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《高活力糖化酶發(fā)酵技術(shù)的研究.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、#??%?)?%??0《食品與發(fā)酵工業(yè)》以月!?%&(!+,,?./〕高活力糖化酶發(fā)酵技術(shù)的研究烏卜敏辰鄭建豐李劍芳,,2+3+2341,,2+31江蘇省無錫啟蒙生物高技術(shù)研究所無錫縣無錫輕工業(yè)大學(xué)食品工程系無錫56?4、、摘要本文對(duì)糖化酶產(chǎn)生菌八.+3,的誘變育種方法發(fā)酵產(chǎn)酶工藝搖瓶培養(yǎng)基配方及小。,、型自動(dòng)發(fā)酵罐條件等進(jìn)行了系統(tǒng)的研究實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明菌種自然分離紫外線誘變以及.78,)處理等的配合作用可顯著提高產(chǎn)酶量和轉(zhuǎn)化率出發(fā)菌株的產(chǎn)酶活力從9:55;<(提高到+:55;間。,帥已巧突
2、變菌株發(fā)酵,5)按最佳的培養(yǎng)基配方和發(fā)酵工藝條件采用=+??>酶活力6),?？蛇_(dá)5555;鬧以上對(duì)提高我國的糖化酶活力具有重要的現(xiàn)實(shí)意義關(guān)健詞糖化酶,黑曲霉,發(fā)醉技術(shù),、近年來國內(nèi)在提高糖化酶活力及降低二菌種,,生產(chǎn)成本等方面作了許多研究工作并不斷黑曲霉菌株Α.+3,由無錫輕工大學(xué)中。央研究所酶工程實(shí)驗(yàn)室提供。以+有新的研究成果報(bào)道但目前我國糖化酶生Α.3,為出一?5),,、產(chǎn)廠家的平均酶活仍在55;司左右由發(fā)菌株經(jīng)多次紫外線照射自然分離及,,Δ。于生產(chǎn)原料及能源價(jià)格的不斷上漲使生產(chǎn).78處理最
3、終獲=.ΒΧ+:突變株發(fā)酵酶,糖化酶的經(jīng)濟(jì)效益日益下降甚至有部分生活力在搖瓶篩菌培養(yǎng)基上達(dá)+:55?);&?以產(chǎn)廠家被迫停產(chǎn)、轉(zhuǎn)產(chǎn)。大幅度地提高糖化酶上?；?,、力提高酶收得率降低生產(chǎn)成本已迫在眉三培養(yǎng)基0睫。+試管料面培養(yǎng)基江蘇省無錫啟蒙生物高技術(shù)研究所在總采用查氏培養(yǎng)基、鼓皮浸出液培養(yǎng)基。,,結(jié)前人研究的基礎(chǔ)上經(jīng)多年探索先后在糖20搖瓶篩菌培養(yǎng)基化酶的生產(chǎn)菌、生產(chǎn)工藝、后提取工藝等方面采用玉米粉+60:?,豆餅粉60:?,熬皮00。+,,。取得了突破性的進(jìn)展在發(fā)酵配方總固形物。?玉米漿25?
4、無機(jī)鹽,,為6:?發(fā)酵時(shí)間為+?5>條件下發(fā)酵酶活60獲曲抱子培養(yǎng)基,0,0。6555),+,+235力超過;耐比國內(nèi)平均發(fā)酵水平提高熬皮水一調(diào)ΕΦ為,0了6倍生產(chǎn)成本下降了6?6?。本文擬將30種子培養(yǎng)基對(duì)糖化酶發(fā)酵技術(shù)的這一方面內(nèi)容作一報(bào)采用玉米粉??,豆餅粉205?,鼓皮道。+05?,無機(jī)鹽。四、搖瓶方法材料和方法,于:55耐三角瓶中裝人培養(yǎng)基:5耐在,,、、?%<下滅菌25而冷卻接人斜面鼓曲或一原料,,6??#;而玉米粉、淀粉、豆餅粉、熬皮、玉米漿、無液體種子培養(yǎng)物置于旋轉(zhuǎn)搖床,。Χ下
5、機(jī)氮源、無機(jī)鹽等。振幅2:Δ62培養(yǎng)一定時(shí)間五、2:Γ發(fā)酵罐試驗(yàn)0《》以記!?#??%%&?(!)?%#&??+,,?.?2食品與發(fā)酵工業(yè),于中2:5Μ:5發(fā)酵罐中裝入發(fā)從表+和表2可看出對(duì)于Α.+3,菌ΔΔ,、,,,酵培養(yǎng)基+3Γ經(jīng)滅菌冷卻接人+茄子瓶株通風(fēng)量大小對(duì)糖化酶的活力影響很大通鼓曲抱子或搖瓶液體種子。在一定溫度、攪拌風(fēng)量大酶活單位高,通風(fēng)量小酶活力低Ο對(duì)于、,,轉(zhuǎn)速通風(fēng)量條件下發(fā)酵+?5>左右待殘?zhí)?>Π4+:菌株通風(fēng)量大小對(duì)糖化酶的活力0,,5:?,小于二次測定酶活力單位不
6、再上升影響較小但培養(yǎng)基濃度超過2??時(shí)酶活,。。,及ΝΦ回升時(shí)即可放罐力不再增加主要是由于玉米粉濃度高培養(yǎng)六、分析方法基中不溶性雜質(zhì)過多,增加了發(fā)酵醒的稠度,+0糖化酶的酶活力降低了發(fā)酵液內(nèi)的溶解氧。當(dāng)采用淀粉代替按工業(yè)用酶制劑行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)測定。玉米粉作為碳源時(shí),由于淀粉雜質(zhì)含量少,最0,2ΝΦ值瀏定高配方濃度可達(dá)6:?酶活力超過2655?);采用精密聲試紙測定。而。60總糖、還原糖二、培養(yǎng)基哪值對(duì)產(chǎn)酶的影響采用斐林試劑法測定。我們研究了不同起始ΕΦ對(duì)菌株產(chǎn)糖化30酸度酶的影響,采用篩菌培養(yǎng)基,在滅
7、菌前分別調(diào)0+。5??;+,。以耐發(fā)酵濾液消耗犯一+:對(duì)053,、。通風(fēng)量的要求結(jié)果如表+表2所示表+不同裝液%對(duì)產(chǎn)醉的影晌’563???ΘΕΦ圖+發(fā)酵起始ΝΦ對(duì)菌株產(chǎn)酶的影響裝液量1耐465:595+55+25注Ρ1Σ+534縱座標(biāo)為酶活力);耐菌Α.+3,9:55?2:5?55536556+
8、2:),,株1;(?4從圖+可見起始ΝΦ值低于3時(shí)原料=入《4+:+:2:5+:555+3,+3?:5+32:5不,,能充分糖化致使菌體生長緩慢產(chǎn)酶能力)1;(?4,,弱Ο?當(dāng)值高于時(shí)菌體易自溶致使菌Ρ,#,ΕΦ注采用篩菌培養(yǎng)基轉(zhuǎn)速2:?;<&62℃培養(yǎng),ΟΝΦ3?,?>。體過早老化在一范圍內(nèi)州值對(duì)菌種產(chǎn)酶影響不大。表2不同培養(yǎng)基濃度對(duì)產(chǎn)酶的影晌、、三發(fā)酵培養(yǎng)基濃度的影響?9222?6563,采用淀粉為碳源配成不同總固形物濃嘿找1?41?41?41?41?4,,度的發(fā)酵培養(yǎng)基搖瓶發(fā)酵+??>結(jié)果
