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《脫氧雪腐鐮刀菌烯醇降解菌的篩選與鑒定》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、糧油食品科技第21卷2013年第5期生物工程脫氧雪腐鐮刀菌烯醇降解菌的篩選與鑒定1，2222程亮，伍松陵，沈晗，孫長(zhǎng)坡(1．河南工業(yè)大學(xué)生物工程學(xué)院，河南鄭州450001;2．國(guó)家糧食局科學(xué)研究院，北京100037)摘要:以脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON)為唯一碳源，通過(guò)平板分離純化，經(jīng)高效液相色譜(HPLC)檢測(cè)，對(duì)降解效果較高的菌株進(jìn)行分子鑒定。最終篩選得到的菌株對(duì)DON的降解率達(dá)56．61%，通過(guò)16SrDNA序列分析，鑒定為假單胞桿菌，為更進(jìn)一步的研究提供了菌株材料。關(guān)鍵詞:脫氧雪腐鐮刀菌烯醇;篩選;鑒定;降解中圖分類號(hào):Q93
2、－331文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1007－7561(2013)05－0095－03Screenandidentificationofdeoxynivalenoldegradationstrains1，2222CHENGLiang，WUSong－ling，SHENHan，SUNChang－po(1．CollegeofBioengineering，HenanUniversityofTechnology，ZhengzhouHenan450001;2．AcademyofStateAdministrationofGrain，Beijing10
3、0037)Abstract:Takingdeoxynivalenol(DON)asthesolecarbonsource，thestrainswithhighdegradationeffectweremolecularidentified，afterseparationandpurificationbyplateanddetectionbyhighperformanceliquidchromatography(HPLC)．ThedegradationrateoftheselectedstrainstoDONachieved56．61
4、%．ThosestrainswereidentifiedasPseudomonasvia16SrDNAsequencing，whichprovidedhelpforthefurtherresearch．Keywords:deoxynivalenol;screening;identification;degradation脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol，DON)，又目前國(guó)內(nèi)外較為普遍的去除真菌毒素的方法主［11］名為嘔吐毒素(vomitoxin)，其化學(xué)名稱為3，7，15－要有物理吸附、化學(xué)處理和生物轉(zhuǎn)化等。物理吸三
5、羥基－12，13－環(huán)氧單端孢霉－9－烯－8－酮，為附主要是吸附一些有極性的真菌毒素，并不是真正雪腐鐮刀菌烯醇的脫氧衍生物，是單端孢霉烯族毒去除?；瘜W(xué)方法可以破壞大多數(shù)真菌毒素，但破壞素中的一種，主要是某些鐮刀菌產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)了營(yíng)養(yǎng)成分并影響適口性。生物轉(zhuǎn)化將真菌毒素轉(zhuǎn)物，廣泛存在于污染的小麥、大麥、燕麥、玉米等谷物化或代謝為無(wú)害的產(chǎn)物，而且不會(huì)導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)成分丟［1－3］和飼料中。失，不改變適口性，因而被認(rèn)為是去除飼料中真菌毒［12］畜禽DON中毒癥狀主要表現(xiàn)為拒食、嘔吐、免素的最佳方法。本實(shí)驗(yàn)室從土壤中分離到一株疫力下降、母畜不孕或
6、流產(chǎn)以及死亡等;慢性蓄積會(huì)能以脫氧雪腐鐮刀菌烯醇為唯一碳源生長(zhǎng)并轉(zhuǎn)化導(dǎo)致畜禽食欲減退、日增重下降、營(yíng)養(yǎng)不良、神經(jīng)內(nèi)DON的細(xì)菌，以用于DON的生物轉(zhuǎn)化和霉變糧食［4］分泌改變、免疫抑制等。DON具有很強(qiáng)的細(xì)胞毒的脫毒。性，它對(duì)于原核細(xì)胞、真核細(xì)胞、植物細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞1材料與方法等均具有明顯的毒性作用。DON對(duì)紅細(xì)胞具有溶1．1材料［5］血作用，還可作用于骨髓造血細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞毒1．1．1樣品和試劑［6］性，也作用于T細(xì)胞、B細(xì)胞、IgA+細(xì)胞產(chǎn)生免疫篩選樣品采自全國(guó)各地受DON污染的土壤和［7］毒性作用，抑制或增加細(xì)胞程序死亡。多數(shù)研
7、究糧食樣品。都表明DON具有胚胎毒性和致畸作用。動(dòng)物試驗(yàn)生物降解實(shí)驗(yàn)中使用的DON為經(jīng)本實(shí)驗(yàn)室固態(tài)表明，長(zhǎng)期小劑量飼喂含DON或其它毒素的飼料，發(fā)酵提純獲得;DON標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)自美國(guó)Sigma公司。［8－10］可以誘發(fā)不同器官的腫瘤。PCR、克隆pMD19－T載體、連接所用試劑均購(gòu)收稿日期:2013－01－08自TaKaRa公司;PCR產(chǎn)物膠回收試劑購(gòu)自Axygen基金項(xiàng)目:國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(2013CB127805);國(guó)家科技支撐計(jì)劃(2011BAD03302－2)公司;其它所用試劑為常用生化試劑。作者簡(jiǎn)介:程亮，1987年出
8、生，男，碩士．通訊作者:孫長(zhǎng)坡，1975年出生，男，博士，研究員．95生物工程糧油食品科技第21卷2013年第5期1．1．2培養(yǎng)基TAACAAGGTAACCGTAGGGGA－3')。提取細(xì)菌基［15］基礎(chǔ)富集培養(yǎng)基:蛋白胨10g，Na
