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《苦馬豆內生真菌分離鑒定與多樣性分析-論文.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、畜牧獸醫(yī)學報2013，44(3)：465—474ActaVeterinariaetZootechnicaSinica苦馬豆內生真菌分離鑒定與多樣性分析周啟武，趙寶玉，路浩，張潞，楊曉雯，張棵，溫偉利(西北農林科技大學動物醫(yī)學院，楊凌712100)摘要：為探明苦馬豆中是否存在內生真菌及其分布情況，對采自內蒙古阿拉善盟草原的苦馬豆樣品進行內生真菌分離。通過內生真菌常規(guī)分離純化法分離內生真菌，以確定75乙醇和2NaC10的最佳表面消毒時間，并運用形態(tài)學方法和rDNA—ITS系列技術對分離菌株進行種屬鑒定。結果顯示苦馬豆葉和種子用75乙醇及2％Na—C1
2、0的最佳表面消毒時間分別為30S、3．5rain和50S、4min。最佳消毒條件下，葉的分離率最高(41．67)，種子次之(37．14)，種子中內生真菌種類與數量比最高(38．75)，其次是莖(20．O0％)。從苦馬豆的4種組織中共分離得到8O株內生真菌，分屬于4綱、5目、6科、1O屬，其中鏈格孢屬(Alternariasp．)和鐮刀菌屬(Fusariumsp．)的總相對分離率分別為53．75和21．25，為苦馬豆內生真菌的優(yōu)勢菌屬?？囫R豆內生真菌的數量、種屬組成與分布存在明顯組織差異性；其中種子和葉是內生真菌侵染和定植的主要部位，且種子內生真菌
3、多樣性最高。關鍵詞：苦馬豆；內生真菌；分離鑒定；rDNA—ITS；多樣性中圖分類號：$859．87文獻標志碼：A文章編號：0366—6964(2013)03—0465—10IsolationandIdentificationofEndophyticFungiinJsp口P，Dp口salsulaandItsDiversityAnalysisZHOUQi—WU，ZHAOBao-yu，LUHao，ZHANGLu，YANGXiao-wen，ZHANGLiang，WENWei—li(CollegeofVeterinaryMedicine，Northwest
4、A&FUniversity，Yangling712100，China)Abstract：EndophyticfungiwereisolatedfromSphaerophysasalsulasamplesfromAlashanofIn—nerMongoliatoinvestigatewhetherendophyticfungiexistinthisplantandtoassessthediversityanddistributionofendophyticfungi．Theoptimalmethodforsterilizationofplantma
5、terialssur—facewith75ethanoland2％NaC1Owasdeterminedbythegeneralmethodofendophyticfun—gus’isolationandpurification，speciesandgenusofendophyticfunguswasidentifiedbythetra—ditionalmorphologyandmolecularbiology．Itwasfoundthat75enthanolfor30S，2NaC1Ofor3．5min．and75enthanolfor50S，2N
6、aC1Ofor4rain．weremoresuitableforlearandseedsterilizationofSphaerophysasalsula，respectively．Undertheoptimalsurfacesterilizationconditions，leafhadamaximumisolationrates(41．67)，followedwithseed(37．14％)；andthespeciesandthequantityratio(38．75)ofendophyticfungiisolatedfromseedwasth
7、ehigh—est，followedwithstem(20．O0)．Eightystrainsofendophyticfungiwereisolatedfrom4dif—ferenttissuesofSphaerophysasalsula，whichbelongedto10genera，6families，5ordersand4classes．AlternariaspandFusariumspwerethedominantspeciesinthisplantwiththerelativefrequency53．75and21．25，respect
8、ively．Therewasanobviouslydifferenceinquantity，speciesanddistribution
