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《廣西巴馬小型豬GHRH成熟肽真核表達(dá)質(zhì)粒對小鼠生長效應(yīng)的影響.pdf》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)JoumalofSouthemA鰣culture2014,45(12):2264—2269ISSN2095—1191:CODENNNXAABhttp:,/、Ⅲw.Ilfny)£b.cnDOI:10.3969/j:issn.2095一1191.2014.12.2264廣西巴馬小型豬GHRH成熟肽真核表達(dá)質(zhì)粒對小鼠生長效應(yīng)的影響李芳芳·,郭亞芬”,蘭干球2,潘堂峰3(1廣西畜禽品種改良站,南寧53000l;2廣西大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,南寧530005;3南寧高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開發(fā)區(qū)動物衛(wèi)生監(jiān)督所,南寧530005)摘要:【目的】探討廣西巴馬小型豬促生長激素釋放激素(G咖)成熟
2、肽真核表達(dá)質(zhì)粒對小鼠生長效應(yīng)的影響,為進(jìn)一步研究廣西巴馬小型豬GⅢm成熟肽的促生長作用及a積H基因疫苗的高效制備與安全使用提供參考依據(jù)?!痉椒ā坷没蛑亟M技術(shù)將廣西巴馬小型豬a珊堿熟肽序列與pEGFP.N1質(zhì)粒連接構(gòu)建重組真核表達(dá)質(zhì)粒,然后按O.5斗晚的劑量肌肉注射經(jīng)25%蔗糖溶液預(yù)處理的小鼠,觀察記錄小鼠體重變化情況,并分別提取重組質(zhì)粒注射組小鼠的心臟、肝臟、腎臟及注射部位肌肉DNA,再以PcR檢測是否存在基因質(zhì)粒殘留。【結(jié)果】以構(gòu)建的pEGFP.GHRH重組質(zhì)粒注射小鼠后,其外源回堿熟肽DNA可在肌肉中獲得表達(dá),但并未整合入小鼠基因組中。雖然重組質(zhì)粒注射組小鼠的末重與空質(zhì)
3、粒注射組小鼠的差異不顯著(P>o.05),但在注射后的Io~25d,重組質(zhì)粒注射組小鼠體重均顯著高于空質(zhì)粒注射組(P<0,05)。在相對日增重率方面,注射后的前15d內(nèi),重組質(zhì)粒注射組小鼠的相對日增重率均高于空質(zhì)粒i辛射組。【結(jié)論】構(gòu)建的廣西巴馬小型豬pEGFP.GJ積遁組質(zhì)粒能在一定時(shí)間內(nèi)促進(jìn)小鼠生長,即GHRH種屬差異性小,在動物中有較高的保守性。關(guān)鍵詞:廣西巴馬小型豬;促生長激素釋放激素(GHRH)成熟肽序列;小鼠;真核表達(dá)質(zhì)粒;生長效應(yīng)中圖分類號:S828.89文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A文章編號:2095—119l(2014)12—2264一06Eukaryoticexpressi
4、onplasmidofGHRHmatureDeDtideEUKaryonCeXpreSSlonDIaSmln0tb上U}【HmatUreDeDtldefromGuangxiBamaMini—piganditsinnuence0nmousegrowthef
5、fectLIFang—fan91,GU0Ya—fen2+,LANGan—qiu2,PANTang—feng3(1Guan群iWorkStationofLivestock&PoultryBreedImpmvement,Nanning530001,China;2CoUegeofAnimalScienceandTcchnology,
6、GuangxiUniversity,Nanning530005,China;3AnimalHealthSupervisionInstitufeofNew&High.techIndustrialDevelopmentZone,Nanning530005,China)Abstract:【0bjecIive】Thepresentexperimentwasconduccedtoinvestigatetheinfluenceofmaturepeptideeukary—oticexpressionplasmidofgrow山ho珊onereleasingho瑚one(GHRH)inGuan
7、鰣B哪aMini—pigonmousegr0訕ef.fect,inorderloprovidereferenceforresearchingthepromotinggrowtheffectofGHRHmaturepeptideonGuan鏟iBa—maMini—p培,ande蚯cientpreparationandsafetyuseofGHRHgenevaccine.【Method】Byusinggenerecombinationtechnique,theGⅣRHmaturepeptidesequenceofGuang弭iBamaMini—pigwaslinkedintopla
8、smidpEGFP—N1tocon—stnlctrecombinanteukaryoticplasmidpEGFP—GHRH.Themousepre眥atedwith25%sugarsolutionwastreatedwithintmmusculariniectionwithdoseof0.5¨g壇plasIIlidtorecordtheirweight.Meanwhikailningatmiceininjec“ongroupofrecombinantplasmid,theDNAofthei