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《中和試驗(yàn)檢測(cè)低水平HbsAg的意義.doc》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。
1、中和試驗(yàn)檢測(cè)低水平HbsAg的意義 我國(guó)廣泛用酶免疫法(ELISA)檢測(cè)HBV血清標(biāo)志物，但ELISA法存在“灰區(qū)”，低水平的檢測(cè)值無法避免假陽性、假陰性。近年來微粒子酶免法(MEIA)和化學(xué)發(fā)光法(CLIA)等靈敏度高的自動(dòng)化檢測(cè)方法逐步應(yīng)用，檢測(cè)下限越來越低，低水平HBsAg檢測(cè)率逐步增加，但是自動(dòng)化檢測(cè)成本昂貴，不易作為常規(guī)應(yīng)用。中和試驗(yàn)因靈敏度和特異性都很高，在病毒學(xué)檢測(cè)中往往作為確認(rèn)試驗(yàn)。本文用中和試驗(yàn)對(duì)低水平HBsAg進(jìn)行檢測(cè)，初步探討其臨床意義?！ ?.對(duì)象與方法 1.1研究對(duì)象 本院經(jīng)ELISA試劑盒檢測(cè)HBsAg為弱陽性(
2、1≤S/CO≤5)血清樣本35例，經(jīng)CLIA檢測(cè)HBsAg為弱陽性(0.05IU/mL≤報(bào)告值≤2.00IU/mL)的血清樣本10例. 1.2檢測(cè)方法 (1)ELISA檢測(cè)HBsAg采用上?？迫A公司試劑盒，CLIA檢測(cè)HBsAg采用雅培ARCHITECTi2000SR免疫發(fā)光分析儀及配套試劑?！ ?2)ELISA中和試驗(yàn)方法：采用珠海麗珠公司HBsAg中和試劑盒檢測(cè)。試驗(yàn)原理[1]：在用抗-HBs抗體包被的微孔中分別加入含抗-HBs抗體的試劑和待測(cè)血清，試劑中的特異性抗-HBs抗體與固相抗-HBs競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合血清中的HBsAg，從而使結(jié)合到固相上
3、并與酶標(biāo)抗-HBs結(jié)合形成夾心復(fù)合物的HBsAg量減少，最后顯色反應(yīng)較淺，計(jì)算抑制率并與對(duì)照孔比較，可以判斷血清中是否存在HBsAg?！ ?.結(jié)果 2.1ELISA法中和試驗(yàn)結(jié)果 如表1所示，ELISA檢測(cè)為弱陽性的35例樣本，經(jīng)中和試驗(yàn)確認(rèn)有8例陰性，27例陽性。 2.2經(jīng)CLIA檢測(cè)為弱陽性的10例樣本，中和試驗(yàn)確認(rèn)有4例陽性，見表2。2.3中和試驗(yàn)抑制率與肝功能、HBV-DNA的關(guān)系45例低水平HBsAg樣本經(jīng)的肝功能及HBV-DNA結(jié)果，見表3，抑制率值越大，肝功能異常率越高，HBV-DNA陽性率也越高?！ ?.討論 本次試驗(yàn)的4
4、5例低水平HBsAg血清樣本中，ELISA法確認(rèn)試驗(yàn)確認(rèn)為HBsAg陽性31例、陰性14例，而化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)45例樣本均為陽性?？梢奅LISA與化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)低水平HBsAg結(jié)果存在不一致性。ELISA檢測(cè)HBsAg影響因素較多，溫育溫度、時(shí)間及方式對(duì)ELISA測(cè)定結(jié)果均有影響，因此，低水平的HBsAg篩查值的確認(rèn)極其重要?！度珖?guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》建議必要時(shí)應(yīng)采用中和試驗(yàn)進(jìn)行確認(rèn)，特別是弱陽性的檢測(cè)結(jié)果需進(jìn)一步確認(rèn)?！ ‰m然低濃度的HBsAg的患者占乙肝病毒感染者的比例很低，但在臨床實(shí)踐中，低濃度的HBsAg樣本(低于國(guó)產(chǎn)試劑的檢測(cè)下限)也經(jīng)常能
5、被發(fā)現(xiàn)，血清HBsAg呈低濃度存在可能有多種原因，但主要原因是大多數(shù)HBV感染患者隨著年齡增長(zhǎng)，HBV逐漸清除，HBsAg逐漸下降，并可能伴有血清學(xué)轉(zhuǎn)換，出現(xiàn)抗-HBs等?！叭醴磻?yīng)性”檢測(cè)結(jié)果的確認(rèn)應(yīng)使用特異性高的方法，比如中和試驗(yàn)，作為確認(rèn)試驗(yàn)可減少錯(cuò)誤檢查結(jié)果的誤導(dǎo)?！ ∮醒芯勘砻?，HBsAg陽性特別是低水平陽性并不能確診為HBV感染。由于HBsAg是HBV的外衣殼，可單獨(dú)存在于血液中，特別是近期注射過乙肝疫苗的患，單憑HBsAg陽性并不能說明受檢者體內(nèi)存在HBV。如果單純提高HBsAg檢測(cè)靈敏度，那么HBsAg陽性檢出率也會(huì)增高，也就造成假
6、陽性結(jié)果增多，對(duì)臨床診斷并無意義，反而給受檢者增加精神負(fù)擔(dān)和壓力。低水平HBsAg的臨床價(jià)值有待進(jìn)一步探討。
