分子診斷學(xué)大題目

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1、問答題1、真核生物基因組的結(jié)構(gòu)與功能特點答：（1）基因組DNA與蛋片質(zhì)結(jié)合形成染色體，儲存于細(xì)胞核內(nèi)，除配了細(xì)胞外，體細(xì)胞內(nèi)基因組是雙份的（即雙倍體，diploid）,有兩份同源的基因組（2）基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子。一個結(jié)構(gòu)基因經(jīng)過轉(zhuǎn)錄生成一個mRNA分子，再翻譯生成一條多肽鏈（3）存在重復(fù)序列，重復(fù)次數(shù)可達(dá)百萬次以上（4）基因組中不編碼的區(qū)域多于編碼的區(qū)域（5）大部分基因含冇內(nèi)含子，因此，基因是不連續(xù)的（斷裂基因，splitgene）（6）基因組遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于原核生物的基因組，具有許多復(fù)制起始點，而每個復(fù)制子的長度較小2、真核生物

2、的重復(fù)序列的分類？根據(jù)DNA的復(fù)性動力學(xué)特性，可以分為4種類型：①單一序列（uniquesequence）：乂稱非重復(fù)序列，是在基因組中只有1個或少數(shù)兒個拷貝的序列②輕度垂復(fù)序列：在基因組中冇2?10個拷貝的序列（2?3個拷貝常被視為單一序列）,如人珠蛋口基因及酵母tRNA③中度重復(fù)序列：拷貝數(shù)在10至兒萬的序列，如rRNA基因、IRNA基因及其它非編碼序列，后者可能在基因表達(dá)調(diào)控中起重要作用④高度重復(fù)序列：拷貝數(shù)在104以上（106）3、原核生物基因組的一般特點？（1）基因組較小（106bp?107bp）（2）操縱子結(jié)構(gòu)是原

3、核牛物基因組的功能單位（3）結(jié)構(gòu)基因均為單拷貝基因（除18s、28s、5srRNA及tRNA基因外）（4）不編碼的DNA序列約占全基因組的10%以內(nèi)（比真核生物少得多）：基因組中幾乎沒有重復(fù)序列，基因間兒乎沒有間隔，基因內(nèi)沒有內(nèi)含子（古細(xì)菌除外）。不編碼部分通常包含調(diào)控基因表達(dá)的序列（5）DNA分了中冇各種功能區(qū)，如復(fù)制起始區(qū)OriC,復(fù)制終止區(qū)TerC,轉(zhuǎn)錄起始區(qū)和終止區(qū)等，這些區(qū)域往往有反向重復(fù)序列，能形成特殊的結(jié)構(gòu)4、質(zhì)粒的功能（細(xì)菌質(zhì)?？刂频男誀睿?？（1）抗性抗牛素抗性：氨基糖貳類、0-內(nèi)酰胺類、人環(huán)內(nèi)酯類及磺胺等重金

4、屬抗性：汞離子及有機汞制劑、銀、鉆、銀、珞、鉛、鈕及鈕等陽離了抗性：砂酸鹽、亞砂酸鹽、鉆酸鹽及硼酸鹽等其它抗性：紫外線，X射線，細(xì)菌索，質(zhì)?？刂频男揎椣到y(tǒng)等（2）代謝能力簡單糖類的代謝：乳糖、蔗糖及綿籽糖等鹵化物的代謝：2,4■二氯甲苯復(fù)雜碳化合物的代謝：甲苯、蔡、樟腦、苯胺、煙堿及烷坯等蛋口質(zhì)代謝：明膠及酪蛋口等具他代謝：色索生?成，產(chǎn)硫化氫，胞外DNA酶等(3)致病性毒素：炭疽桿菌外毒素、破傷風(fēng)桿菌神經(jīng)毒素及鼠疫菌素等侵襲力：菌毛、夾膜、黏附因子及血漿凝固酶等(4)質(zhì)粒的復(fù)制和穩(wěn)定性：質(zhì)粒的拷貝數(shù)，質(zhì)粒的寄主范用，質(zhì)粒的不

5、相容性等(5)結(jié)合轉(zhuǎn)移：性傘毛的合成，表面排斥，致育性抑制，對信息索的反應(yīng)和抑制等5、病毒基因組的結(jié)構(gòu)與功能特征(1)病毒基因組很小，且大小相差較大(2)病毒基因組可以由DNA組成，或由RNA組成(3)多數(shù)RNA病毒的基因纟R是由連續(xù)的RNA鏈組成(4)基因組的人部分可編碼蛋口質(zhì)，只有非常小的-部份不編碼蛋口質(zhì)(5)形成多順反子結(jié)構(gòu)(polycistronie)(6)病毒基因組都是單倍體(逆轉(zhuǎn)錄病毒除外)(7)噬菌體(細(xì)菌病毒)的基因是連續(xù)的，而真核細(xì)胞病毒的基因是不連續(xù)的6、三種限制性內(nèi)切酶的作用作用酶活性I核酸內(nèi)切酚甲基化

6、酶ATP酶DNA解旋酶DNA鏈上的特界識別位點DNA鏈上的特異切割位點在分了克隆中的重耍意義II核酸內(nèi)切酚有識別序列內(nèi)冇III核酸內(nèi)切酶甲基化酶有識別序列外無7、載體應(yīng)具備的特征:①能自我復(fù)制并具較高的拷貝數(shù)。分了量一般Vl()Kb。②帶有遺傳篩選標(biāo)記。③有適當(dāng)?shù)南拗坡形稽c，便于外源基因的插入和篩選8、載體的分類：(1)克隆載體a＞質(zhì)粒(plasmid)：是指細(xì)菌染色體以外的小分子環(huán)狀雙鏈DNA,能自我復(fù)制和表達(dá)其攜帶的遺傳信息。如PBR322質(zhì)粒載體b、噬菌體載體(bacteriophage,phage):指感染細(xì)菌的病毒

7、。溶菌性噬菌體、溶原性噬菌體c、粘性質(zhì)粒(cosmid)是由質(zhì)粒和九噬菌體的cos位點構(gòu)建而成d、酵母細(xì)胞屮克隆基因常用載體：酵母菌人工染色體c、動物細(xì)胞基因克隆的載體：猿猴空泡病毒40(simianvacuolatingvirus40,SV40)載體、腺病毒(adenovirus)載體和逆轉(zhuǎn)錄病毒(retrovirus)載體(1)表達(dá)載體是指能將外源基因在受體細(xì)胞中有效轉(zhuǎn)錄和正確翻譯的載體。a、原核細(xì)胞表達(dá)載體：主耍是大腸桿菌表達(dá)載體，表達(dá)元件：啟動子一核糖體結(jié)合位點—克降位點一轉(zhuǎn)錄終止信號。b、哺乳動物細(xì)胞表達(dá)載體：真核表

8、達(dá)載體的真核表達(dá)元件冇：啟動了/增強了一克隆位點一終止位點和加polyA信號（3）穿梭載體（shuttlevector）：人I】構(gòu)建的既帶有原核細(xì)胞的復(fù)制元件、又帶有真核細(xì)胞的復(fù)制元件，既能在原核細(xì)胞中復(fù)制、又能在真核細(xì)胞中復(fù)制，在原核和真核細(xì)胞分子克隆中均能應(yīng)用的載體。9、