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《沙門菌屬stn基因LAMP在食品衛(wèi)生檢驗中的應(yīng)用.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、·預(yù)防醫(yī)學(xué)·中國現(xiàn)代醫(yī)生2014年4月第52卷第12期沙門菌屬stn基因LAMP在食品衛(wèi)生檢驗中的應(yīng)用王勝啟馬艷艷李。靜張勤河南出入境檢驗檢疫局保健中心，河南鄭州450003【摘要】目的評價LAMP在食品衛(wèi)生沙門菌屬檢驗中的應(yīng)用效果。方法選擇145份食品標本，采用LAMP方法和分離培養(yǎng)法進行檢測，比較兩種檢測方法的陽性率。結(jié)果LAMP陽性率為12．4％，分離培養(yǎng)法陽性率為6．2％。兩種方法比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義<0．05)。兩種方法的陽性符合率為77．8％，陰性符合率為91．9％。結(jié)論LAMP法用于食品衛(wèi)生沙門菌屬的檢驗，具有快速、方便、陽性率高等優(yōu)點?！娟P(guān)鍵詞】沙門茵屬；環(huán)介導(dǎo)等溫擴增；分
2、離培養(yǎng)；食品衛(wèi)生檢驗【中圖分類號】R155．5[文獻標識碼】B【文章編號】1673—9701(2014)12一O114—02ApplicationofsalmonellastnLAMPinsanitaryinspectionoffoodstufsWANGShengqiMAYanyanLIJingZHANGQinHenanInternationalTravelHealthCareCenter,EntryandExitInspectionandQuarantineBureauofHenanProvince，Zhengzhou450003，China【Abstract]ObjectiveToev
3、aluateapplicationofsalmonellaLAMPinsanitaryinspectionoffoodstuffs．MethodsSe—lected145foodsamplesweredetectedbyLAMPandseparatedcuhivationmethod．Positiveratewascompared．ResultsPositiverateofLAMPwas12．4％．a(chǎn)ndthatofseparatedcultivationmethodwas6．2％．Therewassignificantdifference<0．05)．Positivecoincidenc
4、erateoftwomethodswas77．8％，andnegativecoincidenceratewas91．9％．ConclusionSalmonellaLAMPforsanitaryinspectionoffoodstuffsshowsrapid，convenience，highpositiverate．【Keywords】Salmonella；LAMP；Sanitaryinspectionoffoodstuffs在世界各國的種類細菌性食物中毒中，沙門菌引1．2檢測方法起的食物中毒常列榜首[1]。我國已發(fā)現(xiàn)的血清型有2161．2．1標本前增菌將收集到的標本取25g，裝入無菌個。傳
5、統(tǒng)對沙門菌的檢測主要有分離培養(yǎng)方法，雖然均質(zhì)袋中，拍擊式均質(zhì)器拍打2rain，37℃培養(yǎng)10h。準確但是程序繁瑣，而免疫學(xué)方法的敏感度相對較冷凍食品在45℃下解凍15min。低，PCR等敏感度和特異度均較高。但是設(shè)備要求1．2．2分離培養(yǎng)法將增菌后的145份標本取1mL．較高，在基層不容易推廣應(yīng)用口一。環(huán)介導(dǎo)等溫擴增法接種于10mL的1TrB增菌液中，42％培養(yǎng)24h。另取(LAMP)是一種全新的核酸擴增方法，具有簡單、快1mL。接種于10mL的SC增菌液中，37℃培養(yǎng)24h。速、特異性強的特點[41。本研究比較環(huán)介導(dǎo)等溫擴增法分別取增菌液1環(huán)，接種于BS平板和XLD平板，檢測食品標本沙門
6、菌屬與分離培養(yǎng)法的一致性，探討37℃培養(yǎng)24h。取可疑菌落3個，接種于TSI、營養(yǎng)瓊其在食品衛(wèi)生檢驗中的應(yīng)用價值，現(xiàn)報道如下。脂平板和賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)24h。對于生化反應(yīng)初步符合沙門菌特征的，從營養(yǎng)瓊脂平1材料與方法板上取可疑菌落，生理鹽水制成菌懸液。在微生物鑒1．1一般材料定系統(tǒng)上進行分析。如果BS平板及XLD平板上無可2013年6—8月選擇145份食品標本，其中冷凍疑菌落，BS平板37℃繼續(xù)培養(yǎng)24h，如果仍無可疑菌生肉20份，生鮮肉2O份，熟肉20份，非發(fā)酵豆制品落則為陰性。20份，速凍米面20份，生水產(chǎn)品l0份，冰激凌101．2．3LAMP檢測方法取標本前增菌液1
7、mL，離心，份，沙拉10份，鮮榨果汁10份，生食類蔬菜5份。陽10000r／min，2min，棄上清，提取核酸，另取1L上性控制菌株：腸炎沙門菌。清液，制作待檢模板DNA。引物由百壹星辰(北京)生物科技有限公司提供。檢測145份標本DNA。反應(yīng)結(jié)【基金項目】國家質(zhì)檢總局科技計劃項目(2012IK227)CHINAMODERNDOCTORVo1．52No：12April2014中國現(xiàn)代醫(yī)生2014年4月第52卷第12期·預(yù)
