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《RNA干擾mdr1對宮頸癌細(xì)胞放射敏感性的影響.doc》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、RNA干擾mdr1對宮頸癌細(xì)胞放射敏感性的影響張玉諾1于江1,俸珊1,劉方欣2(1.解放軍第181醫(yī)院,桂林541002;2..重慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,重慶400016)[摘要]目的:探討利用RNA干擾技術(shù)抑制多藥耐藥基因1(multidrugresistancegene1,mdr1基因)對宮頸癌細(xì)胞放射敏感性的影響。方法:設(shè)立空白組、脂質(zhì)體組(僅加入等量脂質(zhì)體)、mdr1RNA干擾組作對照,用RT-PCR檢測宮頸癌細(xì)胞轉(zhuǎn)染shRNA前后mdr1的表達(dá)水平變化。用集落形成試驗檢測各實驗組照射后人宮頸癌細(xì)胞株的集落形成率。AO/EB熒光檢測
2、法檢測細(xì)胞凋亡率的變化。流式細(xì)胞儀測定P-gp的表達(dá),結(jié)果:mdr1基因的shRNA能夠有效抑制mdr1基因的表達(dá)。經(jīng)過RNAi的放射治療組,其集落形成率較對照組明顯下降,MGMT的表達(dá)也下調(diào),統(tǒng)計學(xué)差異有顯著性(P<0.05)。結(jié)論:RNA干擾技術(shù)抑制mdr1的表達(dá),降低了宮頸癌細(xì)胞的放射抗性,其輻射增敏作用可能與抑制mdr1基因表達(dá)后P-gp的表達(dá)下調(diào)有關(guān)。[關(guān)鍵詞]RNAi;宮頸癌細(xì)胞;mdr1;放射敏感性中圖分類號:R737.31TheeffectsofRNAinterferencetoinhibitingmdr1onradios
3、ensitivityinhumancervicalcarcinomalineHeleZhangYunuo1,GongXu1,ZhouQi,Liu2Fanxing3(1.The181-stHospitalofPLA,Guilin,541002,P.R.China;2.Thedepartmentofgynecologicaltumor,TheTumorResearchInstituteofChongqing,Chongqing400030,China;3.ChongqingUniversityofmedicalSeciences,Chongq
4、ing400016,China)[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheinhibitoryeffectsofRNAiexpressionvectorofmdr1geneonradiosensitivityinHelecellofhumancervicalcarcinoma.MethodsRNAiexpressionvectorformdr1genewasconstructedandtransfectedtoHelecellofhumancervicalcarcinomawithliposomes.RT-PC
5、RandflowcytometerdetectseffectthatittomRNAandproteinexpressionofmdr1CellularresponsetoirradiationwasevaluatedbythecolonyfromingtestApoptosiswas*解放軍第181中心醫(yī)院院內(nèi)課題observedbyfluorescentstaining.P-gpproteinespressionwasdeterminedbyimmunohistochemicalstaining.ResultsRNAigroupcou
6、ldsignificantlydecreasetheproliferationrateanddownregulatetheexpressionofmdr1ofirradiatedhumancervicalcarcinoma.Conclusionmdr1oligodexynucleotidessensitizetheHelatoionizingirradiationthroughdecreasingtheexpressionofmdr1,whichmightberelatedtodecreasingtheexpressionofP-gp.[
7、KeyWords]RNAinterference;cellofhumancervicalcarcinoma;mdr1gene;Radiosensitivity腫瘤是一種以原癌基因激活和腫瘤抑制基因失活為特征的基因組功能性疾病,其結(jié)果限制了腫瘤對傳統(tǒng)治療的有效性,所以從基因水平阻斷有害基因的異常表達(dá)可以從從根本上解決問題。腫瘤細(xì)胞對化療放療的反應(yīng)性存在某些關(guān)聯(lián),一般而言,化療不明感的細(xì)胞對放療也不敏感。放療是治療宮頸癌的重要輔助手段之一。Mdr1基因(Multidrugresistancegene1,多藥耐藥基因1)編碼的磷酸蛋白P-gp(
8、P-glycoprotein,)的過度表達(dá)是產(chǎn)生多藥耐藥(multidrugresistance,MDR)的重要機(jī)制。本文利用RNA干擾(RNAinterfering,RNAi)技術(shù)抑制mdr