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《米曲霉直接轉(zhuǎn)化盾葉薯蕷生產(chǎn)薯蕷皂苷元》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、第9卷第5期過程工程學(xué)報Vol.9No.52009年10月TheChineseJournalofProcessEngineeringOct.2009米曲霉直接轉(zhuǎn)化盾葉薯蕷生產(chǎn)薯蕷皂苷元董悅生，齊珊珊，劉琳，修志龍(大連理工大學(xué)環(huán)境與生命學(xué)院生物科學(xué)與工程系，遼寧大連116024)摘要：利用米曲霉直接轉(zhuǎn)化盾葉薯蕷制備了薯蕷皂苷元，轉(zhuǎn)化中最重要的影響因素是pH、接種量和培養(yǎng)溫度.在pH6.0的66.7mmol/LNa2HPO4?KH2PO4緩沖液中，8%接種量、37℃培養(yǎng)84h后提溫至50℃繼續(xù)轉(zhuǎn)化8h的條件下，薯蕷皂苷元得率可達(dá)17.0
2、6mg/g，是粗酶液轉(zhuǎn)化的6.77倍.轉(zhuǎn)化過程中甾體的總摩爾數(shù)分別是微波輔助提取和酸水解的1.73和1.47倍.轉(zhuǎn)化產(chǎn)物經(jīng)質(zhì)譜和核磁共振鑒定與薯蕷皂苷元同質(zhì).直接微生物轉(zhuǎn)化法優(yōu)于酶解法.關(guān)鍵詞：米曲霉；盾葉薯蕷；生物轉(zhuǎn)化；甾體皂苷；薯蕷皂苷元中圖分類號：Q939.97文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1009?606X(2009)05?0993?061前言性和特異性，所以該方法主要應(yīng)用于單一底物的簡單體薯蕷皂苷元(Diosgenin)是合成甾體激素和甾體避系.盾葉薯蕷中甾體皂苷的糖鏈結(jié)構(gòu)不同，涉及到多種[1]糖苷鍵及不同的連接方式，其微生物轉(zhuǎn)化
3、生成薯蕷皂苷孕藥的一種重要原料，其本身也具有抗腫瘤等生理功[2,3]元的過程及機理很復(fù)雜.有研究[10,11]表明，利用微紫青能，它在植物中以甾體皂苷的形式存在.盾葉薯蕷(DioscoreazingiberensisC.H.Wright)為我國特有種，是霉和曲霉對黃山藥和盾葉薯蕷皂苷提取物進(jìn)行生物轉(zhuǎn)我國用于生產(chǎn)薯蕷皂苷元的主要藥用植物.薯蕷皂苷元化可得到薯蕷皂苷元，但收率低或有副產(chǎn)物產(chǎn)生.[12]的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法是直接酸水解法，該方法成本低、操作本實驗的前期工作確定了盾葉薯蕷藥材及其轉(zhuǎn)簡便，但收率不高，排出的廢水酸濃度高，污染較為嚴(yán)化產(chǎn)
4、物中甾體皂苷及苷元的結(jié)構(gòu)(圖1)，建立了定量分[4]析方法，篩選得到了能將盾葉薯蕷中多種皂苷成分轉(zhuǎn)化重.近年來研究人員進(jìn)行了一系列的技術(shù)改進(jìn)，如采用預(yù)發(fā)酵法、淀粉?纖維素分離法、酶解發(fā)酵法、階梯為薯蕷皂苷元的食品級微生物米曲霉(Aspergillus生物催化協(xié)同提取法、糖化?膜回收法、酶解與二氧化oryzae)CICC2436.本工作在此基礎(chǔ)上考察影響微生物[4?9]培養(yǎng)與酶生成的幾個重要方面，以提高轉(zhuǎn)化率，并與酶碳超臨界萃取偶聯(lián)法等，但由于無法擺脫酸水解或成本高，影響在生產(chǎn)中的應(yīng)用.液轉(zhuǎn)化進(jìn)行對比，鑒定轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的化學(xué)結(jié)構(gòu)，考察轉(zhuǎn)化微
5、生物轉(zhuǎn)化法是改造、修飾化合物結(jié)構(gòu)的一種重要過程中甾體成分總摩爾數(shù)的變化.方法，微生物轉(zhuǎn)化過程中產(chǎn)生的酶通常具有一定的專一Rha2431GlcGlcGlcZingiberensisnewsaponinORha242GlcGlcDeltoninO433GlcGlcGlcDiosgenin-triglucoside44GlcGlcDiosgenin-diglucosideROR:Sugerchain5GlcTrillin6HDiosgenin[12]圖1盾葉薯蕷及米曲霉轉(zhuǎn)化產(chǎn)物中甾體成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)[12]Fig.1Chemicalstruc
6、turesofsteroidalconstituentinD.zingiberensisanditstransformedproductionbyAspergillusoryzae收稿日期：2009?02?25，修回日期：2009?05?21基金項目：國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展規(guī)劃(973)基金資助項目(編號：2009CB724706)作者簡介：董悅生(1969?)，男，河北石家莊市人，博士，副教授，生物化工專業(yè)；修志龍，通訊聯(lián)系人，E-mail:zhlxiu@dlut.edu.cn.994過程工程學(xué)報第9卷基為30mL含1.0g盾葉薯蕷的
7、66.7mmol/LNa2HPO4?2實驗KH2PO4緩沖液(pH6.0)，每12h取3個平行樣，測定薯2.1材料和儀器蕷皂苷元得率隨時間的變化.2.1.1材料2.2.5提溫發(fā)酵實驗菌株米曲霉CICC2436購自中國工業(yè)微生物菌種在37℃下進(jìn)行轉(zhuǎn)化，種子液接種量為8%，發(fā)酵培保藏中心，盾葉薯蕷藥材購自陜西省寶雞市[粉碎成粒養(yǎng)基為30mL含1.0g盾葉薯蕷的66.7mmol/L徑≥50目(270μm)的粉末]，經(jīng)微波輔助提取得薯蕷皂苷Na2HPO4?KH2PO4緩沖液(pH6.0)，培養(yǎng)84h后將溫度元量為0.72mg/g，甾體總摩爾數(shù)
8、為67.98μmol/g.提高至50℃，提溫前每12h、提溫后每4h取3個平行2.1.2儀器樣，考察提溫對薯蕷皂苷元產(chǎn)量和轉(zhuǎn)化率的影響，并以VarianINOVA400型超導(dǎo)核磁共振儀(美國Narian一組84h后不提溫
