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《豬偽狂犬重組抗原間接elisa診斷方法的建立》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)ChineseJournalofVeterinaryMedicine中國獸醫(yī)雜志2007年(第43卷)第5期3豬偽狂犬重組抗原間接ELISA診斷方法的建立樊淑華1，吳鳳筍2，李文剛2，項朝榮3，韓勇3，王永立3(1．周口師范學(xué)院，河南周口466001；2．鄭州牧業(yè)工程高等?？茖W(xué)校，河南鄭州450011；3．河南農(nóng)業(yè)大學(xué)，河南鄭州450002)摘要：本研究應(yīng)用重組抗原，成功建立了檢測豬偽狂犬病病毒血清抗體的間接ELISA診斷方法。通過方陣滴定確定了抗原最適包被量為1．45ug／孔，血清最適稀釋度為1：80，其作用時間
2、為60min，酶標(biāo)抗體最適作用時間為60min。其陽性臨界值為OD≥0．123。此外，該抗原不與豬其他疾病的陽性血清反應(yīng)，具有良好的特異性；批內(nèi)重復(fù)試驗，變異系數(shù)小于10％。該方法與進口診斷試劑盒的符合率為96．3％。本研究為現(xiàn)地免疫豬群抗體檢測和進行PRV流行病學(xué)調(diào)查提供了一種簡便的血清學(xué)診斷方法。關(guān)鍵詞：豬偽狂犬病病毒；鑒別；診斷；間接ELISA中圖分類號：$858．285．3文獻標(biāo)識碼：A文章編號：0529—6005(2007)05—0003—02DevelopmentofanindirectELISAassayfo
3、rdetectingPorcineinfectiousanemiavirusAntibodywithrecombinantantigenFANShu—hual，WUFeng—sun2，LIWen—gangZ，XIANGChao—ron93，HANYon93，WANGYong—li3(1．ZhoukouNormalUniversity，Zhoukou466001，China；2．ZhengzhouCollegeofAnimalHusbandEngineering，Zhengzhou450011，China；3．HenanAg
4、riculturalUniversity，Zhengzhou450002，China)Abstract：WeutilizedrecombinantantigenanddevelopedanindirectELISAassayfordetectingPRVantibodies．Theoptimalcoatingconcentrationofantigenwas1．45弘gofPRVproteinperwell．Thedilutionofserawas1：80．．Thereactiontimeofserawas60min．Th
5、ereactiontimeofconjugatewas60min．ThestandardofjudgmentwasthatOD≥0．123waspositive．Furthermore，therecombinantantigenhadnocrossreactionwithotherseraofswinediseases，anditshowedthisassaywashighlyspecific．Intheintro—batchduplicativitytest，thevariationcoefficientiS1essth
6、an1O％．Theresultshowedtheassayhadgoodreplicativity．WhencomparedwiththecommercialKit，96．3％agreementwasobtained．TheapplicationofindirectELISAassaywouldprovideasimpleandrapidmeansofdetectinganti—PRVinmonitoringPRVinfectionorassessingvaccinationinthefield．Keywords：PPRV
7、；differentiation；diagnosis；indirectELlSACorrespondingauthor：LIWen-gang偽狂犬病是由偽狂犬病病毒引起的多種動物和野生動物的一種以發(fā)熱、奇癢(除豬外)及腦脊髓炎為主要癥狀的疾病[1]。該病對豬危害最大，給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。在歐美等發(fā)達國家，主要采用基因缺失標(biāo)志疫苗(MarkerVaccine)配合相應(yīng)的血清學(xué)鑒別診斷方法來根除此病[2]，而在我國豬偽狂犬病的根除計劃尚未啟動。在大多數(shù)已啟動偽狂犬病根除計劃的國家中，主要采用針對gG，gE和收稿日期：
8、2006—07—19基金項目：河南省杰出人才創(chuàng)新基金資助項目(062100200)作者簡介：樊淑華(1980一)，女，助教，碩士生，主要從事病毒分子生物學(xué)研究通訊作者：李文剛，E—mail：wengang—li@126．eomgC這3種糖蛋白的鑒別診斷方法，其中又以gE缺失的疫苗和gE—ELISA鑒別診
