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《豇豆根腐病病原分離鑒定及其核糖體rDNAITS序列分析》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在工程資料-天天文庫。
1、直豆根腐病病原分離鑒定及其核糖體rDNA-ITS序列分析摘要：采用形態(tài)學及分子生物學的方法對采集自武漢的EL豆根腐病分離物進行形態(tài)學和分子生物學鑒定O結果表明,菌株jgf形態(tài)學上為茄腐皮鐮砲菌；對jgf菌株的核糖體rna基因內轉錄間隔區(qū)(rdna—its)進行了pcr擴增和序列測定，并在genbank中進行了blast搜索和比對分析，根據rdna—its序列分析結果結合RL豆病株癥狀和病菌的形態(tài)學特征，認為武漢地區(qū)豆［豆根腐病的病原菌為茄腐皮鐮砲菌(fusariumso1anisch1.)關鍵詞：
2、肛豆根腐??；形態(tài)學；分子鑒定；rdna-its分析；fusariumso1anisch1?pathogenyisolationandidentificationofcowpearootrotdiseaseandsequencingofribosomalrdna-itswuren—fengl,yangshao—1i1,wanpeng2,huangwei2(1.wuhaninstituteofvegetab1esciences,wuhan430065,china2.instituteofplantpr
3、otectionandsoilscience,hubeiacademyofagriculturalsciences,wuhan430064,china)abstract：thefungalisolatejgffromcowpearootrotdisease,whichwerecol1ectedfromwuhan,werestudiedmorphologicallyandmo1ecu1ar1y.theresultsshowedthattheisolatejgfweremorpho1ogica1fus
4、ariumsolanisch1.therdna—itsgenesofiso1atejgfwereamplifiedandsequenced.basedontheblastsearchandthealignmentana1ysisingenbankdatabasecombinedwithmorphologicalcharacters,thepathogenofcowpearootrotdiseasewasidentifiedasfusariumsolanisch1.keywords：cowpearo
5、otrotdisease；morphology；molecularidentification；rdna—itssequenceana1ysis；fusariumsolanisch1麻豆是我國主要蔬菜作物之一，其多季節(jié)、多模式、多花色和短周期栽培成為農民增收的主導性蔬菜。湖北常年種植面積4萬hm2,武漢市麻豆種植面積約0.67萬hm2,作為“旌豆之鄉(xiāng)”的武漢市新洲區(qū)雙柳街，年種植約0?4萬hm2次。但是生產中,常因栽培管理不當或環(huán)境條件的影響，造成病害的流行，特別是土傳病害。直豆根腐?。╟owpe
6、aroot）［1］是濟豆的一種典型的土傳病害，隨盒豆種植年數的增加、面積的擴人、品種的變化等，已成為臥豆上發(fā)病最重、危害最大、防治最困難的病害。本研究從武漢地區(qū)尬豆種植區(qū)采集并分離發(fā)病班豆根腐病病菌，并進行鑒定，為后續(xù)的研究提供基礎材料和條件。1材料與方法1?1標本來源與病原菌的分離純化標樣于2009年采自武漢市蔬菜科學研究所試驗基地。病原真菌的分離方法參照方中達［2］的植病研究方法有關介紹，選取新發(fā)病豆［豆植株莖基部的根頸作為分離材料，進行常規(guī)組織分離，經單抱純化、培養(yǎng)獲得單抱菌株。1?2致病性
7、測定采用k0chpS法將發(fā)病組織上分離到的病原菌純培養(yǎng)物（鞄子）制成懸浮液（105?106個抱子/m1）o采用自然傷根浸砲子液接種植株。取生長良好的無病班豆苗，用無菌水將根頸部表面沖洗干凈，然后使根完全浸在抱子懸浮液屮30min,接種后植株定植于裝有滅菌沙土的花盆中。每個菌株接種8株苗，3次重復，以無菌水為對照。植株置于25°C下光照培養(yǎng)箱中，接種后每隔1?2d觀察1次。發(fā)病后，從病斑處再次分離病原菌，確認致病菌。1?3病原菌形態(tài)學鑒定1?3.1pda上的病菌形態(tài)特征觀察將供試菌株接種到Pda培養(yǎng)
8、基上，25°C恒溫培養(yǎng)。7d后觀察培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)，制作玻片，光學顯微鏡下觀察分生抱子及分生砲子梗的形態(tài)特征，并測量分生抱了的大小。1?3?2產抱表型觀察產抱表型的觀察采用濾紙片法。參照張?zhí)煊睿?］的方法，取濾紙剪成比載玻片稍小的長方形，將中心挖一邊長約10mm的方孔，滅菌后用無菌水潤濕放于無菌載玻片上。挑取少量活化的菌絲塊均勻涂于濾紙中央方孔的邊緣，然后將載玻片置于鋪有濕潤濾紙的滅菌培養(yǎng)皿中，25°C恒溫培養(yǎng)。48h后顯微鏡下觀察產抱表型。1?3?3形態(tài)學鑒定依據根據菌落形態(tài)、
