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《香菇多糖的研究報(bào)告》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、香菇多糖的研究報(bào)告摘要利用果膠酶、纖維素酶和漆酶對(duì)香菇進(jìn)行酶解，固定料水比(1：15)和反應(yīng)溫度(40°C),以酶解后多糖提取率為指標(biāo)，考察不同濃度的3種酶對(duì)香菇多糖提収的影響。在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用響應(yīng)面法建立香菇多糖酶法提取的二次多項(xiàng)數(shù)學(xué)模型，并驗(yàn)證了該模型的有效性；探討了果膠酶、纖維素酶、漆醃3個(gè)因子的交互作用及其最佳水平。響應(yīng)面分析結(jié)果表明：果膠酶、纖維素酶、漆酶顯著影響香菇多糖的提取效果，在果膠酶濃度為7.11%,纖維素酶濃度為6.82%,漆酶濃度為3.69%的優(yōu)化條件下，香菇多糖的提収率達(dá)到37.07%。關(guān)鍵詞:香菇多糖
2、，果膠酶，纖維素酶，漆酶，響應(yīng)面2.前言糖類的研究已冇百余年的歷史，近20多年來，隨著膜的化學(xué)功能，免疫物質(zhì)的化學(xué)研究的進(jìn)展以及探尋新藥物資源的不斷拓展和研究的深入，發(fā)現(xiàn)糖類在生物體中的作用不僅是作為能量資源或結(jié)構(gòu)材料，更重要的是還參與了生命現(xiàn)象中細(xì)胞的各種活動(dòng)，具有多種多樣的生物學(xué)功能。多糖一般由十個(gè)分子以上的單糖通過糖甘鍵連接而成的高分子多聚物。多糖按來源大致可分為植物多糖、動(dòng)物多糖、海藻多糖、微生物多糖即細(xì)菌多糖和真菌多糖等。其屮，具有很強(qiáng)生物活性的真菌多糖的研究日益受到重視,真菌多糖從真菌子實(shí)體、菌絲體、發(fā)酵液中分離，是一類可以
3、控制細(xì)胞分裂分化、調(diào)節(jié)細(xì)胞生長和衰老的活性多糖。真菌多糖作為藥物研究始于20世紀(jì)50年代，在60年代以后成為免疫促進(jìn)劑受到廣泛關(guān)注，其中香菇多糖(lentinan,LNT)是研究得較透徹的多糖Z—。香菇［Lentinusedodes(Berk.)Sing］為擔(dān)子菌綱傘形科真菌'是世界名貴食用菌兼藥用菌之一。1968年日本千原吳郎首先利用熱水從香菇子實(shí)體屮浸提出6種胞外多糖,1970年Chihard和Sasaki用熱水浸提結(jié)合有機(jī)溶劑沉淀從香菇中提取到另外4種多糖,20世紀(jì)80年代以來,LNT的研究受到廣泛的重視，取得了一系列進(jìn)展［1］o
4、香菇(Lentinulaedodes),又名香蕈、冬菇，是世界上著名的食用真菌之一。據(jù)報(bào)道，香菇含有的香菇多糖、香菇多糖蛋白等多種生物活性物質(zhì)是理想的免疫促進(jìn)劑，且具有抑制癌癥和抗腫瘤效果。其中香菇多糖是一種宿主免疫增強(qiáng)劑和牛物反應(yīng)修飾劑，可抑制腫瘤的發(fā)牛、發(fā)展與轉(zhuǎn)移［1］,調(diào)節(jié)免疫功能，并能增強(qiáng)體液免疫和細(xì)胞免疫功能，具有抗逆轉(zhuǎn)錄病毒活性和降血脂、抗衰老等功能［2］目前，國內(nèi)外學(xué)者對(duì)香菇多糖的制備、提取方法等做了多方面的研究，主要的香菇多糖提取方法有熱水浸提法、酸浸提法、堿浸提法、微波法、復(fù)合酶(木瓜蛋白酶與纖維素酶)解法、深層發(fā)酵培
5、養(yǎng)法等［3—5］,傳統(tǒng)的浸提法時(shí)間長、提取率低、能耗人［6］。為克服傳統(tǒng)提取方法的缺點(diǎn)，許多學(xué)者研究了亞臨界水提取法［7］、超臨界C02萃取技術(shù)與熱水浸提法［8—9］、超濾膜技術(shù)提取法［10］、纖維素酶協(xié)同超聲波法［□］、響應(yīng)面法優(yōu)化熱水浸提法［12］等應(yīng)用于香菇多糖的提取，在一定程度上提高了提収率，有效保存了香菇多糖的牛物活性。木研究采用果膠酶、纖維素酶、漆酶提取香菇多糖，并對(duì)影響香菇多糖提取率的3種酶濃度進(jìn)行響應(yīng)面分析，優(yōu)化了復(fù)合酶的最佳配比。1?材料與方法1丄材料與設(shè)備1.1.1試驗(yàn)材料香菇（購買于當(dāng)?shù)厥袌?chǎng)）；果膠酶[13]300
6、0U/g.纖維素酶[14]30000U/g、漆酶[15]5000U/kg購于合肥博美生物科技有限公司；乙醇、恵酮、98%濃硫酸均為中國藥品生物制品檢定所產(chǎn)品。1.1.2主要儀器粉碎機(jī)，上海精密科學(xué)儀器有限公司;80—2型高速冷凍臺(tái)式離心機(jī)，江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司；723型可見光分光光度計(jì)，上海菁華科技儀器有限公司；HH—2孔數(shù)顯水浴鍋、HH—4孔數(shù)顯水浴鍋，江蘇金壇市環(huán)宇科學(xué)儀器廠；移液槍，阿敏生物技術(shù)有限公司；電子天平，OhausCorp.PineBrook,NJ,USA。1.2試驗(yàn)方法1.2.1香菇多糖的提取和測(cè)定及單因素
7、試驗(yàn)原料處理：香菇一烘干（50°C）-粉碎一過篩（40目）一多糖提取原材料。試驗(yàn)流程：稱取lg原料溶于15mL水，室溫浸潤30min,加入不同濃度的各種酶，40°C水浴2h。經(jīng)抽濾去除殘?jiān)?，得抽提液。多次抽提所得的抽提液?000r/min離心10min,將所得上清液合并，減壓濃縮到總上清液體積的2/5?1/2,加95%乙醇到乙醇含量為30%,4°C靜置24h;離心,弄去沉淀，取上清液再加95%乙醇到乙醇含量達(dá)到75%,4°C靜置24h;離心,沉淀用75%乙醇水溶液分散，再離心，棄去上清液，以此法清洗沉淀，去除沉淀中夾帶的少量單糖和低聚
8、糖。沉淀洗2次。再次離心后的沉淀用蒸憾水溶解并定容到25mL,然后用蔥酮硫酸法比色法測(cè)多糖含量。計(jì)算多糖提取率，提取率/%=(多糖質(zhì)量/原料質(zhì)量)X100按上述流程，分別用果膠酶、纖維素酶、漆酶進(jìn)行單因素試
