高血壓對大鼠胰島微血管密度及胰島功能的影響-論文.pdf

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1、廣東醫(yī)學2014年4月第35卷第8期GuangdongMedicalJournalApr．2014，Vo1．35，No．8·1l57·高血壓對大鼠胰島微血管密度及胰島功能的影響米葛龍菲，張繼佳，霍靈恩，張景益，馬夢瑾，田晨光鄭州大學第二附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科，干部病房(鄭州450014)【摘要】目的探討高血壓對大鼠胰島微血管以及胰島功能的影響，從而為糖尿病的發(fā)病原因以及治療探索新思路。方法12周及24周SPF級SHR大鼠、Wistar大鼠各10只，分為4組(每組1O只)。各組大鼠均行靜脈糖耐量試驗及靜脈胰島

2、素釋放試驗，并取胰腺組織行HE染色、免疫組織化學染色觀察胰島形態(tài)、微血管密度，并計算相對胰島素含量。結果靜脈糖耐量試驗5、10、30min，同周齡組SHR大鼠的血糖均高于Wistar大鼠，SHR大鼠胰島素分泌高峰延遲，10min開始，Wistar大鼠胰島素分泌量下降較同周齡組SHR大鼠快，差異有統(tǒng)計學意義(P<0．05)。HE染色，Wistar大鼠胰島結構清晰，形態(tài)無異常，SHR大鼠胰島增大伴內(nèi)部出血。微血管密度方面。同周齡組SHR大鼠陽性區(qū)域光密度明顯高于Wistar大鼠，差異有統(tǒng)計學意義(P<0．

3、05)。結論高血壓導致胰島微血管密度下降，并影響胰島功能，尤其影響胰島素第一時相的分泌，其可能與微循環(huán)障礙導致的胰島素釋放功能障礙相關?！娟P鍵詞】高血壓；胰島微血管密度；胰島功能一直以來關于糖尿病合并高血壓發(fā)病機制的研究照周齡不同各分為12周齡組和24周齡組兩組，12周未曾中斷，比較公認的機制有以下幾種：胰島素抵抗、齡組SHR大鼠和Wistar大鼠體重為300～350g，24周內(nèi)皮功能失調、鈉潴留以及交感神經(jīng)的興奮。然而，隨齡組SHR大鼠和Wistar大鼠體重為400～500g。飼養(yǎng)著1991年，胰腺

4、腺泡細胞中血管緊張素(Ang)1a／lb、環(huán)境溫度為20～25c《=，相對濕度45．65％，晝夜時間比Ang11、腎素在內(nèi)的。腎素一血管緊張素系統(tǒng)(RAS)成員控制為1：1，自由攝食，自由飲水。適應性喂養(yǎng)1周后mRNA表達的檢出，血管緊張素原和血管緊張素轉換開始實驗。酶在胰腺AR42J細胞系中的發(fā)現(xiàn)，高血壓對胰島1．3．2動物模型的制作和取材大鼠禁食不禁水12h功能的影響也漸漸受到重視。高血壓會使氧化應激增以后，10％水合氯醛腹腔注射麻醉(300mg／kg)，之后強，引起胰島組織損傷以及多種功能失調。

5、2013年行頸動脈和股靜脈插管術，按照1g／kg的劑量由股靜1～2月本實驗選擇測量自發(fā)性高血壓大鼠(SHR大鼠)脈導管注射500g／L葡萄糖注射液，并于注射前(0min)微血管密度來評價微循環(huán)功能，目的在于從結構形態(tài)上以及注射后5、10、30、60min由頸動脈取血1mL，使用探討高血壓對胰島微血管以及胰島功能的影響，從而為葡萄糖氧化酶法測定血糖；使用放射免疫法測定血清糖尿病的發(fā)病原因以及治療方面的研究探索新思路。胰島素，隨后，立即剪取胰腺，使用生理鹽水沖洗4次1材料與方法后，取小塊胰腺尾部組織，標本

6、置于10％甲醛溶液中固定，待做組織切片，HE染色光鏡下觀察胰島組織病1．1實驗動物10只12周齡雄性SHR大鼠，體重理學形態(tài)。300～350g；10只24周齡雄性SHR大鼠，體重400～1．3．3胰島素表達的測定免疫組化法檢測胰島中500g；10只12周齡雄性Wistar大鼠，體重300～350g；胰島素的表達，圖片采用BiosensDigitalImagingSystem10只24周齡雄性Wistar大鼠，體重400～500g。由北v1．6圖像分析軟件進行圖像分析。結果以光密度值京維通利華實驗動物技

7、術有限公司提供。表示。1．2主要藥品及儀器CD34鼠單克隆抗體試劑盒、1．3．4胰島微血管密度的測定采用CD34分子對血胰島素鼠單克隆抗體試劑盒(美國SantaCruz)；管內(nèi)皮細胞進行免疫組化染色，每個標本做5張非連SP9002試劑盒、DAB試劑盒(北京中杉生物工程公續(xù)切片，每張切片隨機選取3～5個胰島，由兩名病理專司)；胰島素放免試劑盒(天津協(xié)和生物科技發(fā)展有限業(yè)人員獨立計數(shù)，并除以相應胰島面積，取其平均值。公司)；PBS緩沖液(鄭州鼎國生物技術有限公司)。1．4統(tǒng)計學方法采用SPSS17．0統(tǒng)計

8、軟件，組問比RBP一1型大鼠血壓計(中日友好臨床醫(yī)學研究所)。較采用單因素方差分析(one—wayANOVA)，組間兩兩1．3實驗方法比較用最小顯著性差異(LSD)法。1．3．1動物分組和飼養(yǎng)SHR大鼠和Wistar大鼠，按2結果2．1各組大鼠一般指標比較相同周齡組SHR大鼠河南省醫(yī)學科技攻關計劃項目(編號：2o13o3o78)△通信作者。博士，教授；E～mail：chgtian@sohu．corn，tcg90123@與Wistar大鼠相比較，體重差異無