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《慢性乙型肝炎病毒感染者外周血單個(gè)核細(xì)胞中微小RNA的表達(dá)分析及其功能研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號(hào)UDC博士學(xué)位論文密級(jí)慢性乙型肝炎病毒感染者外周血單個(gè)核細(xì)胞中微小RNA的表達(dá)分析及其功能研究StudyonmicroRNAexpressionandfunctioninperioheralbloodmononuclearcellsfromoatientsl00tlmononuclearcellsIroatientswithchronichepatitisBvirusinfection作者姓名：學(xué)科專業(yè)：學(xué)院(系、所)：指導(dǎo)教師：、副指導(dǎo)教師：論文答辯日期!■一陳莉內(nèi)科學(xué)(感染病學(xué))湘雅醫(yī)院譚德明教授李聰智副教授答辯委員會(huì)主席中
2、南大學(xué)二零一二年九月一令一一，牛7乙月原創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中南大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對(duì)本研究所作的貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說明。作者盛名：!生自日期：旦年蘭月』日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并根據(jù)國家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文，允許學(xué)位論文被查閱和借閱；學(xué)
3、?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。作者簽名：j生蘭L導(dǎo)師簽名繪期：竺年二月蘭日摘要研究背景：乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus，HBV)感染所致的慢加急性肝衰竭(HBV-relatedacute．on．chronicliverfailure，ACLF)是臨床常見的危重癥，病死率較高，對(duì)人類危害嚴(yán)重。關(guān)于ACLF的發(fā)病機(jī)制，目前認(rèn)為主要包括病毒復(fù)制和宿主免疫反應(yīng)及其相互作用兩
4、個(gè)方面，但是HBV無直接致細(xì)胞病變效應(yīng)，其本身并不直接對(duì)感染細(xì)胞產(chǎn)生破壞效應(yīng)，由此人們認(rèn)為ACLF發(fā)病機(jī)制的主要環(huán)節(jié)為病毒在一定條件下所誘發(fā)的宿主免疫應(yīng)答異常。微小RNA(microRNA，miRNA)是近年來新發(fā)現(xiàn)的一類非編碼小分子RNA。miRNA表達(dá)豐富，作用廣泛，胚胎發(fā)育、細(xì)胞增殖分化均受miRNA的調(diào)控，同時(shí)miRNA也參與機(jī)體免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)。miRNA可以通過Toll樣受體(Toll．1ikereceptors，TLRs)與細(xì)胞因子信號(hào)途徑對(duì)機(jī)體固有免疫進(jìn)行調(diào)控，也可通過干擾抗原呈遞及T細(xì)胞受體(Tcellreceptor
5、s，TCRs)途徑對(duì)機(jī)體適應(yīng)性免疫進(jìn)行調(diào)控。作為機(jī)體免疫應(yīng)答的始動(dòng)者，miRNA在HBV感染發(fā)病機(jī)制中的作用也日益得到重視。多項(xiàng)研究已經(jīng)證實(shí)，多個(gè)miRNA參與控制HBV復(fù)制、HBV相關(guān)肝臟疾病的進(jìn)展，尤其是肝硬化和肝細(xì)胞癌的進(jìn)展；也有研究發(fā)現(xiàn)對(duì)于接受干擾素(interferon，IFN)治療的慢性HBV或丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus，HCV)感染者，可利用患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(Peripheralbloodmononuclearcells，PBMC)中miRNA表達(dá)水平的變化來協(xié)助判斷疾病的臨床轉(zhuǎn)歸。然而關(guān)于miRN
6、A與ACLF的關(guān)系，目前知之甚少。研究目的：(1)了解肝臟炎癥程度不同的慢性HBV感染者PBMC中miRNA的表達(dá)譜。(2)確認(rèn)慢性HBV感染者PBMC中是否存在與肝臟炎癥程度相關(guān)的特異性miRNA。(3)對(duì)特異性miRNA可能的靶基因進(jìn)行預(yù)測(cè)，了解慢性HBV感染者PBMC中特異性miRNA靶基因的表達(dá)水平。(4)對(duì)miR．197、miR-328的靶基因進(jìn)行確認(rèn)，初步探討慢性HBV感染者體內(nèi)miR-197、miR-328的作用途徑。研究方法：(1)應(yīng)用miRNA基因芯片技術(shù)對(duì)HBV相關(guān)的4例無癥狀攜帶者(asymptomaticcar
7、rier，ASC)及4例ACLF患者PBMC中miRNA的表達(dá)譜進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)差異性表達(dá)的miRNA進(jìn)行篩選。(2)采用TargetScan5．2，DIANA-microT3．0及Pictar生物軟件對(duì)miR-197、miR-328的靶基因進(jìn)行預(yù)測(cè)。(3)采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real-timepolymerasechainreaction，real—timePCR)對(duì)HBV相關(guān)的70例ASC，107例慢性乙型肝炎(chronichepatitisB，CHB)患者，76例ACLF患者，及51例健康對(duì)照者PBMC中miR-150
8、、miR-197、miR．223、miR-328、miR．30a、miR．574．3p的表達(dá)水平進(jìn)行驗(yàn)證分析；同時(shí)對(duì)PBMC中miR-197的靶基因白細(xì)胞介素18(intedeukin18，ILl8)、腫瘤壞死因子配體超
