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《山羊抗小鵝瘟高免血清的制備及臨床試驗》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在工程資料-天天文庫。
1、山羊抗小鵝瘟高免血清的制備及臨床應用試驗王文強I,王開功2,出新平'(1.銅仁職業(yè)技術學院，貴州銅仁554300；2.貴州大學動物科學學院，貴陽花溪3.550025；銅仁市畜牧獸醫(yī)局,貴州銅仁554300)摘要小鵝瘟是雛鵝感染鵝細小病毒(Gooseplaguevirus,GPV),所引起的一種急性敗血型傳染病。木病病程短而且死亡率高，主要侵害1月齡以內的雛鵝和雛番鴨。10日齡以下的雛鵝發(fā)病后，其死亡率可能高達100%。目前，許多養(yǎng)鵝場大多使用市場上銷售的抗小鵝瘟血清對鵝進行免疫和治療，但是市場上銷售的抗小鵝瘟血清其產量低、成本高，且
2、容易導致某些鵝源疫病的傳播。本文采用從貴州麻江縣等地的養(yǎng)鵝場采集的病鵝分離岀的小鵝瘟野生強毒株接種于9口齡的鵝胚尿囊液制備了小鵝瘟病毒抗原，并用小鵝瘟病毒抗原加弗氏佐劑后,分多次皮下注射結合靜脈注射小鵝瘟病毒抗原免疫貴州黑、白山羊。頸動脈一次性放血制備抗小鵝瘟異源高免血清，用瓊脂擴散進行效價的測定，結果顯示其抗休效價平均都在1：8以±o將制備的血?清與市售的抗小鵝瘟進行了對比試驗，結果市售的抗小鵝瘟血清的保護率為85%,山羊抗小鵝瘟高免血清的保護率為95%OIII羊抗小鵝瘟異源高免血清具有效價高、成木低、安全性好等優(yōu)點。關鍵詞：小鵝
3、瘟；山羊抗小鵝瘟高免血清；抗小鵝瘟血清；對比試驗小鵝瘟又稱為Derzsy,s病、鵝流感、鵝肝炎、鵝傳染性心肌炎、鵝腸炎、鵝腹水性肝腎炎，它是由小鵝瘟病毒(Gooseplaguevirus),即鵝細小病毒(Gooseparvovirus,GPV)引起小鵝和雛番鴨的一種急性或亞急性、敗血性、高度接觸性、傳染性強、病程短口死亡率高的傳染病"根據《貴州畜疫病志》和貴州大學王開功教授⑼報道，2001年3月，貴州省惠水、三都、修文等縣的養(yǎng)鵝場雛鵝發(fā)生了一種疫病，病鵝的臨床癥狀和病理變化與國內的殷震和國外的GoughR.E等人⑹"報道的小鵝瘟很相
4、似。貴州大學動物科學學院疫病實驗室對從患病的鵝群屮采集的病鵝心、肝和脾等組織觸片染色鏡檢未見細菌，同時接種血瓊脂平板作需氧和厭氧培養(yǎng)，結果為陰性。隨后將病料進行處理接種T15H齡鵝胚尿囊腔，分離到一株小鵝瘟野生強毒，同時證明了貴州省已經有木病的存在。隨著貴州省養(yǎng)鵝業(yè)的迅猛發(fā)展，小鵝瘟的發(fā)生和流行，對貴州省的養(yǎng)鵝業(yè)造成了巨大的威脅。大多數養(yǎng)殖場鵝病的發(fā)生集屮在每年的3?4月份；3周齡的小鵝易發(fā)病；發(fā)病率為80%,死亡率高達90%?100%。雖然一些主要的養(yǎng)鵝場對一H齡的小鵝用抗小鵝瘟血清進行了免疫，但是隨著鵝體內抗體的消長和許多養(yǎng)殖場
5、種鵝的免疫程序還不完善，小鵝瘟還是存在著威脅。應用高免鵝制備的血清可以對小鵝瘟進行很好的預防和治療，但是曲于利用成年鵝制備高免血清產量低而且成木很高，難以滿足生產上的需要。所以我們從生產實際出發(fā)，參考了國內外的一些經驗和技術，用從養(yǎng)殖場的病鵝分離出的小鵝瘟毒株，將病毒接種鵝胚進行病原的增殖，收集到的尿囊液，制作了小鵝瘟病毒抗原，采用多次免疫和頸動脈一次性采血的方法制造出了適合我省預防和治療小鵝瘟的山羊抗小鵝瘟異源高免血清，并與中牧實業(yè)股份有限公司成都藥械廠生產的抗小鵝瘟血清進行了對比試驗。對防治鵝細小病毒感染的發(fā)生和流行，保障貴州省
6、養(yǎng)鵝業(yè)的健康發(fā)展具有重要的意義°1材料與方法1.1材料1.1.1毒株用從貴州省惠水、三都等縣的養(yǎng)殖場的病鵝采的心、肝、脾等病料分離出了小鵝瘟野生強毒株，由本實驗室凍干保存。1.1.2胚胎9口齡的鵝胚由實驗室購口烏當養(yǎng)殖場未經免疫的鵝蛋在木實驗室口行孵化。1.1.3樣本小鵝瘟標準抗原和陽性血清由揚州大學動物醫(yī)學系王永坤教授惠贈；免疫鵝血清系采用小鵝瘟弱毒疫苗人工免疫成年鵝制備；其它常見禽病血清如新城疫病W(XDV)、馬立克病w(MDV)、減蛋綜合癥病毒(EDSV)和傳染性法氏囊病毒(IBDV)均由木實驗室提供；禽流感病毒(AIV)血清
7、購自哈爾濱獸醫(yī)研究所。1.1.4試驗用山羊購于清鎮(zhèn)養(yǎng)羊場，一頭貴州黑山羊和一頭貴州白山羊，體重30kg以上，臨床檢杳健康。1.1.5試驗用雛鵝由銅仁市川主科技助農有限公司提供。1.1.6抗小鵝瘟血清屮牧實業(yè)股份冇限公司成都藥械廠生產，生產批號為獸藥生產(2007)220058090c1.2方法1.2.1小鵝瘟抗原的制備取病毒感染鵝胚的尿囊液，經4000rpm離心lOmin,去除細胞碎片，收集上清液。于上清液屮加入等量氯仿，強烈振搖，經4000rpm離心lOmin,舍去冇機相和中間界面的朵質，收集上層水相。反復抽提3?4次，直至兩相界
8、面清晰。在水相中緩慢加入質量濃度400g/L的聚乙二醇(MW6000),使其終質量濃度達60g/L,調節(jié)氯化鈉的質量濃度達22g/L,4°C靜置過枚，第二天后經過lOOOOrpm離心30min,舍去上清液，收集病毒沉淀物。取0.Olm
