槐花米中蘆丁的鑒定

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1、上次實(shí)驗(yàn)報(bào)告的修訂45圖1聚酰胺色譜柱層析后的收集液的聚酰胺薄膜層析分析圖說明：圖1中的1表示收集液1；2表示收集液2；3表示收集液3；4表示蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品；5表示槲皮素標(biāo)準(zhǔn)品。12345上次實(shí)驗(yàn)報(bào)告的修訂結(jié)論：因?yàn)镽fa=Rfd，說明收集液1是蘆丁。因?yàn)镽fb1=Rfd；Rfb2=Rfe，說明收集液2是蘆丁和槲皮素的混合物。因?yàn)镽fc=Rfe；說明收集液3是槲皮素。所以，用聚酰胺柱層析的方法分離蘆丁和槲皮素，用50%的乙醇，90%的乙醇梯度洗脫時(shí)，先從柱子流出的是蘆丁，其次是槲皮素。實(shí)驗(yàn)五槐花米中蘆丁的鑒定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)?/p>

2、的掌握硅膠薄層層析鑒定鼠李糖和葡萄糖的方法。掌握蘆丁和槲皮素的化學(xué)檢識(shí)方法。二．實(shí)驗(yàn)原理1.根據(jù)鼠李糖和葡萄糖在硅膠板上的分配系數(shù)不同達(dá)到分離的目的。2.根據(jù)蘆丁和槲皮素的理化性質(zhì)來檢識(shí)蘆丁和槲皮素。三．實(shí)驗(yàn)操作（一）糖液的硅膠薄層層析1.硅膠板的活化；2.配制展開劑，正丁醇：醋酸：水＝4：1：53.將展開劑倒入層析缸中，展開缸中展開劑的高度4mm左右。4.畫基線，基線距底邊1.0～1.5cm；（一）糖液的硅膠薄層層析5.點(diǎn)樣（點(diǎn)樣順序?yàn)椋禾且?、鼠李糖、葡萄糖），點(diǎn)樣一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣直徑一般不大于2mm，點(diǎn)樣時(shí)必須

3、注意勿傷薄層表面。6.將硅膠板放入展開缸的展開劑中，浸入展開劑的深度為距圓點(diǎn)5mm為宜，一般展距為8cm，取出薄層板，晾干。（一）糖液的硅膠薄層層析7.噴苯胺－鄰苯二甲酸試劑，在105℃下烘10min。8.實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖1。（二）蘆丁、槲皮素及糖的化學(xué)檢識(shí)1.濃硫酸和濃鹽酸反應(yīng)取蘆丁或槲皮素?cái)?shù)毫克于比色瓷板上，分別加濃硫酸或濃鹽酸1滴，注意呈色變化，研磨后溶解成橙色溶液，加較多量的水稀釋后轉(zhuǎn)為淺黃色，析出黃色沉淀。2.酸性試驗(yàn)：取小試管8支，每4支一組，第一組每管中加入蘆丁1mg，第二組每管中加入槲皮素1mg，每組試

4、管中分別加入稀氨水、5%碳酸氫鈉、5%碳酸鈉水溶液、1%氫氧化鈉水溶液各2ml，振搖后觀察各管溶解情況。溶解的溶液應(yīng)呈黃色。再加濃鹽酸滴酸化，黃色褪去或變淺，并有沉淀析出或產(chǎn)生混濁。3.莫氏（molish）反應(yīng)取試樣1mg置小試管中，加乙醇1ml溶解，加α-萘酚1-2滴，搖勻，傾斜試管，沿管壁徐徐注入濃H2SO4約1ml，靜置。觀察兩層溶液的界面變化，出現(xiàn)紫色環(huán)者為陽性，表示樣品分子中含有糖的結(jié)構(gòu)（糖和苷類均呈陽性反應(yīng)）。比較蕓香苷和槲皮素的不同。4.鎂粉—鹽酸試驗(yàn)：取蘆丁1mg，加乙醇2ml在水浴上加熱溶解，加入

5、少許鎂粉，滴加數(shù)滴濃HCl，溶液由黃色漸變紅色者表示有黃酮類化合物。以同法試驗(yàn)槲皮素。5.三氯化鋁反應(yīng)：取樣品1mg溶于1ml乙醇中，加1%三氯化鐵乙醇液2-3滴，黃酮類呈鮮黃色。6.醋酸鎂反應(yīng)取樣品乙醇液與醋酸鎂試劑作紙上反映，觀察熒光。二氫黃酮，二氫黃酮醇類可顯天藍(lán)色熒光，若有5-OH，色澤更明顯。而黃酮，黃酮醇和異黃酮類等顯黃色—橙色—褐色熒光。7.三氯化鐵反應(yīng)取樣品1mg溶于1ml乙醇中，加1%三氯化鐵乙醇液1-2滴，注意呈色變化。一般對黃酮類3-羥基者呈褐色，5-羥基者呈綠色，3、5-二羥基者呈深藍(lán)色。