生化試劑SP標(biāo)準(zhǔn)操作程序(魅力1800).doc

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1、ALT/GPT丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑盒臨床意義:本試劑盒適用于體外臨床檢驗(yàn),用于測(cè)定人血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的活力。臨床上,有許多疾病會(huì)導(dǎo)致血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活力增高。如肝膽類疾?。喊▊魅拘愿窝?、肝癌、肝硬變活動(dòng)期、中毒性肝炎、脂肪肝、膽管炎;心血管疾?。喊ㄐ募」H⑿募⊙?、腦出血等。一些藥物和毒物也可以引起ALT活性升高:如氯丙嗪、異煙肼、奎寧、酒精、鉛、汞、有機(jī)磷等。因此,血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活力的測(cè)定可用于這些致病的診斷和監(jiān)測(cè),特別是用于肝膽類疾病的診斷和肝功能檢測(cè)方法原理:上??迫A生物工程股份有限公司的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑盒以IFCC1(國(guó)際臨床化學(xué)委

2、員會(huì))推薦法為基礎(chǔ)設(shè)計(jì),采用兩步法測(cè)定:丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶L-丙氨酸+α-酮戊二酸-----------------------→丙酮酸+L-谷氨酸乳酸脫氫酶丙酮酸+β-NADH+H+---------------→L-乳酸+H2O+NAD+底物L(fēng)-丙氨酸和α-酮戊二酸在丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶催化下,生成丙酮酸和L-谷氨酸.其中丙酮酸在乳酸脫氫酶的催化下,生成了L-乳酸,并同時(shí)引起了β-NADH的氧化,使波長(zhǎng)340nm處的吸光度下降.在一定底物濃度范圍內(nèi),β-NADH的氧化所引起的340nm處吸光度的下降速率與血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活力成正比。樣本:病人準(zhǔn)備:應(yīng)空腹取血。樣

3、本類型:新鮮無(wú)溶血現(xiàn)象的血清或EDTA抗凝血漿。最少樣品量:0.2ml。樣本穩(wěn)定性:血清中的ALT在2~8℃可穩(wěn)定7天,不推薦使用冰凍保存的樣本2。儀器與試劑:儀器:魅力1800生化分析儀試劑:上??迫A生物工程股份有限公司的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑盒試劑準(zhǔn)備:丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑盒為即開(kāi)即用的液體雙劑型,無(wú)需特殊準(zhǔn)備。試驗(yàn)用試管的直徑在12~16mm。試劑組份:參見(jiàn)試劑盒內(nèi)說(shuō)明書(shū)。注意事項(xiàng):1.此試劑為體外診斷用。2.試劑有毒,不要入口,吞下有害,如誤服(包括內(nèi)部接觸)應(yīng)立即尋求醫(yī)療保護(hù)。避免試劑和眼睛,皮膚及粘膜接觸,如不慎接觸(外部接觸)應(yīng)用大量的水沖洗受損害的部位

4、,如仍有不適,應(yīng)前往醫(yī)院診治。3.試劑中含有疊氮鈉,可與下水管中的銅反應(yīng)形成爆炸性化合物,如果排向下水道請(qǐng)用大量的水沖洗。性能參數(shù):1.精密度(重復(fù)性):批內(nèi)變異系數(shù)≤5%;批間相對(duì)極差≤6%。2.準(zhǔn)確度:相對(duì)偏差≤15%。3.病人結(jié)果可報(bào)告范圍(線性范圍):0~1000U/L(37℃)。4.分析特異性(抗干擾能力):本液體試劑以IFCC推薦法為基礎(chǔ)設(shè)計(jì),采用二步法,可防止膽紅素的干擾。5.穩(wěn)定性:試劑在2~8℃避光保存,有效期為1年;試劑開(kāi)啟后在2~8℃避光保存,可穩(wěn)定30天。變質(zhì)指示:如試劑混濁,或以蒸餾水為空白,試劑工作液在340nm處吸光度小于1.0,請(qǐng)勿使

5、用。校準(zhǔn):使用生理鹽水(蒸餾水)和理論K因素進(jìn)行校準(zhǔn),或者使用生理鹽水(蒸餾水)和其它質(zhì)量可靠的校準(zhǔn)血清進(jìn)行二點(diǎn)校準(zhǔn)。質(zhì)控:至少2個(gè)濃度水平的質(zhì)控品。操作程序:魅力1800開(kāi)機(jī)①裝載試劑②輸入?yún)?shù)③實(shí)施校準(zhǔn)④加載樣本和儀器有關(guān)的操作程序請(qǐng)參照魅力1800用戶手冊(cè)。計(jì)算:無(wú)需手工計(jì)算,在37℃每個(gè)樣本的結(jié)果自動(dòng)以U/L打印。報(bào)告結(jié)果:參考范圍:血清和血漿:8~40U/L(37℃)。參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的參考值。不正常結(jié)果的處理程序:根據(jù)儀器參數(shù)的正常值會(huì)打印異常標(biāo)志。報(bào)告格式:自動(dòng)地打印37℃U/L的報(bào)告,如果以SI單位

6、(uKat/L)報(bào)告結(jié)果,要乘以0.017。操作過(guò)程注意事項(xiàng):操作過(guò)程的限制性:丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑盒的線性范圍是0~1000U/L。樣品濃度超過(guò)線性上限應(yīng)稀釋重做。如在魅力1800中應(yīng)用自動(dòng)重做功能,標(biāo)本稀釋重做后會(huì)自動(dòng)乘以稀釋倍數(shù)。超范圍的標(biāo)本也可以用生理鹽水稀釋后重新測(cè)定,結(jié)果乘以稀釋倍數(shù),魅力1800可以應(yīng)用自動(dòng)重做功能自動(dòng)重作超范圍的標(biāo)本。參考文獻(xiàn):1.ExpertPanelonEnzyme.ScientificCommittee.InternationalFederationofClinicalChemistry:IFCCMethodsforalanin

7、eaminotransferase(stage2,Draft1979-11-19).Clin.Chem.Acta.147F-172F(1980).2.葉應(yīng)嫵,王毓三;全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第三版)3.Young,D.S.,EffectsofDrugsonClincialLaboratoryTests,4thEdition,AACCPress,1995.SOP標(biāo)準(zhǔn)操作程序AST/GOT天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(紫外-蘋果酸脫氫酶法)試劑盒臨床意義:本試劑盒適用于體外臨床檢驗(yàn),用于測(cè)定人血清中天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的活力。天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶在心肌細(xì)胞內(nèi)含量較多,當(dāng)心肌梗

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