尿滲透壓低于Cont組，p<0.05；第一天和第14天與Cont組比較無明顯差別，p>0.05;光鏡下各組腎小球及腎血管未觀察到明顯病變，各組遠(yuǎn)端小管和集合管上皮細(xì)胞病理改變亦不明顯，注射Gent后第3天，Gent組Ⅰ可見腎皮質(zhì)內(nèi)開始出現(xiàn)炎細(xì)胞的灶性浸潤，部分近曲小管出現(xiàn)上皮

6、細(xì)胞空泡變性及壞死、脫落，5只大鼠組織學(xué)分級(jí)為1級(jí)2只、2級(jí)2只，3級(jí)1只;注射Gent后第7天，Gent組Ⅰ腎皮質(zhì)內(nèi)幾乎全部近曲小管上皮細(xì)胞出現(xiàn)廣泛性壞死，壞死的上皮細(xì)胞脫落入管腔，致使管腔內(nèi)充滿紅色顆粒狀壞死物，阻塞管腔，部分腎小管內(nèi)可見蛋白管型，3只大鼠組織學(xué)分級(jí)為4級(jí)，2只為3級(jí)；Gent組Ⅰ第14天近曲小管結(jié)構(gòu)開始恢復(fù)，出現(xiàn)新生的近曲腎小管上皮細(xì)胞，5只大鼠組織學(xué)分級(jí)為1級(jí)3只，0級(jí)2只，Gent組Ⅰ第1天和Cont組未見明顯的病理改變，全部大鼠組織學(xué)分級(jí)皆為0級(jí)；Gent組Ⅰ隨時(shí)間延長(zhǎng)，UT-A1mRNA表達(dá)量與對(duì)照組比較逐漸降低,第

7、3天和第7天UT-A1mRNA表達(dá)量與對(duì)照組比較P值分別為0.019和0.012，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，第1天和第14天UT-A1mRNA表達(dá)量與對(duì)照組比較P值分別為0.961和0.859，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（2）140mg/KgBW/day、200mg/KgBW/day和400mg/KgBW/day慶大霉素誘導(dǎo)大鼠急性腎損傷后第3天，腎髓質(zhì)組織UT-A1mRNA表達(dá)明顯降低，呈劑量依賴性，9140mg/KgBW/day和200mg/KgBW/day比較，差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；400mg/KgBW/day與140mg/KgBW/day和200mg/KgBW/da

8、y比較，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（3）Gent組Ⅲ與對(duì)照組比較，第2小時(shí)P值為0.022，P〈0.05，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；第6小時(shí)、第24小時(shí)