脫氧雪腐鐮刀菌烯醇檢測方法的建立.pdf

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3、標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究結果，也不包含其他人和自己本人已獲得西北農林科技大而使一工機位過材料。對或或證與的研究其它教構的書用的我同作同事本學育學田論文的致謝了確的說示。所做的任何貢獻均在中作明明并表了謝意３＾日名；／＾批究生簽：＜時年月研氣間為）｜據(jù)｜生導指導究學文的承諾師研位論人承諾：的業(yè)位碩去研究生＾所呈交的碩去位論文本我專學學是在我指導下獨立開展研究工作及取得的研究結果，屬于我現(xiàn)崗職務王作的結果，并格按照校《關于規(guī)范西北農林科技大研生

4、術道德的行規(guī)定》嚴學學究學暫而獲如關北技大生道的研結果。果違反?！队谝?guī)范西農林科究術德得究學學研學的行規(guī)定》，愿接受按校關規(guī)定處罰處理承擔相應師連任。暫我學有的并導帶責－之若Ｊ曰簽時間：月導師：年Classificationcode:S851.34+7Universitycode:10712UDC:614.3Postgraduatenumber:2014050748Confidentialitylevel:PublicThesisforMaster’sDegreeNorthwestA＆FUni

5、versityin2016EstablishmentofdetectionmethodofDeoxynivalenolMajor:MasterofVeterinaryResearchfield:ClinicalVeterinaryMedicineNameofPostgraduate:XiaonanLiAdviser:Associateprofessor.QiangDongDateofsubmission:May2016YanglingShaanxiChina脫氧雪腐鐮刀菌烯醇檢測方法的建立摘要畜產品安全是目前養(yǎng)

6、殖業(yè)關注的一個熱點，把控好畜產品安全的每一關都至關重要。霉菌毒素對動物和人類的健康構成了巨大威脅。脫氧雪腐鐮刀菌烯醇又名嘔吐毒素，其被認為是谷物或飼料中常見的最危險的霉菌毒素之一，并且在全球范圍內嘔吐毒素污染谷物和飼料的狀況最為常見，形勢較為嚴峻。該毒素可引起急性、慢性、細胞性以及生殖毒性，對動物和人的健康造成很大威脅。且目前市場上常用的檢測法，如膠體金快速檢測試紙條、ELISA檢測試劑盒質量參差不齊，急需改進并尋求新的檢測法應用于臨床。本文研究建立了兩種方法用于脫氧雪腐鐮刀菌烯醇毒素的殘留檢測，并在基礎上完成

7、了試劑盒的制備，為飼糧中嘔吐毒素的檢測提供了依據(jù)。兩種嘔吐毒素殘留檢測的方法，分別為酶聯(lián)免疫檢測法和化學發(fā)光酶免檢測法。首先對各反應條件進行了優(yōu)化：1、通過棋盤法確定了抗原抗體的最適工作比例；2、對兩種檢測法的緩沖體系與反應模式進行優(yōu)化，確立了各種反應條件與模式；3、通過以上條件的篩選最終建立合適的標準曲線，確定了最低檢測限；4、對以上建立的方法做添加回收實驗，篩選合適的回收方法；5、對兩種檢測法的各種性能指標進行檢測，包括準確性、精密性、穩(wěn)定性以及是否存在交叉反應等，如有必要再對之前的各條件進行優(yōu)化，最終建立

8、一個完整的檢測嘔吐毒素的間接競爭檢測方法。經(jīng)過優(yōu)化后，最終確定嘔吐毒素酶免檢測試劑盒的檢測限(IC15)為10ppb，線性范圍為10-810ppb，試劑盒的檢測靈敏度為60.9ppb；做12種樣品的添加回收實驗，回收率在88.7%-116.3%，批內變異在2.14%-9.97%，批間差異最高為10.82%，且試劑盒的穩(wěn)定性很好，整體變幅在30%以內。嘔吐毒素化學發(fā)光酶免疫檢測方法的檢測