資源描述：
《醫(yī)學(xué)論文-骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療脊髓損傷》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、醫(yī)學(xué)論文-骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療脊髓損傷??????????????????????????作者：顏濱余錚李振宇閆洪印【摘要】?目的：探討大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）對(duì)脊髓損傷與修復(fù)的作用與機(jī)制及細(xì)胞移植的方法與途徑。方法：實(shí)驗(yàn)組為將體外培養(yǎng)SD大鼠的MSCs經(jīng)綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)染標(biāo)記后顯微注射于脊髓橫斷模型的脊髓損傷處，并以無血清培養(yǎng)基注射動(dòng)物為對(duì)照組。12周后觀察移植細(xì)胞的分化情況，并通過行為學(xué)、組織學(xué)及免疫組化的方法評(píng)價(jià)脊髓功能變化。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組MSCs移植12周后，脊髓功能明顯恢復(fù)。結(jié)論：骨髓間充質(zhì)干
2、細(xì)胞移植對(duì)脊髓的損傷修復(fù)具有明顯作用。【關(guān)鍵詞】?骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；移植；脊髓損傷；細(xì)胞培養(yǎng)???〔Abstract〕???Objective????To?investigate?the?methods?that?how?the?MSCs?wok?on?the?spinal?cord?injury.??And?try?to?find?the?ways?to?plant?MSCs.???Methods????The?MSCs?were?transplanted?into?the?spinal?cord?of?SCI???m
3、odles.?Before?the?transplanting,?the?MSCs?were?transfected?with?EGFP.12?weeks?after?transplantation,?MSCs'?difference?were?observed,?SPECT,?immunohistochemistry?and?angiogenesis?were?observed?to?detect?the?effects?on?spinal?cord.????Results????This?experiment?obt
4、ained?the?high?pure?MSCs.?The?MSCs?can?stabilize?to?spread?the?generation?to?combine?the?cord.????Conclusion????The?transplantation?using?the?cells?proved?that?MSCs?wasvery?useful?inthe?recovery?of?spinal?cord?injury?Which?may?allow?us?to?rebuild?those?conditions
5、?to?repair?and?regrow?the?spinal?cord.???〔Key?Words〕???Mesenchymal?stemcells;?Transplante;?Spinal?cord?injury;?Culture?of?cell???脊髓損傷的修復(fù)是近年熱點(diǎn)課題。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymalstemcells,MSCs）由于具有較強(qiáng)的增殖能力和多向分化潛能，可用來作為細(xì)胞移植的供體細(xì)胞來源[1]。本實(shí)驗(yàn)通過將MSCs移植于損傷的脊髓，研究其在缺血微環(huán)境下的分化增殖潛能以及其對(duì)于脊髓損傷
6、的作用。???1???材料和方法???1???試劑與儀器???IMDM（Iscove'somdifiedDulbecco'smedium），Gibco公司；胎牛血清（FBS）Hyclone公司；分離液，胰蛋白酶和EDTA；可吸收性明膠海綿，南京第三制藥廠；戊巴比妥鈉，佛山市化工實(shí)驗(yàn)廠；0.2%乳酸環(huán)丙沙星，北京雙鶴制藥廠；乳酸鈉林格氏液，北京雙鶴制藥廠；FLUOROGOLD，F(xiàn)LOROCHROME公司；FLUOROGOLD，F(xiàn)LROCHROME公司；PHA-L單抗，兔源性；牛血清白蛋白，SIGMA公司；生物素化羊抗兔Ig
7、G，SIGMA公司；EXTRAVIDINPEROXIDASE，SIGMA公司；DAB，SIGMA公司；TRITONX-100，SIGMA公司；葡萄糖氧化酶，SIGMA公司。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，3~4周齡的SD大鼠，雌雄不限，由中山大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。???1.2???方法???1.2.1???大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及標(biāo)記???將SD大鼠頸椎脫臼處死后，75%酒精浸泡5min，無菌條件下取下肢長(zhǎng)骨，顯露骨髓腔，用含15%胎牛血清的IMDM培養(yǎng)液沖洗骨髓腔獲取骨髓細(xì)胞，將沖洗液收集于離心管中，2000r/min離心15min
8、，棄上清及脂肪層，取沉淀，用IMDM培養(yǎng)液混勻，輕輕地層加到比重為1077g/mL的淋巴細(xì)胞分離液上，2000r/min離心10min，收集中間的單核細(xì)胞層。用IMDM培養(yǎng)液1000r/min離心洗滌10min，然后收集細(xì)胞，用含15%胎牛血清的IMDM培養(yǎng)液混勻后接種于培養(yǎng)瓶中，置于37℃含5%的CO2孵箱中培養(yǎng)，
