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1、第十一章RNA的生物合成RNABiosynthesis(Transcription)RNA生物合成的方式RNA復(fù)制轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄RNADNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的相同點(diǎn)1.都是酶促的核苷酸聚合過程。2.都是以DNA為模板。3.都是依賴DNA的聚合酶。4.聚合過程都是生成磷酸二酯鍵。5.都是從5’向3’方向延伸的多聚核苷酸鏈。6.都遵從堿基互補(bǔ)配對規(guī)律。復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的區(qū)別A-U,T-A,G-CA-T,G-CmRNA,tRNA,rRNA子代雙鏈DNA產(chǎn)物RNADNA酶NTPdNTP原料兩股鏈模板復(fù)制A-U,T-A,G-CA-T,G-C配對m
2、RNA,tRNA,rRNA子代雙鏈DNA產(chǎn)物RNA-polDNA-pol酶NTPdNTP原料其中一條鏈模板轉(zhuǎn)錄復(fù)制引物需要不需要合成方式半保留復(fù)制不對稱轉(zhuǎn)錄參與轉(zhuǎn)錄的物質(zhì):原料:NTP(ATP,UTP,GTP,CTP)模板:DNA酶:RNA聚合酶(RNApolymerase,RNA-pol)其他蛋白質(zhì)因子原核生物轉(zhuǎn)錄的模板和酶第一節(jié)一、轉(zhuǎn)錄模板(一)結(jié)構(gòu)基因5?3?3?5?結(jié)構(gòu)基因一、轉(zhuǎn)錄模板(一)結(jié)構(gòu)基因DNA分子上能轉(zhuǎn)錄出RNA的區(qū)段,稱為結(jié)構(gòu)基因。(二)不對稱轉(zhuǎn)錄5?3?3?5?模板鏈模板鏈結(jié)構(gòu)基因不對稱轉(zhuǎn)錄(二
3、)不對稱轉(zhuǎn)錄在DNA分子雙鏈上,一股鏈用作模板指引轉(zhuǎn)錄,另一股鏈不轉(zhuǎn)錄;模板鏈并非永遠(yuǎn)在同一條單鏈上。(三)模板鏈和編碼鏈5?3?3?5?模板鏈編碼鏈編碼鏈模板鏈結(jié)構(gòu)基因不對稱轉(zhuǎn)錄(三)模板鏈和編碼鏈DNA雙鏈中按堿基配對規(guī)律能指引轉(zhuǎn)錄生成RNA的一股單鏈,稱為模板鏈。相對的另一股單鏈?zhǔn)蔷幋a鏈。5′···GCAGTACATGTC···3′3′···cgtgatgtacag···5′5′···GCAGUACAUGUC···3′N······Ala·Val·His·Val······C編碼鏈模板鏈mRNA蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄翻譯二、
4、RNA聚合酶(一)RNA聚合酶能直接啟動RNA鏈的合成(NMP)n+NTP→(NMP)n+1+PPiRNA延長的RNA1、催化反應(yīng)2、不需要引物核心酶(參與延長)全酶(參與起始)???????????轉(zhuǎn)錄起始階段轉(zhuǎn)錄延長階段(二)組成(二)組成核心酶(參與延長)全酶(參與起始)???????????轉(zhuǎn)錄起始階段轉(zhuǎn)錄延長階段(二)組成三、模板與酶的辨認(rèn)、結(jié)合5?3?3?5?(一)操縱子原核的轉(zhuǎn)錄單位,稱為操縱子(operon)。操縱子若干個結(jié)構(gòu)基因調(diào)控序列啟動子5?3?3?5?結(jié)構(gòu)基因調(diào)控序列RNA-pol5?3?3?5
5、?結(jié)構(gòu)基因調(diào)控序列RNA-pol(二)啟動子1、概念轉(zhuǎn)錄開始進(jìn)行時,RNA聚合酶結(jié)合模板DNA的部位,稱為啟動子(promoter)。2、組成轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)TTGACA-35區(qū)(Pribnowbox)TATAAT-10區(qū)1-30-5010-10-40-205?3?3?5?原核生物啟動子保守序列RNA-pol辨認(rèn)位點(diǎn)(recognitionsite)5?5?RNA聚合酶保護(hù)區(qū)結(jié)構(gòu)基因3?3?2、組成轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn):+1-10區(qū):結(jié)合區(qū),Pribnow盒,TATAAT-35區(qū):識別區(qū),TTGACA(三)模板與酶的辨認(rèn)、結(jié)合過程原核
6、生物的轉(zhuǎn)錄過程第二節(jié)一、轉(zhuǎn)錄起始2.DNA雙鏈局部解開,形成開放轉(zhuǎn)錄復(fù)合體;1.RNA-pol全酶與模板結(jié)合,形成閉合轉(zhuǎn)錄復(fù)合體;3.在RNA-pol作用下發(fā)生第一次聚合反應(yīng),形成轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物:RNApol(?2????)-DNA-pppGpN-OH3?轉(zhuǎn)錄起始過程:二、轉(zhuǎn)錄延長1.?亞基脫落,RNA–pol聚合酶核心酶變構(gòu),沿著DNA模板前移;2.在核心酶作用下,NTP不斷聚合,RNA鏈不斷延長。(NMP)n+NTP??(NMP)n+1+PPi二、轉(zhuǎn)錄延長(1)轉(zhuǎn)錄空泡:RNA-pol(核心酶)····DNA···
7、·RNA轉(zhuǎn)錄延長:(2)轉(zhuǎn)錄方向5?3?DNA(3)羽毛狀現(xiàn)象核糖體RNARNA聚合酶在同一DNA模板上,有多個轉(zhuǎn)錄同時在進(jìn)行;轉(zhuǎn)錄尚未完成,翻譯已在進(jìn)行。這種形狀說明:E.coli的轉(zhuǎn)錄起始和延長三、轉(zhuǎn)錄終止(一)依賴ρ因子的轉(zhuǎn)錄終止Rho因子ATP酶的活性解螺旋酶的活性ATP1、RNA-pol在DNA模板上停頓下來2、轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RNA從轉(zhuǎn)錄復(fù)合物中脫落(二)非依賴Rho因子的轉(zhuǎn)錄終止5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`5`UUG
8、CAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`RNA5?TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATGGCTGGTGACTTTTTAGTCACCAGCCTTTTT...3?DNAUUUU...…UUUU...…5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGC