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《XAF1基因?qū)樸K誘導(dǎo)肺腺癌A549細(xì)胞凋亡作用的研究-論文.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、中華腫瘤防治雜志20l3年1O月第2O卷第19期CHINJCANCERPREVTREAT，October2013，Vo1．20No．19·1499·《實驗研究／論著lXAF1基因?qū)樸K誘導(dǎo)肺腺癌A549細(xì)胞凋亡作用的研究朱傳東王禮學(xué)郭晶晶耿杰徐瀚峰張全安鄭勤東南大學(xué)附屬第二醫(yī)院腫瘤科，江蘇南京210003【摘要】目的：通過順鉑誘導(dǎo)人肺腺癌細(xì)胞A549的凋亡，研究X染色體連鎖凋亡抑制蛋白相關(guān)因子1(X—linkedinhibi—torofapoptosisproteinassociatedfactor-1，XAF1)基因在A549細(xì)胞中的表達(dá)情況，初步探討
2、該基因在凋亡中的作用。方法：采用4~g／mL濃度的順鉑處理A549細(xì)胞，MTT法檢測細(xì)胞的增殖抑制率；AnnexinV／7一AAD檢測A549細(xì)胞凋亡情況；RT—PCR和蛋白質(zhì)印跡法分別檢測A549凋亡后XAF1mRNA和蛋白的表達(dá)；Caspase一3試劑盒檢測A549細(xì)胞凋亡后Caspase一3的活性。結(jié)果：用4fg／mL濃度順鉑處理A549細(xì)胞2、l2和24h后，A549細(xì)胞增殖抑制率分別為(3．4O±0．65)、(8．31±0．73)和(14．724-0．24)，與對照組(1．O3士0．28)相比均明顯增高，P值分別為0．004、0．000和0．0
3、00，細(xì)胞增殖抑制率隨時間增加而增強(qiáng)；A549細(xì)胞凋亡率分別為(4．35±0．95)、(9．69±2．60)和(22．35±1．24)，與對照組(1．394-0．21)相比均明顯增加，P值分別為0．006、0．005和0．000，細(xì)胞凋亡率隨順鉑作用時間延長而增加；實驗組xAF1mRNA表達(dá)水平分別為(0．199±0．029)、(0．654±0．093)和(1．216-4_-0．101)，對照組為(0．091±0．020)，XAF1mRNA表達(dá)水平隨作用時間的延長呈增加趨勢，P值分別為0．006、0．001和0．000；實驗組xAF1蛋白表達(dá)水平分別為(
4、0．322±0．041)、(0．508±0．014)和(0．901土0．014)，對照組為(0．124±0．007)，XAF1蛋白表達(dá)水平隨作用時間的延長呈增加趨勢，P值分別為0．001、0．000和0．000；C~tspase一3活性(A405nm)分別為(34．745±3．781)、(69．524±3．096)和(94．787±5．429)，對照組為(21．914±1．962)，Caspase一3活性隨順鉑作用時間的延長而增加。結(jié)論：順鉑誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡可以引起XAF1表達(dá)增加，且隨細(xì)胞凋亡水平的提高而增加，提示XAF1可能參與順鉑誘導(dǎo)人肺腺癌A
5、549細(xì)胞的凋亡過程。【關(guān)鍵詞】肺腫瘤；順鉑；A549細(xì)胞；X染色體連鎖凋亡抑制蛋白相關(guān)因子1；細(xì)胞凋亡；印跡法，蛋白質(zhì)中華腫瘤防治雜志，2013，20(19)：1499一l502EffectofXAF1geneonlungadenocarcinomaA549cellapoptosisinducedbycisplatinZHUChuan—dong，WANGLi—xue，GUOJing—jing，GENGJie，XUHan—feng，ZHANGQuan—an，ZHENGQinDepartmentofOncology，SecondHospitalAffili
6、atedtoSoutheastUniversity，Nanjing210003，P．R．China[-ABSTRACT]OBJECTIVE：BasedontheapoptosisprocessofA549cellsinducedbycisplatin，weresearchedtheexpres—sionandfunctionsoftheXAF1gene．METHODS：TheproliferationinhibitionrateafterA549cellstreatedwiththecispla—tinof4fg／mLwasdetectedbyMTT．T
7、heA549cellapoptosiswasdetectedbyAnnexinV／7一AAD．TheXAF1mRNAandproteinexpressionwasmonitoredbytheRT—PCRandwesternblotting．TheCaspase一3activityinapoptoticA549cellswasdetectedbytheCaspase一3assay．RESULTS：Thecellproliferationinhibitionrateincreasedwiththecisplatintreatingduration．Thece
8、l1proliferationinhibitionratesoftheexper
