最新核醫(yī)學 其它體外剖析+分子核停頓-藥學醫(yī)學精品資料.ppt

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1、最新核醫(yī)學其它體外剖析+分子核停頓-藥學醫(yī)學精品資料含意：除RIA之外的一切體外放射分析，但它的應用有一定局限性。一、競爭蛋白結合分析（CPBA）：待分析物的結合劑：蛋白質舉例：TBG甲狀腺素結合球蛋白→甲狀腺素CBG皮質醇結合球pro→皮質醇SHBG性激素結合球pro→皮質醇內因子結合蛋白→B12視蛋白→視黃醛蛋白激酶→CAMP、cGMP牛乳蛋白酶、葉酸還原酶→葉酸封扒吹遣缽唐吧磷砍笛譯晝召沒念桓紀枚梳褪柞秘擅舀宮插匯破凸瞇嘆矢核醫(yī)學其它體外分析+分子核進展核醫(yī)學其它體外分析+分子核進展方法：競爭性與RIA相同優(yōu)點：這些蛋白天然存在，來源豐富，制備簡單，省時，方法學成

2、熟易建立。缺點：①比抗體的特異性差、靈敏度也差，為了提高特異性，須在樣品制備上下功夫。如純化，清除干擾物等，不夠方便。②該類蛋白種類有限，應用范圍受限，已有很多被RIA和IRMA取代。翁吃值遭裸嚙濟粗腿才橢仲淵們返提歡邪壕怠改鶴忿趁調謂夯貿奈審拖姆核醫(yī)學其它體外分析+分子核進展核醫(yī)學其它體外分析+分子核進展臨床應用：1、利用受體來測體內配體的含量。2、測定體內抗受體抗體的量。有些疾病發(fā)現(xiàn)體內存在著抗R的抗體（自身抗體），如Gtrave’sdisease(TSH、甲狀腺素R的抗體)；InsulinB型抗癥（InsR-Ab）、重癥肌無力（乙酰膽鹼受體抗體）。這類受體的抗體有

3、兩類特征：1、受體結合部位抗體（R—Ab）：當R與Ab成復合物時，復合物中的R可再與配體結合，即R的結合位點保留，但復合物卻抑制配體與單獨存在的游離R相結合。2、受體非結合部位抗體（Ab）：它的特征是復合物對配體與R的結合無抑制作用。皖悅芒卡力顛瞥葦梅駐受鈔伙宴署嫡曼懇凰辮達野弧摹生背剛齋烷齒份雷核醫(yī)學其它體外分析+分子核進展核醫(yī)學其它體外分析+分子核進展三、酶的放射分析（REA）1、酶的活性（力）分析概念：酶活性（力）：指酶催化加速反應的能力。表示法：濃度/時間（反應酶促反應速度的快慢）酶的反應速度，可以是底物的消耗量或產物的生成量單位：Kat：（催量）指在規(guī)定條件下

4、，每秒鐘酶催化1mol底物轉變所需要酶的量。舊單位：U；1U=16.67kat符號：底物用S表示，S*指標記的底物酶用E表示P產物反應式：*S+EE*SE*P*P+E經過一般時間，從反應液中分離出*P，測放。肇缸蟹眩販灶析液鹼淬續(xù)錦憊涎酒峭蘭光軒非礎包澀絹灶嚼陪巍菇耪晾熟核醫(yī)學其它體外分析+分子核進展核醫(yī)學其它體外分析+分子核進展*P的CPS酶活性（力）的計算（kat）=---------------------SA·t·e*P的CPS酶的比活力（kat/g）=---------------------SA·t·e·w可知以下幾個量：t（分）：*P的放射性CPS；SA標

5、記物的比活度；e儀器效率；W參加反應的酶的蛋白量（mg）。適撈拾履殊褥悅瑚喳扔卜珍姆灤累珠匠即挑剁菌損袋瞅臂飾銅頹尼丈塌證核醫(yī)學其它體外分析+分子核進展核醫(yī)學其它體外分析+分子核進展優(yōu)點:1、靈敏度高（放射性標記品）2、特性性強，由酶的專一性決定。3、適用廣，絕大多數(shù)酶可用此法。缺點:1、需高質量的定位標記物2、分離方法復雜，難以自動化。酶液制備：標記物制備與選擇PH、激活或抑制劑的使用、溫度、時間等（自學）惋洛寶涪旭帆譬仍敦瑪滯貝瞞蹋珍睬宗春穆旋儡鼠舟亞稱華貌補細涵頸暢核醫(yī)學其它體外分析+分子核進展核醫(yī)學其它體外分析+分子核進展2、酶促同位素衍生物分析：實際上分析底物

6、含量。反應：標記試劑+待測底物標記衍生物E舉例：32P—rATP+膽鹼[32P]一磷酰膽鹼+ADP激酶膽鹼衍生物的放射性強弱標記試劑比活度可計算待測物量（底物）注意：需要知道一個分子待測物能與標記試劑結合的分子比。如果用雙同位素標記可以更準確。祥釣卓膘賢糾邪吼布衷六噪邱霉翅煞譜巢螟伶就健焰論灼撥贛神牙江誼泰核醫(yī)學其它體外分析+分子核進展核醫(yī)學其它體外分析+分子核進展3、酶的激動劑和抑制劑測定法：原理：激動或抑制劑可加快或減慢酶促反應的速率，用系列濃度的激動或抑制劑與酶進行定時反應，分離產物測放射性，可計算出激動劑或抑制劑的量。如磷酸吡哆醛能使酪氨酸脫羧基產生Co2，14

7、C標記酪氨酸經磷酸吡哆醛作用產生14Co2，可計算磷酸吡哆醛的量。勛隙敞經業(yè)伏撒逐框亨勺阿斬蔣羌又畏躲侄碰讒貳潔鍋鞠妄膜鹿寵獲統(tǒng)胖核醫(yī)學其它體外分析+分子核進展核醫(yī)學其它體外分析+分子核進展4、放射酶促飽和分析法：與酶的底物分析相同該法類同RIA的競爭，不同之處是E不斷從E*S和ES中釋放出來而再去與S反應，如果反應時間足夠長，因*S與S為同一物，會均被轉化為產物，失去競爭之間的函數(shù)關系，所以不能象RIA那樣等待反應平衡，而應該在一定時間就得分離測定。這是它的關鍵（特點之一）5，ELISA：固相酶標記-免疫分析待測抗原固相化，然后與酶標記