《生長(zhǎng)繁殖及控制》PPT課件

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1、第七章微生物的生長(zhǎng)繁殖及其控制本章主要內(nèi)容微生物生長(zhǎng)研究方法？微生物如何進(jìn)行生長(zhǎng)？影響微生物生長(zhǎng)的因素是什么？如何控制微生物的生長(zhǎng)？生物個(gè)體物質(zhì)有規(guī)律地、不可逆增加，導(dǎo)致個(gè)體體積擴(kuò)大的生物學(xué)過程。生長(zhǎng):生物個(gè)體生長(zhǎng)到一定階段,通過特定方式產(chǎn)生新的生命個(gè)體,即引起生命個(gè)體數(shù)量增加的生物學(xué)過程。繁殖:生長(zhǎng)是一個(gè)逐步發(fā)生的量變過程，繁殖是一個(gè)產(chǎn)生新的生命個(gè)體的質(zhì)變過程.在高等生物里這兩個(gè)過程可以明顯分開,但在低等特別是在單細(xì)胞的生物里,由于細(xì)胞小,這兩個(gè)過程是緊密聯(lián)系又很難劃分的過程。一個(gè)微生物細(xì)胞合適的外界條件,吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),進(jìn)行代謝.如果同化作用的速度超過了異化作用個(gè)體的生長(zhǎng)

2、原生質(zhì)的總量(重量、體積、大小)不斷增加如果各細(xì)胞組分是按恰當(dāng)?shù)谋壤鲩L(zhǎng)時(shí),則達(dá)到一定程度后就會(huì)發(fā)生繁殖,引起個(gè)體數(shù)目增加.群體內(nèi)各個(gè)個(gè)體的進(jìn)一步生長(zhǎng)群體的生長(zhǎng)群體生長(zhǎng)=個(gè)體生長(zhǎng)+個(gè)體繁殖個(gè)體生長(zhǎng)→個(gè)體繁殖→群體生長(zhǎng)在一定時(shí)間和條件下細(xì)胞數(shù)量的增加（微生物群體生長(zhǎng)）微生物生長(zhǎng):在微生物學(xué)中提到的“生長(zhǎng)”,一般均指群體生長(zhǎng),這一點(diǎn)與研究大生物時(shí)有所不同。一、微生物純培養(yǎng)方法純培養(yǎng)(pureculture)——微生物學(xué)中把從一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)繁殖而得到的后代,稱純培養(yǎng)。第一節(jié)微生物生長(zhǎng)的研究方法①平板涂布分離法（SpreadPlate）簡(jiǎn)單易行，但易造成機(jī)械損傷②平板劃線分離法（

3、StreakPlate）特點(diǎn)：快速、方便。分區(qū)劃線（適用于濃度較大的樣品）連續(xù)劃線（適用于濃度較小的樣品）③稀釋倒平板法（PourPlate）1ml1ml1ml1ml1ml1ml9ml9ml9ml9ml首先將待分離的樣品進(jìn)行連續(xù)稀釋,目的是得到高度稀釋的效果,使一支試管中分配不到一個(gè)微生物.這種方法適合于細(xì)胞較大的微生物.④液體稀釋法⑤選擇性培養(yǎng)分離法為了從混雜的微生物群體中分離出某種微生物，可以根據(jù)該微生物的特點(diǎn)，包括營(yíng)養(yǎng)、生理、生長(zhǎng)條件等，采用選擇培養(yǎng)的方法進(jìn)行分離。利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行直接分離富集培養(yǎng)⑥單細(xì)胞（單孢子）分離法毛細(xì)管法：用毛細(xì)管提取微生物個(gè)體，適合于較大微

