海南島象耳豆根結線蟲的種類鑒定及其rDNA-ITS序列分析-論文.pdf

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1、生物安全學報2012,21(1):79—84J0URNALOFBIOSAFETYhttp//.jbscn.org海南島象耳豆根結線蟲的種類鑒定及其rDNA-ITS序列分析符美英,芮凱,肖彤斌,黃偉明,陳綿才海南省農業(yè)科學院農業(yè)環(huán)境與植物保護研究所,海南省植物病蟲害防控重點實驗室,海南???71100摘要:【背景】植物根結線蟲病是世界性分布的土傳病害,常造成農作物的重大經濟損失。目前分布于熱帶亞熱帶區(qū)域的象耳豆根結線蟲,由于其致病性和分子特征以及與植物互作關系的獨特性,被認為是一種對農作物具有潛在危害性的重要病原根結線蟲,因而引起國

2、內外植物寄生線蟲學者的廣泛關注?!痉椒ā坑眯螒B(tài)學、同工酶技術和分子生物學技術相結合的方法,對從海南島農作物上采集到的10個根結線蟲純化種群進行分類鑒定?!窘Y果】象耳豆根結線蟲在海南島大面積栽培的l0種農作物和南藥植物,包括黃瓜、南瓜、苦瓜、絲瓜、葫蘆瓜、辣椒、番石榴、海巴戟、沈香和丁香上均有寄生,其形態(tài)學、酯酶表型和mtDNA-PCR擴增產物均有別于常見的根結線蟲種類;用引物18S和28S擴增象耳豆根結線蟲種群的rDNA—ITS區(qū)序列,并對其進行克隆、測序和比對分析,結果表明,象耳豆根結線蟲4HBJ種群分別與南方根結線蟲、爪哇根結

3、線蟲和花生根結線蟲的同源性均僅為88%左右?!窘Y論與意義】本文準確鑒定了象耳豆根結線蟲,首次闡述其對海南島多種農作物的致害性;闡釋了象耳豆根結線蟲的形態(tài)和分子特征,并明確了其與3種常見根結線蟲的系統(tǒng)發(fā)育關系。本研究對今后進一步開展象耳豆根結線蟲的基礎研究和防治工作具有重要參考價值。關鍵詞:象耳豆根結線蟲;鑒定;rDNA—ITSIdentificationandanalysisOfrDNA.ITSOfthenematodeMeloidogynee仃terolobiiOnHainanlsland.ChinaMei—yingFU,Kai

4、RUI,Tong-binXIAO,Wei-mingHUANG,Mian—caiCHENHainanKeyLaboratoryforControlofPlantDiseasesandInsectPests,InstituteofEnvironment&PlantProtection,HainanAcademyofAgriculturalSciences,Haikou,Hainan571100,ChinaAbstract:【Background】ThePlantroot-knotnematodedisease(Meloidogynes

5、pp.)isasoil—bornepestandmaycausegreateco—nomiclosses.AsM.enterolobiiisdistributedwidelyinthetropicalandsubtropicalregions.andisapotentiallyharmfulpathogenicroot—knotnematodeforseveralcultivatedcrops,itisthesubjectofintensivestudyaroundtheworld,basedonitspeculiarityofp

6、ath—ogenicity,molecularcharacteristicsandinteractionwithplants.【Method】Tenpurifiedpopulationsofroot-knotnematodescollectedfromHainanProvince,SouthernChina,wereidentifiedbyusingthemorphological,isozymeandmolecularbiologicalmethods.【Result】Thepresenceofenterolobiiwascon

7、firmedO1"110cuhivatedcropsandherbs,includingascucumber,pumpkin,balsampear,loofab,bottlegourd,pepper,guava,cloveandtheherbsMorindacitrifolia,andExcoecariaagallocha.Itsmorphology,ester-asephenotypeandmtDNA—PCRamplificationproductsweredifferentfromthecommonspeciesofrootk

8、notnematodes.Primers18Sand28SwereusedtoamplifytherDNA—ITSregionofenterolobiiandpopulation4HBJwerecloned.sequencedandcompared

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