實(shí)驗(yàn)六-從淡奶粉中分離、鑒定酪蛋白和乳糖.doc

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1、實(shí)驗(yàn)六　從淡奶粉中分離、鑒定酪蛋白和乳糖教學(xué)要求:　　　1掌握通過(guò)等電點(diǎn)分離蛋白質(zhì)的原理和方法；　　　2掌握蛋白質(zhì)鑒定的特征反應(yīng)；　　　3掌握還原性糖的鑒定方法。教學(xué)重點(diǎn)：掌握通過(guò)調(diào)節(jié)溶液體系的pH值利用等電點(diǎn)分離蛋白質(zhì)。教學(xué)難點(diǎn)：蛋白質(zhì)和還原性糖鑒定反應(yīng)的操作及其現(xiàn)象觀察教學(xué)時(shí)數(shù)：4學(xué)時(shí)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、掌握分離蛋白質(zhì)和糖的原理和操作方法；２、掌握蛋白質(zhì)的定性鑒定方法；３、了解乳糖的一些性質(zhì)。二、實(shí)驗(yàn)原理　　牛奶的主要成分是水、蛋白質(zhì)、脂肪、糖和礦物質(zhì)，其中，蛋白質(zhì)主要是酪蛋白，而糖主要是乳糖。　　蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí)溶解度最小，當(dāng)把牛奶的ＰＨ值調(diào)到4.8時(shí)(酪蛋白的等電點(diǎn)),酪

2、蛋白便沉淀出來(lái)。酪蛋白不溶于乙醇和乙醚，可用乙醇和乙醚來(lái)洗去其中的脂肪?！　∪樘遣蝗苡谝掖荚跒V去酪蛋白的清液中加入乙醇時(shí)，乳糖會(huì)結(jié)晶出來(lái)。三、實(shí)驗(yàn)步驟　　１、酪蛋白與乳糖的提取　?。磄奶粉與80mL40℃溫水調(diào)配均勻，以10%乙酸調(diào)節(jié)pH=4.7(用精密pH試紙測(cè)試)，靜置冷卻，抽濾。　濾餅用6mL水洗滌，濾液合并到前一濾液中。濾餅依次用6mL95%乙醇，6mL乙醚洗滌，濾液棄去。濾餅即為酪蛋白，晾干稱重?！　≡谒芤褐屑尤?.5g碳酸鈣粉，攪拌均勻后加熱至沸，過(guò)濾除去沉淀，在濾液中加入1～2粒沸石，加熱濃縮至8ml左右，加入10ml95%乙醇（注意離開火焰）和少量活性炭，攪

3、拌均勻后在水浴上加熱至沸騰，趁熱過(guò)濾，濾液必須澄清，加塞放置過(guò)夜，乳糖結(jié)晶析出，抽濾，用95%乙醇洗滌產(chǎn)品，晾干稱重?！　。?、酪蛋白的性質(zhì)　　縮二脲反應(yīng)　取10ml酪蛋白溶液，加入10%NaOH溶液2ml后，滴入1%CuSO4溶液1ml。振蕩試管，觀察現(xiàn)象(溶液呈藍(lán)紫色)?！　〉包S顏色反應(yīng)　取10ml酪蛋白溶液，加入濃硝酸2ml后加熱，觀察現(xiàn)象（有黃色沉淀生成）。再加入10%NaOH溶液2ml，有何變化?(沉淀為橘黃色)3、乳糖的性質(zhì)　　Fehling反應(yīng)?。芿hling試劑A和Ｂ各3mL,混勻，加熱至沸后加入0.5mL5%乳糖溶液，觀察現(xiàn)象?！　ollen反應(yīng)　在2mLT

4、ollen試劑中加入0.5mL5%乳糖溶液，在80℃中加熱，觀察現(xiàn)象(有銀鏡生成)。四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果品名性狀產(chǎn)量收率五、問(wèn)題與討論１、本實(shí)驗(yàn)中是如何將蛋白質(zhì)和糖分開的？２、用乙醇和乙醚洗滌時(shí)主要除去的是哪類物質(zhì)？３、加入碳酸鈣粉末有什么作用？