土壤真菌分離和計(jì)數(shù)方法的探討

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1、沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2000-10,31(5):515-518JournalofShenyangAgriculturalUniversity,2000-10,31(5):515-518土壤真菌分離和計(jì)數(shù)方法的探討梁晨,呂國忠(沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)植保系,遼寧沈陽110161)摘要:綜述了分離土壤真菌的方法以及測定土壤真菌的間接計(jì)數(shù)法和直接計(jì)數(shù)法;介紹了常見的分離和計(jì)數(shù)培養(yǎng)基;評價(jià)了各種方法和培養(yǎng)基的優(yōu)缺點(diǎn);并著重討論了各種分離和計(jì)數(shù)方法的應(yīng)用。關(guān)鍵詞:土壤真菌;分離;計(jì)數(shù);培養(yǎng)基+中圖分類號:S432.44文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A文章編號:1000-1700(200

2、0)05-0515-04ApproachonIsolationandEnumerationMethodsofSoilFungiLIANGChen,LUGuo-zhong(DepartmentofPlantProtection,ShenyangAgriculturalUniversity,Shenyang110161,China)Abstract:Thatofisolationmethodsforsoilfungiandtheindirectanddirectenumerationmethodsformeasuringsoilfungi;wasre

3、-viewed.Authorslistedcommonmediaforenumerationandisolation;valuedtheadvantagesanddisadvantagesoftheoffungiofmeth-odsandmedia;andfocusedondiscussingtheapplicationofthesemethodsforisolationandenumeration.Keywords:soilfungi;isolation;enumeration;medium60年代以來,微生物生態(tài)學(xué)研究發(fā)展較快,推動(dòng)了土壤微生

4、物學(xué)的研究,人們的興趣轉(zhuǎn)向了解土壤中真菌存在的形式、數(shù)量、活性以及它們在物質(zhì)轉(zhuǎn)化中的重要作用。80年代后,由于逐漸采用新研究技術(shù)和手段,使土壤微生物的發(fā)展進(jìn)入了一個(gè)新時(shí)期,土壤微生物生態(tài)學(xué)的發(fā)展在很大程度上依賴于研究方法的改進(jìn)和更新。土壤真菌作為土壤微生物區(qū)系的重要組成部分,雖然與其它組分(細(xì)菌、放線菌)有著共性,但也[1～3]具有其特殊性,因此對土壤真菌研究方法的探討尤具意義。土壤真菌包括分布廣泛的土壤習(xí)居菌和分布局限的土壤寄居菌,土壤真菌區(qū)系的研究對于衡量和維持生物多樣性以及研究和防治土傳性病害都具有重要意義。由于真菌在土壤中的存在狀態(tài)的多樣

5、性和分布的不均勻性以及土壤本身理化性質(zhì)的影響,對于如何反[4,5]映土壤真菌區(qū)系全貌的分離和計(jì)數(shù)方法需要做進(jìn)一步的評價(jià)。1土壤真菌的分離方法1.1分離方法土壤真菌的分離可采用稀釋平板法、土壤淋洗法、孢子懸浮法、土壤平板法、鐘形撒粉器法、平板插入[6～14]篩選法、插入管法、菌絲分離法、植物殘?jiān)?、直接分離法、捕捉法、濕篩法、漂浮法和蒸氣法。其中稀釋平板法用于分離產(chǎn)孢能力較高的半知菌、子囊菌和接合菌,例如青霉屬、曲霉屬、擬青霉屬、粘帚霉屬、鐮孢屬、枝頂孢屬和枝孢屬,很少分離到擔(dān)子菌和無孢子真菌。土壤平板法適用于分離在土壤中以菌絲狀態(tài)存在的真菌,具有

6、簡便易行的特點(diǎn)。植物殘?jiān)ㄟm用于稀釋平板法或土壤平板法不能分離的真菌,例如立枯絲核菌(Rhizoctoniasolani)。濕篩法和漂浮法用于分離產(chǎn)生孢子囊的真菌。捕捉法可用于分離腐霉[15]屬、疫霉屬和絲核菌屬。沖洗土粒法適用于分離腐霉屬、疫霉屬、木霉屬、枝頂孢屬、鐮孢屬和毛殼菌屬。鐘形撒粉器法可用來分離鐮孢屬。平板插入篩選法或插入管法適用于分離絲核菌屬和葡萄孢屬。蒸氣法用于分離土壤中的子囊菌。此外,也可采用菌絲分離法和直接分離法來分離不易產(chǎn)孢的真菌。收稿日期:2000-08-26基金項(xiàng)目:遼寧省科委博士起動(dòng)基金資助項(xiàng)目(961046)作者簡介

7、:梁晨(1971-),女,萊陽農(nóng)學(xué)院講師,沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)植保系碩士研究生,從事植物病理學(xué)與土壤真菌學(xué)的教學(xué)和科研工作?！鹧芯繄?bào)告RESEARCHREPORT·516·沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)第31卷1.2培養(yǎng)基土壤內(nèi)真菌種類繁多,它們的營養(yǎng)需要不同,因此常采用多種不同的培養(yǎng)基作營養(yǎng)物質(zhì)過篩培養(yǎng)。一般采用的培養(yǎng)基有無碳培養(yǎng)基、無碳培養(yǎng)基加氨基酸、維生素、棉花纖維或植物組織、洋麻培養(yǎng)基以及孟加拉紅培養(yǎng)基等十幾種培養(yǎng)基。其中孟加拉紅瓊脂培養(yǎng)基、馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基(PDA)、麥芽浸汁瓊脂培養(yǎng)基[16](MEA)和牛膽汁瓊脂培養(yǎng)基可兼用于土壤真菌的分離和計(jì)數(shù)。孟加拉紅

8、瓊脂培養(yǎng)基是一種組合培養(yǎng)基,成分準(zhǔn)確,其上發(fā)育的真菌數(shù)量及種類較多,放線菌及大部分細(xì)菌易被孟加拉紅和鏈霉素所抑制,但真菌菌落較小,是最常