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1、2014年8月湖南師范大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報(bào)V01．37No．4第37卷第4期JournalofNaturalScienceofHunanNormalUniversityAug．，2014劍麻殘?jiān)碥赵弋a(chǎn)率菌株的篩選及特性研究孫昊，劉建國(guó)，朱桂梅，李海云，郝再彬(桂林理工大學(xué)化學(xué)與生物工程學(xué)院，中國(guó)桂林541004)摘要通過(guò)微生物發(fā)酵法將劍麻皂苷轉(zhuǎn)化成皂苷元．采集桂林喀斯特地貌土壤樣品，從能夠降解皂苷糖基的多個(gè)菌株中篩選出JM-7，對(duì)其發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化，得到最適條件：溫度30℃、pH為6、發(fā)酵時(shí)間5d、底物質(zhì)量濃度6s／L，并且對(duì)產(chǎn)物皂苷元進(jìn)行了HPLC檢測(cè)和單晶衍射測(cè)
2、定．關(guān)鍵詞劍麻皂苷；皂苷元；菌株篩選；發(fā)酵優(yōu)化中圈分類(lèi)號(hào)Q93；$567文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)1000-2537(2014)04-0029-04StudyonScreeningandSpecialityofMicroorganismDegradatingSisalagenintoProduceTigogeninfr0mSisalResidueSUNHao，LIU~an-guo，ZHUGui—mei，LIHai—yun，HAOZai—bin(CollegeofChemistryandBioengineering，GuilinUniversityofTechnology，
3、Guilin541004，China)AbstractMicrobialfermentationmethodwasusedforproducingtigogenin，themicroorganismJM-7wasob-tainedfromsoilsamplecollectedformGuangxiprovinceviamultiplescreening．Thefermentationconditionswereoptimized，andtheresultsshowedtheoptimumtemperaturewas30℃，theoptimumpHwas6，thebe
4、stfermenta—tiontimewas5days，andtheoptimumsubstrateconcentrationwas6g／L．HPLCandsinglecrystaldifractionmethodwereusedtodetectthefermentedproduct．Keywordssisalagenin；tigogenin；screening；fermentationoptimization工業(yè)生產(chǎn)劍麻纖維時(shí)剩余的抽絲汁液和殘?jiān)泻胸S富的劍麻皂苷資源，轉(zhuǎn)化提取出的皂苷元可以改善小鼠糖耐量-l；劍麻皂苷元能明顯降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖水平，對(duì)
5、腎上腺素高血糖大鼠也有降血糖作用．劍麻皂苷元(Tigogenin，圖1)是螺甾烷醇的衍生物，是合成甾體激素類(lèi)藥物的醫(yī)藥中間體和重要原料，廣泛應(yīng)用于腎上腺皮質(zhì)激素、性激素及蛋白同化激素，三大類(lèi)激素可以制造200多種藥物4。．用HOH甲醇提取劍麻葉汁中的化合物，分離得到5個(gè)甾體皂苷A、B、C、D、E，圖1皂苷元結(jié)構(gòu)均可用于皂苷元的轉(zhuǎn)化．藥理研究表明，這種皂苷元成分具有較明顯的Fig．1Thestructureoftigogenin抗炎、抗菌、止血、抗衰老和降血糖的生物活性．目前工業(yè)生產(chǎn)劍麻皂苷元采用硫酸加熱回流提取法，通過(guò)多次醇提酸解皂苷得到皂苷元產(chǎn)品．大量醇和酸對(duì)環(huán)境
6、造成很大危害，同時(shí)也提高了生產(chǎn)成本．因此，新型的無(wú)污染低能耗的劍麻皂苷元生產(chǎn)方法亟待研究與開(kāi)發(fā)，本實(shí)驗(yàn)篩選出產(chǎn)生劍麻皂苷元的高活性發(fā)酵微生物，為工業(yè)化生產(chǎn)開(kāi)辟了一條新途徑．收稿日期：2013-09-10基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31060193)；國(guó)家麻類(lèi)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專(zhuān)項(xiàng)基金資助項(xiàng)目(CARS一19)女通訊作者。E-mail：haozaibin2010@126．com湖南師范大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報(bào)第37卷1材料與方法1．1材料1．1．1菌種與培養(yǎng)基土壤樣品：實(shí)驗(yàn)室采集桂林喀斯特地貌的土壤樣品200份．篩選培養(yǎng)基：絞股藍(lán)皂苷2g；瓊脂2g；硫酸亞鐵0．001g
7、；硫酸鎂0．05g；氯化鈉0．05g；磷酸氫二鉀0．05g；硝酸鉀0．1g；水100mL，用1mol／LNaOH調(diào)節(jié)pH至7．5，121c(=滅菌20min，搖勻后倒平板．1．1．2試劑與儀器試劑：劍麻皂苷元標(biāo)準(zhǔn)品(98％，HPLC純，上海研生生物技術(shù)有限公司)；劍麻殘?jiān)?廣西劍麻集團(tuán))；絞股藍(lán)皂苷(惠州市仙草植物保健科技有限公司)；無(wú)水乙醇、甲醇、氯化鈉、硫酸鎂、硫酸亞鐵、磷酸氫二鉀、硝酸鉀、氫氧化鈉、鹽酸、香草醛、乙酸、高氯酸，以上試劑均為分析純．儀器：Tu-1800S紫外分光光度計(jì)(美國(guó)VARIAN公司)；BS110S(塞多利斯)電子天平(北京塞多利斯有限
