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《XAF1基因?qū)樸K誘導(dǎo)肺腺癌A549細(xì)胞凋亡作用的研究-論文.pdf》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、中華腫瘤防治雜志20l3年1O月第2O卷第19期CHINJCANCERPREVTREAT,October2013,Vo1.20No.19·1499·《實(shí)驗(yàn)研究/論著lXAF1基因?qū)樸K誘導(dǎo)肺腺癌A549細(xì)胞凋亡作用的研究朱傳東王禮學(xué)郭晶晶耿杰徐瀚峰張全安鄭勤東南大學(xué)附屬第二醫(yī)院腫瘤科,江蘇南京210003【摘要】目的:通過(guò)順鉑誘導(dǎo)人肺腺癌細(xì)胞A549的凋亡,研究X染色體連鎖凋亡抑制蛋白相關(guān)因子1(X—linkedinhibi—torofapoptosisproteinassociatedfactor-1,XAF1)基因在A549細(xì)胞中的表達(dá)情況,初步探討
2、該基因在凋亡中的作用。方法:采用4~g/mL濃度的順鉑處理A549細(xì)胞,MTT法檢測(cè)細(xì)胞的增殖抑制率;AnnexinV/7一AAD檢測(cè)A549細(xì)胞凋亡情況;RT—PCR和蛋白質(zhì)印跡法分別檢測(cè)A549凋亡后XAF1mRNA和蛋白的表達(dá);Caspase一3試劑盒檢測(cè)A549細(xì)胞凋亡后Caspase一3的活性。結(jié)果:用4fg/mL濃度順鉑處理A549細(xì)胞2、l2和24h后,A549細(xì)胞增殖抑制率分別為(3.4O±0.65)、(8.31±0.73)和(14.724-0.24),與對(duì)照組(1.O3士0.28)相比均明顯增高,P值分別為0.004、0.000和0.0
3、00,細(xì)胞增殖抑制率隨時(shí)間增加而增強(qiáng);A549細(xì)胞凋亡率分別為(4.35±0.95)、(9.69±2.60)和(22.35±1.24),與對(duì)照組(1.394-0.21)相比均明顯增加,P值分別為0.006、0.005和0.000,細(xì)胞凋亡率隨順鉑作用時(shí)間延長(zhǎng)而增加;實(shí)驗(yàn)組xAF1mRNA表達(dá)水平分別為(0.199±0.029)、(0.654±0.093)和(1.216-4_-0.101),對(duì)照組為(0.091±0.020),XAF1mRNA表達(dá)水平隨作用時(shí)間的延長(zhǎng)呈增加趨勢(shì),P值分別為0.006、0.001和0.000;實(shí)驗(yàn)組xAF1蛋白表達(dá)水平分別為(
4、0.322±0.041)、(0.508±0.014)和(0.901土0.014),對(duì)照組為(0.124±0.007),XAF1蛋白表達(dá)水平隨作用時(shí)間的延長(zhǎng)呈增加趨勢(shì),P值分別為0.001、0.000和0.000;C~tspase一3活性(A405nm)分別為(34.745±3.781)、(69.524±3.096)和(94.787±5.429),對(duì)照組為(21.914±1.962),Caspase一3活性隨順鉑作用時(shí)間的延長(zhǎng)而增加。結(jié)論:順鉑誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡可以引起XAF1表達(dá)增加,且隨細(xì)胞凋亡水平的提高而增加,提示XAF1可能參與順鉑誘導(dǎo)人肺腺癌A
5、549細(xì)胞的凋亡過(guò)程?!娟P(guān)鍵詞】肺腫瘤;順鉑;A549細(xì)胞;X染色體連鎖凋亡抑制蛋白相關(guān)因子1;細(xì)胞凋亡;印跡法,蛋白質(zhì)中華腫瘤防治雜志,2013,20(19):1499一l502EffectofXAF1geneonlungadenocarcinomaA549cellapoptosisinducedbycisplatinZHUChuan—dong,WANGLi—xue,GUOJing—jing,GENGJie,XUHan—feng,ZHANGQuan—an,ZHENGQinDepartmentofOncology,SecondHospitalAffili
6、atedtoSoutheastUniversity,Nanjing210003,P.R.China[-ABSTRACT]OBJECTIVE:BasedontheapoptosisprocessofA549cellsinducedbycisplatin,weresearchedtheexpres—sionandfunctionsoftheXAF1gene.METHODS:TheproliferationinhibitionrateafterA549cellstreatedwiththecispla—tinof4fg/mLwasdetectedbyMTT.T
7、heA549cellapoptosiswasdetectedbyAnnexinV/7一AAD.TheXAF1mRNAandproteinexpressionwasmonitoredbytheRT—PCRandwesternblotting.TheCaspase一3activityinapoptoticA549cellswasdetectedbytheCaspase一3assay.RESULTS:Thecellproliferationinhibitionrateincreasedwiththecisplatintreatingduration.Thece
8、l1proliferationinhibitionratesoftheexper