轉(zhuǎn)染 PDCD5質(zhì)粒促進(jìn)順鉑誘導(dǎo) A549細(xì)胞凋亡作用的研究-論文.pdf

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1、重慶醫(yī)學(xué)2014年9月第43卷第26期3449論著·基礎(chǔ)研究doi:10.3969/j.issn.1671—8348.2014.26.015轉(zhuǎn)染PDCD5質(zhì)粒促進(jìn)順鉑誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡作用的研究戴玲麗,梅同華,張明川。(1.南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科,南昌330006;2.重慶市銅梁縣人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科402560)摘要:目的觀察程序化死亡因子5(PDCD5)基因聯(lián)合順鉑誘導(dǎo)人肺腺癌A549細(xì)胞凋亡的作用,探索其可能機(jī)制。方法利用脂質(zhì)體瞬時(shí)轉(zhuǎn)染PDCD5重組質(zhì)粒入A549細(xì)胞,RT-PCR檢測(cè)其轉(zhuǎn)染效率。Westernblot檢測(cè)轉(zhuǎn)染后PDCD5、Bcl-2和Survivin蛋白表達(dá)情況。

2、MTT法及流式細(xì)胞儀檢測(cè)PDCD5單藥和聯(lián)合順鉑后的細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果PDCD5重組質(zhì)粒成功轉(zhuǎn)染入A549細(xì)胞,Westernbolt結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒組中PDCD5蛋白表達(dá)高于空白對(duì)照組及轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組,Bcl一2和Survivin蛋白則低于空白對(duì)照組及轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。MTT及流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒組較空白對(duì)照組及轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組細(xì)胞凋亡率高(P

3、4)26-3449-03TransfectionofPDCD5plasmidforpromotingcisplatin-inducedA549cellsapoptosisDaiLingli,MeiTqnghua1ix,ZhangMingchuan。(1.DepartmentofRespiration,F(xiàn)irstA,liatedHospital,SchoolofMedicine,NanchangUniversity,Nanchang,Jiangxi330006,China;2.DepartmentofRespiration,TongliangCountyPeoplesHospital,Chon

4、gqing402560,China)Abstract:ObjectiveToobservetheroleofprogrammedcelldeath5(PDCD5)genecombinedwithcisplatinforinducingtheap—optosisofhumanlungadenocarcinomaA549cellsandtoinvestigateitspossiblemechanism.MethodsThePDCD5recombinantplas—midwastransientlytransfeetedintoA549cellsbylipofectamine.Itstransfe

5、ctionefficiencywasdetectedbyRT-PCR.TheexpressionsoftrasfectedPDCD5protein.Bcl-2andSurvivinproteinwereexaminedbyWesternbolt.TheapoptosisofA549cellsbysinglePDCD5anditscombinationwithcisplatinwasmeasuredbytheMTTmethodandtheflowcytometry.ResultsPDCD5recombinantplasmidwastransfectintoA549cellssuccessful

6、ly.TheWesternblotresultsshowedthattheexpressionofPDCD5proteininthetransfectionrecombinantplasmidgroupwashigherthanthatintheblankcontrolgroupandthetransfectionemptyplasmidgroup,whiletheexpres—sionofBcl_2andSurvivinproteinwaslowerthanthatintheothertwogroups,thedifferencewasstatisticallysignificant(P<

7、0.05).TheMTTandflowcytometryresultsdemonstratedthatthecellapoptosisrateinthetransfectionrecombinantplasmidgroupwashigherthanthatintheblankcontrolgroupandthetransfectionemptyplasmidgroup(P<0.05).ConclusionPD

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