樺剝管孔菌生物學(xué)特性及其發(fā)酵提取物抑菌、抗腫瘤活性的研究.pdf

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1、萬方數(shù)據(jù)StudyonbiologicalcharacteristicsofPiptoporusbetulinusandonantibacterialandanti-tumoractivityofi!tsfermentationextractThesiSsubmittedtoQngdaoAgricultumlUniversityInFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeofMasterofScienceWangLihua(DepartmentofLifeScience)Supervisor:Prof.

2、SongAirongQingdao.ChinaJune,2012萬方數(shù)據(jù)獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得青島農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名:誦軍J時間:≥糾2r年6月關(guān)于論文使用授權(quán)的說明彳日本人完全了解青島農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和

3、磁盤,允許論文被查閱和借閱,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意青島農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。(保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議)研究生簽名:;百目2舍鈰虢糨絮時間:捌2年莎月四日時間:_)矽僅年多月夕節(jié)目萬方數(shù)據(jù)青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要本文對一株野生分離的多孔茵菌絲體進(jìn)行DNA提取、檢測、PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物純化、測序,比對結(jié)果顯示該野生菌株為樺剝管孔菌Piptoporusbetulinus。利用平板培養(yǎng)對樺剝管孔菌菌株進(jìn)行了菌絲體固體培養(yǎng)的營養(yǎng)條件和部分環(huán)境條件研究

4、。經(jīng)過單因素及正交試驗(yàn)確定菌絲生長的最佳固體培養(yǎng)基配方為:馬鈴薯淀粉3%,麩皮o.7%,磷酸二氫鉀0.1%,硫酸鎂O.05%、蒸餾水1000ml、瓊脂2%。環(huán)境條件篩選結(jié)果為:溫度為28+C,黃光為最佳光質(zhì),茵絲體在850Lx時生長較好,自然pH最佳。利用搖瓶培養(yǎng),以發(fā)酵液多糖為指標(biāo)對樺剝管孔菌菌株液體培養(yǎng)的營養(yǎng)條件進(jìn)行了研究。通過單因素和正交試驗(yàn)其最佳液體培養(yǎng)配方為:玉米淀粉4%、NaNO、o.5%、K_H2P04o.05%、MgS040.01%、蒸餾水1000ml。并通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn),確定了其發(fā)酵最佳環(huán)境條件為:接種量2.5%,

5、培養(yǎng)基裝量200ml,最佳起始pH值為自然pH(pH5。62)。將營養(yǎng)條件,環(huán)境條件正交和小發(fā)酵罐發(fā)酵得到的醇沉物、醇溶物進(jìn)行金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、沙門氏茵的抑菌試驗(yàn),結(jié)果顯示:樺剝管孔菌液體發(fā)酵得到的醇沉物、醇溶物對以上4種細(xì)菌均無抑菌作用。將營養(yǎng)條件,環(huán)境條件正交和小發(fā)酵罐發(fā)酵得到的醇沉物、醇溶物進(jìn)行體外抗腫瘤試驗(yàn),結(jié)果顯示:對于結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞株,有一定的抑制作用,但是效果不明顯。對于乳腺癌mb一231細(xì)胞株,這些醇沉物、醇溶物單獨(dú)作用時幾乎無抑制作用,只有與藥物組聯(lián)合才有一定的作用。關(guān)鍵詞:分子鑒定;固體培養(yǎng);

6、液體培養(yǎng);抑菌作用;體外抗腫瘤萬方數(shù)據(jù)青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士畢業(yè)論文AbstractThewriterhasdoneDNAextraction,detection,PCRamplificationtoawildseparatedPolyporemycelium.AndthenafterpurificationandsequenceofthePCRproducts,itshowsthatthewildstrainsisThenutritionalconditionsofsolidcultureofmyceliumandsomeenvironment

7、alconditionsthroughPlatecultureofthestrmnsofPiptoporusbetulinushavebeenstudied.Andwehavegotthebestsolidmediumformulaofmycelialgrowth笛follows:potatostarch3%,wheatbranO.7%,KH2P04O.1%,MgS040.05%,distilledwater1000ml,2%agaraftersinglefactorandorthogonalexperiments.Theresultsof

8、environmentalconditionsscreeningisthatthetemperaturewas280C,theyellowcoloristhebestLightq

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