慢性乙型肝炎患者外周血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子水平檢測(cè)及臨床意義.pdf

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1、·186·王苤查Q堡旦箜鲞箜塑』旦!!::::·短篇論著·慢性乙型肝炎患者外周血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子水平檢測(cè)及臨床意義李彩東,陳錫蓮,田鵬飛,李惠軍,吳斌【摘要】目的探討慢性乙型肝炎病毒感染者外周血CD4CD25調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)、IL一18、IFN一、TGF—p水平變化及臨床意義。方法選擇乙型肝炎病毒攜帶者(ASC)112例、慢性乙型肝炎患者(CHB)63例和健康對(duì)照者5O例,采用流式細(xì)胞術(shù)和ELISA法分別檢測(cè)CD4+CD25+細(xì)胞和IL一18、IFN一、TGF—B水平;采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)法檢測(cè)HBVD

2、NA載量。結(jié)果CHB患者外周血CD4+CD25~Freg細(xì)胞數(shù)、IL一18、IFN一、TGF_p水平分別為(3O.97±18.78)%、(448.51±75.75)ng/ml、(190.934-38.52)nmI和(331.22±71.67)ng/ml,ASC組分別為(28.17±18.52)%、(524.52±81.42)nm1、(204.93±47.77)nI和(336.01±82.61)ng/ml,均顯著高于健康人[分別為(27.30±17,59)%、(49.79±25.68)n#ml、(14.41±11.75)ng/m

3、l和(42.284-17.50)ng/ml,/9<0.053。結(jié)論乙型肝炎病毒感染者存在CD4CD25q'reg細(xì)胞數(shù)的變化,IL一18、IFN一和TGF—p可能參與了乙型肝炎患者肝損傷過(guò)程?!娟P(guān)鍵詞】慢性乙型肝炎;CD4+CD25調(diào)節(jié)性T細(xì)胞;細(xì)胞因子DOI:10.39696.issn.1672-5069.2015.02.020ChangesofperipheralbloodCD4+CD25+TregceHsandIL一18、IFN—andTGF—DinpatientswithhepatitisBLiCmdong,ChenX

4、ilian,TianPengfei,et.InstituteofLiverDiseasesResearch,SecondPeople’sHospital,Lanzhou730046,GomuProvince,China【Keywords】HepatitisB;CD4CD25q"regulatorycells;Cytokines慢性乙型肝炎的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜。國(guó)內(nèi)外學(xué)者認(rèn)為導(dǎo)致慢病學(xué)會(huì)和感染病學(xué)會(huì)聯(lián)合修定的慢性乙型肝炎防治指南[51的性肝損傷的主要原因是機(jī)體免疫調(diào)控紊亂。CD4CD25調(diào)節(jié)標(biāo)準(zhǔn)。所有患者均未接受過(guò)免疫調(diào)節(jié)和抗病毒治療

5、,6個(gè)月性T細(xì)胞(Tregulatorycells,Tregs)具有免疫抑制功能,能在內(nèi)未接受過(guò)保肝治療。排除甲、丙、丁、戊型肝炎病毒感染,排自身免疫性疾病、腫瘤免疫、移植免疫I-J發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮除自身免疫性肝炎、酒精性肝炎、藥物性肝損傷。另選擇同期重要作用。Thl/Th2細(xì)胞失衡可能是HBV感染慢性化的機(jī)門診健康體檢者50例,男性25例,女性25例;年齡23~58制之一1。因此,針對(duì)慢性乙型肝炎患者Thl和Th2類細(xì)胞因歲,平均年齡(38.6-4-13.1)歲,排除各型肝炎病毒感染,排除子的研究也是慢性乙型肝炎發(fā)病機(jī)制研

6、究的熱點(diǎn)之一。Thl心肺疾病,肝功能正常。型細(xì)胞因子主要有白細(xì)胞介素一18(Interleukin一18,IL一18)、1.2外周血CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞檢測(cè)空腹取外周血2一干擾素(Interferon一1,,IFN一)等,Th2型細(xì)胞因子有轉(zhuǎn)化生ml,乙二胺四乙酸二鉀(EDTAK2)抗凝,在樣品測(cè)定管中加人長(zhǎng)因子p(Transforminggrowthfactor—B,TGF—p)、白細(xì)胞介抗凝血50l,加入抗CD4FITC/CD8PE/CD3PerCP單克隆抗素一10(Interleukin一10,IL—l0)等。

7、本研究旨在探討HBV感體20l(購(gòu)自美國(guó)Bectond—Dickinson公司),振蕩混勻,室染者外周血CD4+CD25q'reg及IL一18、IFN一、TGF—p水平的溫避光孵育20min,加入溶血素2ml,振蕩混勻,室溫避光變化及臨床意義。放置15min。1500r/m離心5min,棄上清液。加入PBS21資料與方法ml,1500r/m離心5min,棄上清液,重復(fù)一次。加入PBS1.1病例來(lái)源2012年7月2012年12月我院門診和住院500LLl,上機(jī)(FACSVVerse流式細(xì)胞分析儀,美國(guó)Becton—收治的慢性乙型

8、肝炎(CHB)患者63例,男性3O例,女性33Dickinson公司)檢測(cè)。全部數(shù)據(jù)用流式細(xì)胞儀和BDFAC例;年齡21~57歲,平均年齡(37.28±12.08)歲。HBV攜帶者Suite軟件系統(tǒng)進(jìn)行熒光參數(shù)獲取和分析。(ASC)112例,男性69例,女性43例;年齡28~

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