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《脂肪酶產生菌的篩選_誘變及產酶條件的研究.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、菩醫(yī),第卷第期大學學報年月由以】羅戈脂肪酶產生菌的篩選、誘變及產酶條件的研究張勝利衰鴻娜陳貴連獸醫(yī)大學公共衛(wèi)生系握要從長春市油脂廠采集的土城樣品中分離到株脂肪醉活力較高的白地祥邊其發(fā)醉液醉活力為,經縈外線、、、亞稍基呱等誘變篩選后,功以此為出發(fā)菌株扳化愧鹽酸經胺獲得株高活力脂肪,醉產生菌刃其發(fā)醉液醉活力達助對誘變株為最適培養(yǎng)條件的研究表明其最適培養(yǎng)基組,山梁醉乃,橄樁,·,成為硯白肺油住姿川產醉最適發(fā)陣條件是堵養(yǎng)濃起始聲為氏發(fā)薄沮度為湯為,,幼℃通氣為每印扣三角燒瓶中盛培養(yǎng)滾閱匕發(fā)醉時間為艾,在,功山抽最適培養(yǎng)條件下其發(fā)薄液醉活力可達到白地為的發(fā)酵液
2、經硫酸按鹽析制得脂助醉粗側,,,在晶它在旅乙烯醉橄欖油乳化液系統(tǒng)中水解橄欖油的最適聲為氏最適溫度為℃礴、℃下存放潤及、旬℃下保沮,醉活力不變州聲如關扭詞脂肪醉白地醉活力醉性質培養(yǎng)條件誘變脂肪醉是一種重要的培養(yǎng)基從,工業(yè)生產酶類尹我國脂肪醉產醉菌種的選育及醉生產、酶,,,性質和醉應用等方面的研究還十分落后橄欖油調至左右,,目前脂肪醉的產生菌僅局限于解脂假絲醉培養(yǎng)基組成同培養(yǎng)基僅調母、擴展青稱、阿氏假囊醉母等少數幾種菌嘆至左右,我們進行培養(yǎng)基察氏瓊脂培養(yǎng)基為此了本研究其目的在于從自,然界中篩選優(yōu)良的脂肪醉產生菌再培養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基通過人工誘變提高其產醉
3、能力,為以培養(yǎng)基魚脈,,后大規(guī)模生產脂肪醉提供優(yōu)良菌種同時對其產醉凡,夠‘殘,橄最適培養(yǎng)條件和醉的一般性質進行了初步欖油,研究為脂肪醉的生產和應用提供一些理論培養(yǎng)基蛋白脈或魚膝,。,,勸依據尹線夠·乓’橄欖油材料與方法培養(yǎng)基姐月,尹,礴·,夢幻橄欖油材料樣品從長春市肉聯(lián)廠、油脂廠、乳方法制品加工廠等的污泥、廢水、土典和長白山、去菌種篩選按以下步驟進行通化兩地的腐植質土壤中采集樣品份液體富集將少樣品加人盛有培養(yǎng)墓、,℃培養(yǎng)培養(yǎng)基的試管中,,,,本文收到日期夕筑一’一仍培養(yǎng)液渾濁表面有菌絲時移人第管連、、,續(xù)富集次將最后富集的菌移接到培養(yǎng)源誘導物無機鹽離
4、子等發(fā)醉培養(yǎng)試驗、、基和培養(yǎng)基上分離純化從而選出誘變株脂肪酶生產的最適氮源初篩取新鮮斜面上的抱子和細菌碳源、誘導物、無機鹽離子然后將這些對一,酶活力影響較強的因素用正交表試,安環(huán)轉接到盛有培養(yǎng)基的試管內,,℃下培養(yǎng)培養(yǎng)液倒人平皿靜止排一組試驗從而確定各顯著因子的最佳水,培養(yǎng),最后加人的平即得其最適培養(yǎng)基再用最適培養(yǎng)鑒作】磷酸鹽緩沖液用透明發(fā)醉液起始、發(fā)酵溫度、發(fā)醉時間及通,,圈平板法測定其酶的活力再選透明圈大而氣量的試驗確定誘變株生產脂肪酶的最適清晰的菌株進行復篩培養(yǎng)條件復篩于三角燒瓶中加人硫酸按鹽析及脫鹽酶液制各取誘,,,培養(yǎng)基工于℃下印旋變株培養(yǎng)
5、發(fā)醉液加冷凍離心轉培養(yǎng)權按過尹的方法測定發(fā)酵巧而氏上清液中加飽和度為的硫酸鉸,洲脂肪酶活力鹽析過夜而冰凍離心為,誘變育種網按以下次序進行沉淀,溶于適量蒸餾水中在的紫外線處理取抱子懸液注】磷酸鹽緩沖液中透析至無人培養(yǎng)皿中,用的紫外線燈照射‘,該硫酸按脫鹽酶液用弓訓臺肪酶一般,不同時間并在下處理性質的研究,處理后抱子懸液經不同倍數稀釋在℃脂肪酶一般性質的研究用不同,,,下于培養(yǎng)基上培養(yǎng)計算致死率值的緩沖液按照酶活力測定方法,以確定脂肪酶的并對變異菌株進行篩選測定最適用抓化握處理將的的磷酸鹽緩沖液在不同溫度下測定脂肪酶,以確定脂肪酶作用抓化鏗加人到冷至印℃
6、的洋白活力的最適溫度,,菜培養(yǎng)基中用紫外線誘變株抱子懸液用不同緩沖液與醉液混勻后分別,,℃,涂皿即在菌的生長過程中處理下培在℃和℃下存放權測定酶活力養(yǎng),挑選變異菌株計算酶失活率,以確定脂訪酶的穩(wěn)定性,鹽酸經胺處理將眾并使酶液與的磷酸鹽緩沖液在不同的鹽截經胺加人到用級沖液配制的培養(yǎng)基溫度下保持而幾取出立即冰浴后測定醉,,,中用敘化銼誘變株抱子懸液涂皿培養(yǎng)活力以確定酶的熱毯定性挑選變異藺株。結果亞硝基孤處理用丙酮溶解的亞硝基孤作用于以的】磷酸菌種蹄選和鑒定從份樣品中共,鹽級沖液配制的鹽酸輕胺誘變株抱子懸液分離到株菌有脂肪酶活力初篩后得并使最終濃度分別為的
7、“留從,脂肪酶活力較高的真菌株經復篩后得在℃下靜止處理印而幾取不同株脂肪酶活力較高且穩(wěn)定的真菌菌株,編號稀釋度在培養(yǎng)基上劃線培養(yǎng),選變異菌為,其發(fā)醉液醉活力為株。根據該菌株的形態(tài)特征和生理生化特幾幼誘變株最適培養(yǎng)條件的選擇閻以培,,性并經中國科學院微生物研究所鑒定刀,、并‘姐為基礎培養(yǎng)基進行了不同氮源碳菌屬于半知菌綱、叢梗抱目、叢梗抱科、地盆屬的白地霉“心它燦朔翻加以四,加宜通氣量以三角燒瓶中裝培養(yǎng)液為宜在此條件,下?lián)u瓶培養(yǎng)白地稼,白地犯的誘變選育白地霉其脂肪醉活力可達經紫外線次,照射后其酶活力達‘幻紫外線誘變效果最佳條件為照去脂肪醉的一般性質該醉作
8、用的最適射距離、照射時間為民最適溫度為℃該醉在再經抓化理誘變處理后,得到的變異株時℃下存放嘆仍保留醉活的酶活
