槐花米中蘆丁的提取分離與鑒定

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1、槐花米中蘆丁的提取分離與鑒定實(shí)驗(yàn)一預(yù)試；背的堿提取，酸沉淀；薄層層析鋪板。實(shí)驗(yàn)二產(chǎn)品的精制:重結(jié)晶；晉的水解。實(shí)驗(yàn)三昔、昔元的定性鑒定；試、試元的TLC鑒定；糖的紙層析鑒定?；被字刑J丁的提取分離與鑒定（-）預(yù)試；昔的堿提取，酸沉淀；薄層層析鋪板。（二）產(chǎn)品的精制:重結(jié)晶；甘的水解。（三）昔、昔元的定性鑒定；貳、貳元的TLC鑒定；糖的紙層析鑒定。教學(xué)目的：1.掌握酸堿法提取黃酮甘類的原理及方法。2.掌握化學(xué)鑒別試驗(yàn)、背水解、薄層層檢查等手段在苜類結(jié)構(gòu)鑒定上的作用。已知重要成分及其性質(zhì)1.蘆?。ㄊ|香rutin）淡黃色針晶，水屮結(jié)晶者含3分結(jié)晶水，C27H30O16-3H2Ol

2、OOmmHg和11O°C加熱12小時(shí)后，變?yōu)闊o(wú)水物，無(wú)水物于25°C變棕，115?7°C軟化，214?5°C發(fā)泡分解，lg蘆丁溶于約3OOml冷水，200ml沸水，7ml沸甲醇，溶毗噪，甲酰胺和堿液，微溶于乙醇、丙酮、乙酸乙酯，不溶于氯仿，二硫化碳、乙瞇、苯和石油瞇。2.榊皮素(Guereetin)為蘆丁的苜元，CI5H

3、0O7,MW302.23；含二分子結(jié)晶水為黃色針晶，（稀乙醇），5?7°C失水，314°C解，lg溶于290ml無(wú)水乙醇、23ml沸乙醇，溶于冰醋-般在堿水中溶解顯黃色，幾不溶于水。R=——glu一rhaR=—OH蘆丁懈皮素3.皂昔(Saponin)易溶于

4、毗呢。能溶于200倍的甲粗品為白色粉末，mp210°C?20°C（dec）o醇，酸水解得下列兩種背元及糖。糖為葡萄糖，葡萄糖醛酸和葡萄醛酸內(nèi)酯。（1）白樺酯醇（Betulin）無(wú)色針晶，mp215?2°C,能溶于醋酸,丙酮、醋酸乙酯、甲醇、乙醇、氯仿、苯等；難溶于右油醯和水。(2)槐花二醇(Sophoradiol)無(wú)色針晶,醯、苯、丙酮、甲醇、難溶于水。整套實(shí)驗(yàn)的過(guò)程：預(yù)試——提取分離——鑒定實(shí)驗(yàn)一預(yù)試；貳的堿提取，酸沉淀實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^(guò)系統(tǒng)預(yù)試，了解檢品中含有哪些類型的成分，對(duì)能含有哪些化學(xué)類型的成分，為進(jìn)一步提取分離冇效成分捉供線索。實(shí)驗(yàn)原理原理：蘆丁即蕓香貳，它屬黃酮貳類

5、，其分子中的酚徑基呈弱酸性,可用堿溶、酸沉淀的方法進(jìn)行提取。再利用它易溶于熱水、熱甲醇，難溶于冷甲醇的性質(zhì)分離精制。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容預(yù)試；昔的堿提取，酸沉淀；薄層層析鋪板。實(shí)驗(yàn)所用試劑及儀器：試劑：槐花米15g+lg,乙醇，鎂粉，濃鹽酸，1%三氯化鋁，3%三氯化鐵乙醇溶液，10%口一蔡酚醇液，蒸館水，硅膠G,0.3%?0.5%CMC水溶液儀器：研缽天平試管水浴裝置（70°C）過(guò)濾量筒濾紙，200目尼龍布，電爐，真空泵，布氏漏斗，剪刀，玻璃板，鋪板器，薄層板放置架，漏斗實(shí)驗(yàn)步』一、預(yù)試：（-）意義：通過(guò)系統(tǒng)預(yù)試，了解檢品中含有哪些類型的成分，可能含有哪些化學(xué)類型的成分，為進(jìn)一步提取分

6、離有效成分提供線索。（-）實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：1.記錄待預(yù)試天然藥物（以卜?均稱檢品）的學(xué)名、植物來(lái)源、藥用部分及特征（如色澤、嗅、味等）。2.將檢品研成粗粉或剪切成碎塊（如為新鮮品，應(yīng)先在60°C左右的溫度干燥）。3.預(yù)試液的制備：（1）乙醇提取液的制備稱取檢品（如槐花米）lg,壓碎于試管中加乙醇10ml,在70°C水浴上浸漬20分鐘，過(guò)濾，濾液供以下試驗(yàn)（其屮噴三氯化鋁、三氯化鐵各用一張經(jīng)圓形濾紙層析后的濾紙片）（2）預(yù)試實(shí)驗(yàn)：①鎂粉一鹽酸反應(yīng)量取檢品液2ml加入鎂粉少量及濃鹽酸4?5滴，放置（或于水浴中加熱），觀察紅色產(chǎn)生（即可認(rèn)為可能含有黃酮類化合物）②三氯化鋁反應(yīng)取檢品液1

7、滴加1%三氯化鋁溶液1?2滴，出現(xiàn)黃色，且熒光加強(qiáng)。（也可將醇提取液滴于濾紙上，噴以1%三氯化鋁溶液，再同以上進(jìn)行觀察比較）取檢品液1滴滴于濾紙上，在其旁滴一滴1%廠氯化鋁溶液，在兩液融合處出現(xiàn)黃色（可能含有3?OH、4-C=O或5-OH>4-C=O或鄰二酚OH）③三氯化鐵反應(yīng)將檢品液滴于濾紙屑上，噴上3%三氯化鐵乙醇溶液，出現(xiàn)綠、藍(lán)或棕色斑點(diǎn)。取濾液滴于濾紙上，在英旁滴一滴3%三氯化鐵，在兩液融合處棕色斑點(diǎn)（含有酚-OH）④Q—蔡酚反應(yīng)（Molish反應(yīng)）取乙醇提取液lml,加10%a—蔡酚醇液1?2滴，搖勻，沿管壁緩緩加入濃硫酸lml,不振搖，兩液界面間出現(xiàn)紫色環(huán)（此反

8、應(yīng)試糖、貳類化合物，反應(yīng)較靈敏,若有微量濾紙纖維或中草紗粉末存在于溶液中，也能產(chǎn)生上述反應(yīng)，故在過(guò)濾時(shí)應(yīng)注意）。（可能含有糖或貳）二、提取分離：堿提取、酸沉淀稱取槐花米粗粉15g,置于500ml燒杯中,加入沸水250ml及硼砂l(fā)g,在攪拌下加石灰乳調(diào)至pH=8?9保持微沸30分鐘，不斷補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水份，以保持pH=8?9,趁熱用尼龍布擰擠過(guò)濾（或抽濾）。殘?jiān)偌?倍量的水煎一次，趁熱用尼龍布擰擠過(guò)濾（或抽濾）。合并濾液，在60°C?70°C條件下，用濃鹽酸調(diào)至于pH=4?5,靜置1小時(shí)，析出粗制蘆丁，抽濾。棄去濾液