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《地塞米松對(duì)順鉑誘導(dǎo)人肺腺癌細(xì)胞株凋亡的抑制作用及其機(jī)制-論文.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、四川大學(xué)學(xué)醫(yī)學(xué)版di)2013；44(6)：902-906JSichuanUniv(MedSciEd)’地塞米松對(duì)順鉑誘導(dǎo)人肺腺癌細(xì)胞株凋亡的抑制作用及其機(jī)制*曹菲，張智慧△，吳萍，李力，黃建鳴四JII省腫瘤醫(yī)院腫瘤內(nèi)科(成都610041)【摘要】目的研究地塞米松(Dex)對(duì)順鉑(CDDP)引起的人肺腺癌細(xì)胞株SPCA／I凋亡的抑制作用及其分子機(jī)制探討。方法體外培養(yǎng)SPCA／I細(xì)胞，分別加入不同濃度Dex培養(yǎng)24h后，加人不同濃度CDDP繼續(xù)培養(yǎng)48h，采用二甲基溴化四氮唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)細(xì)胞存活率；流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡；用1／,mo
2、l／IDex刺激SPCA／I細(xì)胞，分別于lh、2h、4h、6h、12h采用RT—PCR技術(shù)，檢測(cè)SPCA／I細(xì)胞中糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的蛋白激酶1基因(SGK一1)和絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶l(MKP—1)基因的表達(dá)；用生物素標(biāo)記的抗糖皮質(zhì)激素受體(GR)抗體對(duì)SPCA／I細(xì)胞中GR行細(xì)胞免疫組化檢測(cè)。結(jié)果sPcA／I細(xì)胞經(jīng)Dex刺激后，對(duì)CDDP所致的抑制細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡呈抵抗作用(P<0．05)。Dex刺激后的SPCA／1細(xì)胞表達(dá)SGK一1上調(diào)，在12h時(shí)表達(dá)達(dá)高峰，未檢測(cè)到MKP一1表達(dá)；細(xì)胞免疫組化顯示SPCA／I細(xì)胞經(jīng)Dex刺激后GR表
3、達(dá)上調(diào)，細(xì)胞內(nèi)GR數(shù)目高于對(duì)照組(P<0．05)。結(jié)論體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，Dex對(duì)CDDP引起的SPCA／I細(xì)胞凋亡有抑制作用。其分子機(jī)理可能是通過(guò)上調(diào)細(xì)胞內(nèi)GR數(shù)目，增強(qiáng)通路下游SGK1的表達(dá)，從而產(chǎn)生抗凋亡作用?！娟P(guān)鍵詞】地塞米松肺癌順鉑凋亡PreliminaryStudyofApoptoticInhibitionandItsMolecularMechanismofDexamethasoneonCisplatin—inducedHumanLungAdenocarcinomaCellLineSPCA／ICA0Fei，ZHANGZhi—hu
4、i，UPing，LILi，HUANGJiang—ming．DepartmentoJ’MedicalOncology，SichuanProvincialCancerHospitalandInstitute，Chengdu61004l，China△Correspondingauthor，E—mai1：13881889731@139．com[Abstract]ObjectiveTostudytheapoptoticinhibitionanditsmolecularmechanismofdexamethasone(Dex)oncisplatin(
5、CDDP)一inducedhuman1ungadenoearcinomacells．MethodsThehumanlungadenocarcinomacellline，SPCA／I，waspre-culturedinvitrofor24hourswithDexindifferentconcentrationandthendifferentconcentrationofCDDPwasadded．Thecellswereculturedforanother48hours．Thesurviva1rateofthecellswasdetermin
6、edbyMTTcolorimetry．TheappototicrateofSPCA／Icellsmeasuredbyflowcytometer．Usinglumol／IDextostimulatetheSPCA／IcellsRNAsofthecellsatdifferenttimepoints(1h，2h，4h，6h，12h)wereextractedrespective1y．Semi—quantitativeRT_PCRtechnologywasusedtodetecttheexpressionoftheserumandglucocor
7、ticoid—inducedkinase(SGK一1)andmitogen—activatedproteinkinasephosphatase一1(MKP一1)inSPCA／Icells．Simultaneouslytheglucocorticoidreceptor(GR)oftheSPCA／Icelllinecellsweremeasuredbyusingbiotin-labeledanti—glucocorticoidreceptorantibodywithimmunohistochemistryassay．ResultsSPCA／I
8、cellsshowedresistancetoCDDP—。inducedapoptosiswhilepre—。culturedwithDexandtheresistanceintensityw