4、生物。顯微操作儀：用顯微針、鉤、環(huán)等挑取單個(gè)細(xì)胞或孢子以獲得純培養(yǎng)。小液滴法：將經(jīng)過適當(dāng)稀釋后的樣品制成小液滴，在顯微鏡下選取只含一個(gè)細(xì)胞的液滴來進(jìn)行純培養(yǎng)物的分離。二、微生物的培養(yǎng)方法通常情況下，微生物的培養(yǎng)方法根據(jù)培養(yǎng)過程中對(duì)氧的需要與否分為好氧培養(yǎng)和厭氧培養(yǎng)；根據(jù)所用培養(yǎng)基的物理特性分為固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)。（一）、好氧培養(yǎng)方法1、固體培養(yǎng)方法2、液體培養(yǎng)方法（二）、厭氧培養(yǎng)方法實(shí)驗(yàn)室中常用厭氧手套箱、Hungate滾管及厭氧罐通常用來測(cè)定細(xì)菌、酵母菌等單細(xì)胞微生物的生長(zhǎng)情況或樣品中所含微生物個(gè)體的數(shù)量(細(xì)菌、孢子、酵母菌)三、生長(zhǎng)繁殖測(cè)定方法（一）、計(jì)數(shù)法1、顯微鏡直

5、接計(jì)數(shù)法1）常規(guī)方法：采用細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血球計(jì)數(shù)板,在顯微鏡下對(duì)微生物數(shù)量進(jìn)行直接計(jì)數(shù)(計(jì)算一定容積里樣品中微生物的數(shù)量).缺點(diǎn):不能區(qū)分死菌與活菌;不適于對(duì)運(yùn)動(dòng)細(xì)菌的計(jì)數(shù);需要相對(duì)高的細(xì)菌濃度;個(gè)體小的細(xì)菌在顯微鏡下難以觀察;2）其它方法:將已知顆粒濃度的樣品(例如血液)與待測(cè)細(xì)胞細(xì)胞濃度的樣品混勻后在顯微鏡下根據(jù)二者之間的比例直接推算待測(cè)微生物細(xì)胞濃度。比例計(jì)數(shù):2、涂布平板計(jì)數(shù)法采用培養(yǎng)平板計(jì)數(shù)法要求操作熟練,準(zhǔn)確,否則難以得到正確的結(jié)果:樣品充分混勻；每支移液管及涂布棒只能接觸一個(gè)稀釋度的菌液；同一稀釋度三個(gè)以上重復(fù),取平均值；每個(gè)平板上的菌落數(shù)目合適，便于準(zhǔn)確計(jì)數(shù)；

6、一個(gè)菌落可能是多個(gè)細(xì)胞一起形成,所以在科研中一般用菌落形成單位(colonyformingunits,CFU)來表示,而不是直接表示為細(xì)胞數(shù)。3、倒平板計(jì)數(shù)法（PourPlate）1ml1ml1ml1ml1ml1ml9ml9ml9ml9ml4、膜過濾培養(yǎng)法當(dāng)樣品中菌數(shù)很低時(shí),可以將一定體積的湖水、海水或飲用水等樣品通過膜過濾器,然后將將膜轉(zhuǎn)到相應(yīng)的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),對(duì)形成的菌落進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。（二）、生物量法1、比濁法在一定波長(zhǎng)下,測(cè)定菌懸液的光密度,以光密度(opticaldensity,即O.D.)表示菌量。實(shí)驗(yàn)測(cè)量時(shí)應(yīng)控制在菌濃度與光密度成正比的線性范圍內(nèi),否則不準(zhǔn)確。2、

7、重量法干重法：將微生物菌體或離心得到的細(xì)胞沉淀物置100—105℃的烘箱中干燥至水份去除，然后再稱重。濕重法：收集微生物菌體，或?qū)⑽⑸锱囵B(yǎng)液離心，收集細(xì)胞沉淀物，然后稱重。通過樣品中蛋白質(zhì)、核酸含量的測(cè)定間接推算微生物群體的生物量；測(cè)定多細(xì)胞及絲狀真菌生長(zhǎng)情況的有效方法（三）、生理指標(biāo)法微生物的生理指標(biāo),如呼吸強(qiáng)度,耗氧量、酶活性、生物熱等與其群體的規(guī)模成正相關(guān)。樣品中微生物數(shù)量多或生長(zhǎng)旺盛,這些指標(biāo)愈明顯,因此可以借助特定的儀器如瓦勃氏呼吸儀、微量量熱計(jì)等設(shè)備來測(cè)定相應(yīng)的指標(biāo)。常用于對(duì)微生物的快速鑒定與檢測(cè)四、