順鉑誘導SPC-A1人肺腺癌細胞凋亡過程中miR-27a的表達及意義-論文.pdf

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1、第33卷第7期南京醫(yī)科大學學報(自然科學版)2013年7月ACTAUNIVERSITATISMEDICINALISNANJING(NaturalScience)·873·順鉑誘導SPC.A1人肺腺癌細胞凋亡過程中miR.27a的表達及意義朱善軍,韓月,徐娟,謝而付,陳丹,張美娟,張燕,婁鑒芳,曹艷,許雨喬,孫瑞紅,王芳,潘世揚(南京醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院檢驗學部,國家臨床檢驗重點專科,江蘇南京210029)[摘要]目的:檢測miR.27a在順鉑(DDP)體外誘導人肺腺癌細胞株SPC—A1凋亡過程中的表達變化,探討其與細胞凋亡之間的相關性及其檢測的臨床意義。方法:體外培養(yǎng)

2、SPC.A1細胞。實驗組加入終濃度為2.5Ixg/mlDDP,同時設置不加DDP的對照組。觀察12、24、48和72h后顯微鏡下細胞形態(tài)學變化,流式細胞術檢測細胞凋亡率,rea1.timePCR檢測培養(yǎng)上清液中和SPC.A1細胞內miR一27a的表達變化。結果:DDP(2.5b~g/m1)組SPC.A1細胞形態(tài)呈凋亡改變,在48和72h凋亡率分別為(59.3±2.5)%和(76.4-4-3.1)%,均顯著高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。DDP(2.5p~g/m1)組培養(yǎng)上清液中和SPC—A1細胞內miR.27a含量在24、48和72h均顯著高于對照組,差

3、異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。DDP(2.5p~g/m1)組培養(yǎng)上清液中miR.27a含量在12、24、48和72h逐漸升高,兩兩比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結論:miR.27a在DDP誘導的SPC—A1細胞凋亡中表達升高,提示其可能參與細胞凋亡調控;對miR.27a進行定量檢測有望用于對肺腺癌化療療效的評估。[關鍵詞]順鉑;肺癌SPC—A1;細胞凋亡;miR.27a[中圖分類號]Q786[文獻標志碼]A[文章編號]1007.4368(2013)07.873.04doi:10.7655/NYDXBN$20130703Expressionchangesan

4、dsignificanceofmiR一27aincisplatin-inducedapoptosisofhumanlungadenocarcinomacelIlineSPC-A1ZhuShanjun,HanYue,XuJuan,XieErfu,ChenDan,ZhangMeijuan,ZhangYan,LouJianfang,CaoYan,XuYuqiao,SunRuihong,WangFang,PanShiyang(DepartmentofLaboratoryMedicine,theFirstAffiliatedHospitalofNJMU,NationalKeyC

5、linicalDepartmentofLaboratoryMedicine,Nanjing210029,China)[Abstract]Objective:ToinvestigatetheexpressionchangesofmiR一27ainhumanlungadenocarcinomacelllineSPC-A1aftercisplatinchemotherapyinvirto,andtodiscussitsrelationshipwithcellapoptosisandclinicalsignificance.Methods:SPC-A1cellswerecul

6、turedinvitroandtreatedwithDDPat2.5g/mlfor12,24,48and72h.Cellmorphologywasobservedbyphasecontrastmicroscope,aswellascellapoptosiswasdetectedbyflowcytometry;expressionchangesofmiR一27abothinculturalsupernatantsandSPC-A1cellswereanalyzedbyreal—timePCR.Results:SPC-A1cellsshowedmorphologicalc

7、hangesofapoptosisintheDDP(2.5m1)group.TheapoptoticratesofSPC—A1cellsat48and72hintheDDP(2.5m1)group[(59.3±2.5)%and(76.4±3.1)%,respectively]werehigherthanthatinthecontrolgroup(P<0.05).PCRanalysisdemonstratedthatthelevelsofmiR一27aweresignificantlyincreasedintheDDP(2.5g/m1)groupbot

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