麻櫟體細胞胚胎發(fā)生與快速繁殖技術研究.docx

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1、麻櫟體細胞胚胎發(fā)生與快速繁殖技術研究麻櫟（QuercusacutissimaCarr.）既是重要的造林樹種，也是經濟價值很高的樹種。本文綜述了國內外櫟屬植物體胚發(fā)生和快速繁殖方面的研究現(xiàn)狀，探索了麻櫟快速繁殖技術新途徑。以麻櫟種子、成熟合子胚、幼苗莖葉組織和成年植株莖段為外植體，對麻櫟體胚發(fā)生和快速繁殖技術進行了研究和探討。成功獲得了大量麻櫟體胚，建立了麻櫟體胚發(fā)生技術體系，為櫟屬植物體胚發(fā)生提供了重要參考。主要結論如下：（1）麻櫟成熟合子胚體胚誘導最適培養(yǎng)基為MS+IBA(1.0mgL^-1)+6-BA（1.0mgL-1）+

2、谷氨酰胺(1.0gL^-1)+脯氨酸(0.5gL^-1)，誘導率達到70.0%；最適的成熟培養(yǎng)基為1/2MS+IBA(0.5mgL^-1)+6-BA(2mgL^-1)+ABA（2mgL-1）+谷氨酰胺（4gL-1）+脯氨酸(2gL^-1)；經4℃冷處理后，培養(yǎng)基1/2MS+6-BA(0.2mgL^-1)+山梨醇（10gL-1）萌發(fā)效果最佳。（2）麻櫟幼苗莖、葉外植體體胚誘導最適培養(yǎng)基為MS+TDZ(0.1mgL^-1

3、sup>)+谷氨酰胺(1gL^-1)+脯氨酸(0.6gL^-1)+IBA(1.0mgL^-1)+6-BA(1.0mgL^-1)；在1/2MS+6-BA(2.0mgL^-1)+IBA(0.5mgL^-1)+ABA(2mgL^-1)+谷氨酰胺(4gL^-1)+脯氨酸（2gL-1）培養(yǎng)基中，觀察到體胚由白色或淡黃色逐漸轉為綠色，呈顆粒球狀，但沒有觀察到心形胚或魚雷胚。（3）麻櫟成熟植株莖段體胚誘

4、導最適培養(yǎng)基為MS+TDZ(0.1mgL^-1)+谷氨酰胺(1gL^-1)+脯氨酸(0.6gL^-1)+IBA(0.5mgL^-1)+6-BA(2.0mgL^-1)；最適成熟培養(yǎng)基為1/2MS+IBA(0.5mgL^-1)+6-BA(2.0mgL^-1)+ABA(2mgL^-1)+谷氨酰胺(4gL^-1)+脯氨酸(2gL^-1)；未見體胚萌發(fā)，可能由

5、于外植體存在生理老化現(xiàn)象。（4）麻櫟體胚發(fā)生經歷球形胚、心形胚、魚雷胚和子葉胚階段，成熟體胚和愈傷組織結合較松散，容易分離或自行脫落，分化出胚芽和胚根，獨立形成完整小植株。觀察結果表明，麻櫟體胚具有明顯的兩極性和相對獨立性，這兩點完全符合判斷體胚的兩個重要特征。因此，本研究成功建立了麻櫟體胚發(fā)生體系。（5）麻櫟種子外植體芽增殖最適培養(yǎng)基為MS+IBA(0.1mgL^-1)+6-BA(4.0mgL^-1)；壯苗培養(yǎng)基MS+IBA(0.1mgL^-1)+水解酪蛋白(1.5gL^-1<

6、/sup>)。麻櫟幼苗莖段外植體最適芽誘導培養(yǎng)基為MS+IBA(1.0mgL^-1)+6-BA(3.0mgL^-1)。麻櫟成熟莖段外植體最適芽誘導培養(yǎng)基為MS+IBA(1.0mgL^-1)+6-BA(3.0mgL^-1)。