[精品][經(jīng)典]人白介素24基因重組腺病毒載體的構(gòu)建與鑒定

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1、［經(jīng)典］人白介素24基因重組腺病毒載體的構(gòu)建與鑒定人白介素24基因重組腺病毒載體的構(gòu)建與鑒定【摘?！磕康臉?gòu)建含有人白介素24(hIL-24)基因的重組腺病毒載體，為下一步病理性瘢痕的基因治療研究奠立實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法采用基因工程技術(shù)將hIL-24基因的cDNA亞克隆至穿梭質(zhì)粒pAdTrack-CMV上,鑒定正確后在PAdEasy系統(tǒng)中進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)同源重組,通過脂質(zhì)體將正確重組體包裹并轉(zhuǎn)染293A細(xì)胞以包裝并擴(kuò)增病毒。采用酶切及PCR方法對(duì)重組腺病毒進(jìn)行鑒定。結(jié)果酶切和PCR結(jié)果證實(shí)hIL-24基因重組腺病毒載體構(gòu)建成功并可在293A細(xì)胞中表達(dá)

2、，病毒滴度達(dá)107pfu/mlo結(jié)論成功構(gòu)建了有較強(qiáng)感染能力的含hIL-24基因的重組腺病毒載體?！娟P(guān)鍵詞】hIL-24；腺病毒；病理性瘢痕TheconstructionandIdentificationofRecombinantAdenovirusVectorofhIL-24LIANGJie,HEHai~tianPENGZhi,etal.DepartmentofPlasticSurgery,AffiliatedHospitalofGuangdongMedicalCollege,Zhanjiang524001,GuangdongProv

3、inceChina[Abstract]ObjectiveToconstructandidentifytherecombinantadenovirusvectorofhumanIL-24geneforfuturegenetherapyofpathologicalscartissue?MethodsThehuma.nIL~24genefragmentwasclonedintotheshuttleplasmidpAdTrack-CMVtoformthetransfervectorbythemethodofhomogenousrecombina

4、tioninbacteriaofPAdEasysystem?Thentherightrecombinantadenoviruswastransfectedinto293AcellsusingLipofectine2000.Therecombinantadenovirusvectorwasidentifiedbyrestrictionenzymedigestionandpolymerasechainreaction(PCR)?ResultsRestriction［經(jīng)典］人白介素24基因重組腺病毒載體的構(gòu)建與鑒定人白介素24基因重組腺病毒載

5、體的構(gòu)建與鑒定【摘?！磕康臉?gòu)建含有人白介素24(hIL-24)基因的重組腺病毒載體，為下一步病理性瘢痕的基因治療研究奠立實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法采用基因工程技術(shù)將hIL-24基因的cDNA亞克隆至穿梭質(zhì)粒pAdTrack-CMV上,鑒定正確后在PAdEasy系統(tǒng)中進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)同源重組,通過脂質(zhì)體將正確重組體包裹并轉(zhuǎn)染293A細(xì)胞以包裝并擴(kuò)增病毒。采用酶切及PCR方法對(duì)重組腺病毒進(jìn)行鑒定。結(jié)果酶切和PCR結(jié)果證實(shí)hIL-24基因重組腺病毒載體構(gòu)建成功并可在293A細(xì)胞中表達(dá)，病毒滴度達(dá)107pfu/mlo結(jié)論成功構(gòu)建了有較強(qiáng)感染能力的含hIL-24基

6、因的重組腺病毒載體?！娟P(guān)鍵詞】hIL-24；腺病毒；病理性瘢痕TheconstructionandIdentificationofRecombinantAdenovirusVectorofhIL-24LIANGJie,HEHai~tianPENGZhi,etal.DepartmentofPlasticSurgery,AffiliatedHospitalofGuangdongMedicalCollege,Zhanjiang524001,GuangdongProvinceChina[Abstract]ObjectiveToconstruct

7、andidentifytherecombinantadenovirusvectorofhumanIL-24geneforfuturegenetherapyofpathologicalscartissue?MethodsThehuma.nIL~24genefragmentwasclonedintotheshuttleplasmidpAdTrack-CMVtoformthetransfervectorbythemethodofhomogenousrecombinationinbacteriaofPAdEasysystem?Thentheri

8、ghtrecombinantadenoviruswastransfectedinto293AcellsusingLipofectine2000.Therecombinantadenovirusvectorw