Scriptaid對(duì)體細(xì)胞核移植豬胚胎發(fā)育的影響

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1、甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)2017屆碩士學(xué)位論文分類號(hào)密級(jí)UDC單位代碼10733甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文Scriptaid對(duì)體細(xì)胞核移植豬胚胎發(fā)育的影響Effectofscriptaidonembryonicdevelopmentofsomaticcellnucleartransferswine盧富春論文指導(dǎo)老師史兆國(guó)教授（甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)蘭州730070）學(xué)位名稱農(nóng)業(yè)碩士專業(yè)領(lǐng)域養(yǎng)殖論文答辯日期2017年11月24日學(xué)位授予日期2017年12月答辯委員會(huì)主席滾雙寶教授評(píng)閱人孫超教授孫世鐸教授王自科高級(jí)畜牧師20

2、17年11月1甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)2017屆碩士學(xué)位論文EffectofscriptaidonembryonicdevelopmentofsomaticcellnucleartransferswineByLuFuchunAThesisSubmittedToGansuAgriculturalUniversityinPartialFulfilmentoftheRequirmentsForMasterDegreeSupervisor:Prof.ShiZhaoguoFacultyofAnimalSciencean

3、dTechnologyGansuAgriculturalUniversity,LanZhou,P.R.730070CompletedinOctober,2017CommencementinNovember,20172甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)2017屆碩士學(xué)位論文摘要體細(xì)胞核移植技術(shù)對(duì)于動(dòng)物繁育、地方優(yōu)良種質(zhì)資源保存、瀕危動(dòng)物保護(hù)以及發(fā)育生物學(xué)基礎(chǔ)理論研究等均具有重要意義，但目前體細(xì)胞核移植仍還存在克隆效率低、孕期流產(chǎn)率高、克隆胚胎發(fā)育能力差、出生后生長(zhǎng)異常、供體和受體同步協(xié)調(diào)性不一致、克隆動(dòng)物表型正常而實(shí)質(zhì)異

4、常、理論和技術(shù)還很不成熟等問(wèn)題，這些已成為制約這一技術(shù)應(yīng)用和商業(yè)化推廣的主要障礙，因此完善體細(xì)胞核移植技術(shù)體系，探明核移植技術(shù)機(jī)理乃是當(dāng)前急需解決的難題。本研究致力于檢測(cè)一種低毒新型的組蛋白去乙酰化酶抑制劑Scriptaid對(duì)體細(xì)胞核移植豬胚胎克隆效果的研究，在之前研究的高毒性組蛋白去乙?；敢种苿┣乓志兀═SA）的基礎(chǔ)上，使用Scriptaid對(duì)體細(xì)胞克隆豬胚胎進(jìn)行不同濃度和不同時(shí)間的處理，體外檢測(cè)胚胎分裂率和發(fā)育能力。本試驗(yàn)以對(duì)照試驗(yàn)作為基礎(chǔ)，以凌源禾豐種豬場(chǎng)長(zhǎng)白豬胎兒成纖維作為供體細(xì)胞，

5、然后通過(guò)體細(xì)胞核移植（SCNT）技術(shù)獲得體外發(fā)育胚胎，將重構(gòu)胚胎用不同濃度（0，200，500，700和900nmol/L）Scriptaid處理后，并進(jìn)行不同時(shí)間(0，15，36和72h)的培養(yǎng)，觀察不同處理濃度和處理時(shí)間下胚胎在2細(xì)胞階段卵裂率、桑椹胚率、囊胚率，同時(shí)通過(guò)Real-timePCR檢測(cè)囊胚期對(duì)照組與Scriptaid處理組的Oct4，Sox2兩個(gè)基因的相對(duì)表達(dá)變化。結(jié)果表明：與非處理組相比，用500nmol/LScriptaid處理核移植胚胎桑椹胚率和囊胚率最高，分別達(dá)到50%和

6、25.9%（P<0.05），各處理組間2細(xì)胞分裂率差異均不顯著（P>0.05）；在不同處理時(shí)間上，用500nmol/LScriptaid處理15h后桑椹胚率和囊胚形成率最高，分別達(dá)到52%和27%（P<0.05），在處理72h后桑椹胚率顯著低于0h處理（P<0.05），囊胚形成率呈現(xiàn)降低趨勢(shì)（0.05

7、Sox2mRNA的表達(dá)差異不明顯（0.05

8、碩士學(xué)位論文AbstractSomaticcellnucleartransplantation(SCNT)isapowerfultechniquewhichisbenefitforanimalreproductionandbreeding,localgermplasmresourcespreservation,extinctedanimalpreservationanditalsoplaysanimportantroleforthesolutionofmanybasicbiolog