人細(xì)胞色素c基因在大腸桿菌中的克隆和表達(dá)及活性測(cè)定

《人細(xì)胞色素c基因在大腸桿菌中的克隆和表達(dá)及活性測(cè)定》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。

1、!""#$%%&’&()(中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào))%%+年,月*#$$’+,&%-.*/0123245671895:;057?81@A592<6987;0595B?$（CD）：D&EFD,$"""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""人細(xì)胞色素!基因在大腸桿菌中的克隆和表達(dá)及活性測(cè)定申峰$），劉明$），呂昌蓮$），王秀宏$），周宏博$），周虹)）!（$）哈爾濱醫(yī)科大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室，哈爾濱$E%%,(；)）軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院野戰(zhàn)輸血研究所，北京$%%,E%）摘要通

2、過S*M方法，從人胎兒心肌基因組O#Q中得到R72<基因（有$個(gè)內(nèi)含子），剔除內(nèi)含子后，得到細(xì)胞色素<基因的編碼序列L測(cè)序結(jié)果表明，該基因與X21;81Y中報(bào)道的人細(xì)胞色素<基因核苷酸順序完全一致L將其插入原核表達(dá)載體RIH+8的!"#!和$%&@"位點(diǎn)之間構(gòu)建RIH+8’<重組質(zhì)粒，并成功轉(zhuǎn)化入’()*+%;Z)（$OI+）中L經(jīng)!SHX誘導(dǎo)表達(dá)后，$E["O"’SQXI分析，可觀察到$條與細(xì)胞色素<蛋白分子量相符的電泳條帶L23>271印跡結(jié)果顯示，該條帶與小鼠抗人<單克隆抗體!BX)P發(fā)生特異反應(yīng)，證實(shí)為人細(xì)胞色素<的前體蛋白L體外使血紅素與該

3、前體蛋白結(jié)合生成完整的人細(xì)胞色素<蛋白，其耗氧量在不同濃度具有與反應(yīng)時(shí)間的線性關(guān)系，為研究人細(xì)胞色素<結(jié)構(gòu)和功能關(guān)系奠定了基礎(chǔ)L關(guān)鍵詞人細(xì)胞色素<，克隆與表達(dá)，23>271印跡，活性測(cè)定中圖分類號(hào).&,，.EEC"#$%&%’，()*+,--&$%$./012%"34$!5+$1,!6,%,&%!"#$%&2%784-9!4&:&439--23"VI#U21B$），Z!]A01B$），Z^*/81B’9081$），Q#X_06’/51B$），GV‘]V51B’P5$），GV‘]V51B)）!（$）,#-./01#&0*23%*)4#1%50/6.&"7*+#)8+.

4、/3%*+*96，$./:%&7#"%).+;&%<#/5%06，$./:%&$E%%,(，=4%&.；)）>&50%080#*2?/.&5285%*&7#"%)%&#，@)."#16*27%+%0./67#"%).+A)%#&)#5，3#%B%&9$%%,E%，=4%&.）9;-4+2!4;?>/2=2>/5@5:S*M8<5@01B32a621<25:/6=8158012@8:>27@292>01B8101>75101<96@2@01R72578<>2@:75=/6=8

5、1=?5<87@06=B215=2O#QLH/272369>5:32a621<01B3/5b2@>/8>>/03B212/8@>/238=232a621<283/6=8152@01X21;81YLH/2B212b8301327>2@01>52cR7233051N2<>57RIH+8P2>b221!"#!81@$%&@"30>23b0>/<5772<>5R21728@01B:78=2LRIH+8’7813:57=2@01>5’()*+%;Z)（$OI+）LQ:>2701@6<2@P?!SHX83R2<089R

6、75>201P81@8RR2872@1287>/2R530>0515:=592<6987b20B/>$$LDYOL23>271P95>>01B3/5b2@>/8>>/272<5=P0181>R75>201<569@728<>b0>/8=5632=515<95189!BX)P81>0P5@?78032@8B8013>:699921B>/5/8>>/272<5=P0181>R75>201b838R5558R55

7、81@/5955051b83=510>572@P?5R>0<893R2<>780518RR2872@P2>b2215c?B21<5136=R>05181@728<>051>0=28>@0::2721>R75>201<51<21>78>0515:5b099/29R63>5@03<5N27>/27298>051P2>b221>/23>76<>67281@>/2:61<>0515:/6=815