植物的組織培養(yǎng)技術(shù)課件.ppt

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1、第五章　植物的組織培養(yǎng)技術(shù)考綱要求三年考情植物的組織培養(yǎng)2012山東,2012江蘇,,2012浙江,2010安徽,2010廣東過程特點(diǎn)條件脫分化外植體成為愈傷組織排列疏松、高度液泡化的薄壁細(xì)胞團(tuán)呈無定形狀態(tài)離體、營養(yǎng)物質(zhì)、植物激素、其他適宜條件再分化由愈傷組織成為幼苗或胚狀體結(jié)構(gòu)有根、芽或有生根發(fā)芽的能力營養(yǎng)生長和生殖生長發(fā)育成為完整的植物體由根、芽、莖、葉、花、果實(shí)、種子組成栽培考點(diǎn)一植物組織培養(yǎng)過程及無菌操作要求1.植物組織培養(yǎng)過程2.無菌操作無菌操作對(duì)象無菌操作方式培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌外植體清水洗→

2、體積分?jǐn)?shù)70%酒精浸5s→質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%次氯酸鈉溶液浸泡6min～10min→無菌水清洗接種(1)場所:超凈工作臺(tái)(2)切割:無菌濾紙上(3)使用器械:火焰灼燒滅菌(4)接種后:瓶口灼燒滅菌操作人員要對(duì)手消毒、戴口罩、穿工作服等,操作時(shí)禁止說話【高考警示】(1)植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是細(xì)胞的全能性。(2)接種時(shí),要使嫩莖的形態(tài)學(xué)下端接觸培養(yǎng)基,不能倒插。(3)脫分化、再分化的培養(yǎng)基成分不同。(4)外植體必須消毒,培養(yǎng)過程中嚴(yán)禁雜菌污染?？键c(diǎn)二影響植物組織培養(yǎng)的因素1.內(nèi)因(1)植物的種類;(2)同一植物材

3、料的年齡;(3)保存時(shí)間的長短等。2.外因3.植物激素在組織培養(yǎng)過程中的重要作用生長素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。其作用及特點(diǎn)為:(1)在生長素存在的情況下,細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)的趨勢。(2)使用順序不同,結(jié)果不同,具體如下:使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先使用生長素,后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長素細(xì)胞既分裂又分化同時(shí)使用分化頻率提高(3)用量比例不同,結(jié)果也不同:【高考警示】(1)月季快速繁殖中脫分化時(shí)不需光照,在“生芽培養(yǎng)基”上要每天用日

4、光燈光照12h。(2)各種植物激素可在配制培養(yǎng)基時(shí)加入,也可后來添加。(3)培養(yǎng)中若發(fā)現(xiàn)污染,要先滅菌后打開?？键c(diǎn)三快速繁殖技術(shù)與脫毒技術(shù)比較植物快速繁殖技術(shù)種苗脫毒技術(shù)不同目的使植物快速大量地繁殖后代獲取無病毒感染種苗,保證品種品質(zhì)取材部位嫩根、嫩莖莖尖相同都屬于植物組織培養(yǎng)【高考警示】種苗脫毒技術(shù)的理論依據(jù)(1)細(xì)胞全能性。(2)莖尖等分生組織還未形成維管束。(3)病毒移動(dòng)到分生組織的速度比細(xì)胞分裂速度慢。熱點(diǎn)一植物快速繁殖【典例1】(2012·山東高考)辣椒素作為一種生物堿廣泛用于食品保健、醫(yī)藥工

5、業(yè)等領(lǐng)域。辣椒素的獲得途徑如圖。(1)圖中①和②分別表示辣椒組織培養(yǎng)中細(xì)胞的和____________過程。(2)圖中培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基中常用的凝固劑是。培養(yǎng)基中的生長素和細(xì)胞分裂素用量的比值(填“高”或“低”)時(shí),有利于芽的分化。對(duì)培養(yǎng)基徹底滅菌時(shí),應(yīng)采取的滅菌方法是。(3)圖中外植體的消毒所需酒精的體積分?jǐn)?shù)是。用酶解法將愈傷組織分離成單細(xì)胞時(shí),常用的酶是和纖維素酶。(4)提取辣椒素過程中,萃取加熱時(shí)需安裝冷凝回流裝置,其目的是。【解析】本題考查植物組織培養(yǎng)的過程、條件,滅菌與消毒,物質(zhì)的提取等基礎(chǔ)知

6、識(shí)。(1)由植物組織培養(yǎng)的過程可知,①為脫分化形成愈傷組織,②為愈傷組織再分化為根、芽。(2)培養(yǎng)外植體需要用固體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基的凝固劑為瓊脂;生長素和細(xì)胞分裂素用量的比值低時(shí)利于發(fā)芽,高時(shí)利于生根;固體培養(yǎng)基要用高壓蒸汽滅菌。(3)外植體消毒一般用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精;由于植物細(xì)胞有細(xì)胞壁,所以將愈傷組織分離成單個(gè)細(xì)胞需要用纖維素酶和果膠酶。(4)提取辣椒素類似于提取胡蘿卜素,萃取加熱時(shí)要安裝冷凝回流裝置,目的是防止加熱時(shí)有機(jī)溶劑揮發(fā)。答案:(1)脫分化(或去分化)　再分化(2)瓊脂　低　高壓蒸

7、汽滅菌(3)70%　果膠酶(4)防止有機(jī)溶劑的揮發(fā)【變式訓(xùn)練】用多倍體育種的方法培育三倍體無子西瓜,每年都要制種,很麻煩。某活動(dòng)小組的同學(xué)們想到了利用植物組織培養(yǎng)的方法來解決此難題。請回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題。(1)此方法依據(jù)的原理是。選取合適的外植體作為起始材料,并要對(duì)外植體進(jìn)行(填“滅菌”或“消毒”)。(2)超凈工作臺(tái)是植物組織培養(yǎng)重要的設(shè)備,在使用前可以用進(jìn)行消毒,接種前還要用擦拭工作臺(tái)。(3)離體的組織和細(xì)胞,對(duì)營養(yǎng)、環(huán)境等條件的要求相對(duì)特殊,需要配制適宜的培養(yǎng)基。常用的一種培養(yǎng)基是,其主要成分包

8、括:、、。還常常需要添加。對(duì)培養(yǎng)基應(yīng)采用方法滅菌。需要的環(huán)境條件有適宜的。(4)如果外植體選取的材料為莖段,插入培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意。培養(yǎng)一段時(shí)間后,會(huì)通過形成愈傷組織,愈傷組織細(xì)胞的特點(diǎn)是?！窘馕觥?1)根據(jù)題中信息,可以判斷出此方法為植物組織培養(yǎng),因此依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。選取合適的外植體作為起始材料,并要對(duì)外植體進(jìn)行消毒。(2)超凈工作臺(tái)在使用前可以用紫外線進(jìn)行消毒,接種前還要用70%的酒精擦拭工作臺(tái)。(3)離體的組織和細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),