盾葉薯蕷中甾體皂苷及其體外血小板活性研究

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1、盾葉薯蕷中留體皂苷及其體外血小板活性研宄[摘要]利用大孔吸附樹(shù)脂柱色譜、硅膠柱色譜、ODS柱色譜及制備液相等方法,從盾葉薯蕷Dioscoreazingiberensis70%乙醇提取物中分離得到10個(gè)化合物,并通過(guò)核磁和質(zhì)譜等波譜學(xué)方法分別鑒定它們的結(jié)構(gòu)為胡蘆巴皂苷Xllla(1)、小花盾葉薯蕷皂苷(2)、胡蘆巴皂苷IVa(3)、三角薯蕷皂苷(4)、protobioside(5)、lilioglycosideK(6)、盾葉新苷(7)、三角葉皂苷(8)、薯蕷次苷A(9)、延齡草皂苷(10)。其中,化合物1,3,5,6均為首次從該植物中分離得到。化合物1?10的體外血小板活性篩選

2、表明,化合物7和8能夠誘導(dǎo)血小板聚集,而化合物9具有顯著抑制血小板聚集的作用。[關(guān)鍵詞]盾葉薯蕷;留體皂苷;分離鑒定;血小板聚集盾葉薯蕷DioscoreazingiberensisC.H.Wright,又稱黃姜,為薯蕷科薯蕷屬多年生草本攀援植物,廣泛分布在河南、四川、湖北和陜西南部。盾葉薯蕷為我國(guó)特有薯蕷屬植物,資源豐富,是生產(chǎn)激素類(lèi)藥物合成前體皂素(薯蕷皂苷元)的主要生產(chǎn)原料之一。盾葉薯蕷作為中藥,具有清肺止咳、利尿通淋、通經(jīng)止痛、解毒消腫等功效[1],也被用于中藥新藥的研究開(kāi)發(fā)。目前,上市藥物盾葉冠心寧片就是由盾葉薯蕷根莖提取物生產(chǎn)而成的中成藥,可用于治療高血脂、心絞痛和

3、冠心病等癥。留體皂苷是盾葉薯蕷中的主要化學(xué)成分,前人已經(jīng)從盾葉薯蕷中分離得到一系列的甾體皂苷類(lèi)成分[2-5]。早期的研究多集中在皂苷元,近年報(bào)道的成分包括螺留皂苷及呋留皂苷,但研宄的系統(tǒng)性不足,特別是對(duì)其中微量成分的分離鑒定研宄較少。本文以盾葉薯蕷為研究對(duì)象,利用多種分離手段從其70%乙醇提取物中共分離得到10個(gè)單體化合物,并鑒定它們的結(jié)構(gòu)分別為胡蘆巴皂苷Xllla(1,trigoneosideXllla)、小花盾葉薯賴皂昔(2,parvifloside)、胡蘆巴皂苷IVa(3,trigoneosideIVa)、三角薯蕷皂苷(4,deltoside)、protobioside

4、(5)>lilioglycosideK(6)、盾葉新苷(7,zingiberensisnewsaponinl)>三角葉皂苷(8,deltonin)、薯蕷次苷A(9,prosapogeninAofdioscin)、延齡草皂苷(10,thllin)。其中化合物1,3,5,6為首次從該植物中分離得到?;诙苋~冠心寧片的臨床應(yīng)用和已報(bào)道的盾葉薯蕷留體皂苷的心血管活性,對(duì)得到的各單體化合物進(jìn)行了體外血小板聚集活性的篩選,初步探討其構(gòu)效關(guān)系。1材料WatersSYNAPT質(zhì)譜儀(Waters,美國(guó));VarianUNITYINOVA600超導(dǎo)核磁共振譜儀(PaloAlto,美國(guó))和JNM

5、-ECA-400超導(dǎo)核磁共振譜儀(日本電子,日本);Waters2695型高效液相色譜儀,VenusilXBPC18色譜(4.6mmX250mm,5Um,艾杰爾,天津),PL-ELS2100型蒸發(fā)光檢測(cè)器(漂移管溫度70°C,霧化溫度50°C,氣流量1.6L?min-1,Polymer,英國(guó));Primelinesolventdeliverymodule(ASb美國(guó))制備型高效液相色譜儀,ShodexRID102型示差檢測(cè)器(ShowaDenko,日本),VenusilXBPC18色譜柱(10.0mmX250mm,5um,艾杰爾,天津)。SP825型大孔吸附樹(shù)脂(三菱,日本)

6、;ODS-A(120,50um;YMC,日本);柱色譜硅膠用硅膠H(青島海洋化工廠),薄層色譜硅膠板(青島海洋化工廠)。MonoBlocAB104-S型1/1萬(wàn)天平(Mettle-Toledo,美國(guó));RE-2000型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(亞榮,上海);SHZ-III型循環(huán)水真空泵(亞榮,上海)?’CHRISTALPHA1-2LD型冷凍干燥機(jī)(MarinChrist,德國(guó));560CA型血小板聚集儀(CHRONOLOG,美國(guó)),CentraMP4R型離心機(jī)(IEC,美國(guó)),15mL硅化離心管(金麥克,中國(guó));MEK-2-7226血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀(Chronolog,美國(guó))。分析純?cè)噭┘状肌?/p>

7、乙醇、乙腈、氯仿等有機(jī)溶劑(北京化學(xué)試劑廠);所用色譜純?cè)噭┘状迹ò不諘r(shí)聯(lián)特種溶劑股份有限公司)、乙腈(美國(guó)Fisher公司);肝素鈉(Merck,德國(guó));戊巴比妥鈉(Merck,德國(guó))。Wistar雄性大鼠200g(軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物中心)。盾葉薯蕷根莖采購(gòu)自陜西安康,由天津中醫(yī)藥大學(xué)張麗娟教授鑒定為盾葉薯蕷D.zingiberensis,標(biāo)本(HJ1004)保存于北京軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)研究所生物技術(shù)研究室中藥化學(xué)組。2提取與分離盾葉薯蕷藥材5.5kg,切片,70%乙醇回流提取(2次,每次l

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