最新熒光分光光度法測(cè)定藥液維生素B2含量總論課件PPT.ppt

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1、熒光分光光度法測(cè)定藥液維生素B2含量總論實(shí)驗(yàn)原理熒光分析法常溫下，處于基態(tài)的分子吸收一定的紫外可見光的輻射能成為激發(fā)態(tài)分子，激發(fā)態(tài)分子通過無(wú)輻射躍遷至第一激發(fā)態(tài)的最低振動(dòng)能級(jí)，再以輻射躍遷的形式回到基態(tài)，發(fā)出比吸收光波長(zhǎng)長(zhǎng)的光而產(chǎn)生熒光。在稀溶液中，熒光強(qiáng)度IF與物質(zhì)的濃度c有以下的關(guān)系：當(dāng)實(shí)驗(yàn)條件一定時(shí)，熒光強(qiáng)度與熒光物質(zhì)的濃度成線性關(guān)系：這是熒光光譜法定量分析的理論依據(jù)。a.與紫外-可見分光度法比較，熒光分析法具有更高的靈敏度。b.選擇性好。熒光法既能依據(jù)發(fā)射光譜，又能依據(jù)吸收光譜來(lái)鑒定物質(zhì)

2、。c.所需試樣量少、操作方法簡(jiǎn)便。熒光分析法的特點(diǎn)維生素B2（又叫核黃素，VB2）是橘黃色無(wú)臭的針狀結(jié)晶，其結(jié)構(gòu)式為：維生素B2易溶于水而不溶于乙醚等有機(jī)溶劑，在中性或酸性溶液中穩(wěn)定，光照易分解，對(duì)熱穩(wěn)定。藥液維生素B2含量的測(cè)定維生素B2溶液在430～440nm藍(lán)光的照射下，發(fā)出綠色熒光，其峰值波長(zhǎng)為525nm。VB2的熒光在pH=6～7時(shí)最強(qiáng)，在pH=11時(shí)消失。維生素B2在堿性溶液中經(jīng)光線照射會(huì)發(fā)生分解而轉(zhuǎn)化為光黃素，光黃素的熒光比核黃素的熒光強(qiáng)的多，故測(cè)VB2的熒光時(shí)溶液要控制在酸性范圍

3、內(nèi)，且在避光條件下進(jìn)行。光黃素實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)預(yù)習(xí)熒光分光光度法測(cè)定維生素B2的分析原理。了解熒光光度計(jì)的操作步驟和測(cè)定維生素B2的方法。F96型熒光光度計(jì)（上海棱光分析儀器有限公司）5mL吸量管1只，2mL吸量管1只，50mL容量瓶7只10.0μg·mL-1VB2標(biāo)準(zhǔn)溶液（置陰暗處保存），冰乙酸（AR），藥用VB2試樣儀器與試劑1.打開氙燈，再打開主機(jī)，然后打開計(jì)算機(jī)啟動(dòng)工作站并初始化儀器。2.儀器初始化完畢后，在工作界面上選擇測(cè)量項(xiàng)目，設(shè)置適當(dāng)?shù)膬x器參數(shù)：激發(fā)波長(zhǎng)=440nm（本儀器只有356nm）

4、，發(fā)射波長(zhǎng)=540nm。3.樣品測(cè)定。4.退出主程序，關(guān)閉計(jì)算機(jī)，先關(guān)主機(jī)，最后關(guān)氙燈?；静僮?.標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制及標(biāo)準(zhǔn)溶液熒光強(qiáng)度的測(cè)定：在六個(gè)干凈的50mL容量瓶中，分別吸取0.50、1.00、1.50，2.00、2.50和3.00mLVB2標(biāo)準(zhǔn)溶液，各加入2.00mL冰乙酸，稀釋至刻度，搖勻。從稀到濃測(cè)量系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的熒光強(qiáng)度。2.未知試樣的測(cè)定:移取0.1mL試樣,用少量水溶解后轉(zhuǎn)入50mL容量瓶中，加2.00mL冰乙酸，稀釋至刻度，搖勻。用測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列時(shí)相同的條件，測(cè)量其熒光強(qiáng)度。

5、實(shí)驗(yàn)步驟1.用標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的熒光強(qiáng)度繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。2.根據(jù)待測(cè)液的熒光強(qiáng)度，從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線上求得其濃度，計(jì)算出試樣中VB2含量。數(shù)據(jù)處理1.解釋熒光光度法較吸收光度法靈敏度高的原因。2.維生素B2在pH＝6～7時(shí)熒光最強(qiáng)，本實(shí)驗(yàn)為何在酸性溶液中測(cè)定？注意事項(xiàng)和問題聯(lián)合用藥大綱湖南益豐大藥房醫(yī)藥連鎖有限公司膽囊炎、肝病類通用名：復(fù)方膽通類別：膽囊炎用藥作用：清熱利膽，解痙止痛。用于急、慢性膽囊炎，膽管炎，膽囊、膽道結(jié)石合并感染，膽囊術(shù)后綜合征，膽道功能性疾患等。不良反應(yīng)：有致過敏性休克者聯(lián)合用

6、藥：復(fù)方膽通膠囊＋曲匹布通＋抗生素＋膽舒膠囊注意事項(xiàng)：無(wú)采購(gòu)分類品名規(guī)格廠家自代復(fù)方膽通膠囊24s吉林吉春賣點(diǎn)1）服用方便，每次2粒，擺脫了治療肝膽類藥品服用劑量大的弊端2）本品成份中的膽通、茵陳、溪黃草均有利膽的功效通用名：膽舒軟膠囊類別：利膽排石藥作用：舒肝理氣，利膽。主要用于慢性結(jié)石性膽囊炎，慢性膽囊炎及膽結(jié)石肝膽郁結(jié)，濕熱胃滯證。不良反應(yīng)：尚不明確聯(lián)合用藥：膽舒膠囊＋復(fù)方膽通＋抗生素＋曲匹布通注意事項(xiàng)：無(wú)采購(gòu)分類品名規(guī)格廠家自代膽舒軟膠囊0.3g*24s秦皇島皇威賣點(diǎn)1)軟膠囊，劑型獨(dú)特

7、，服用方便，易吸收2）綠色生物基因排毒排石中藥特色療法3）純中藥制劑，療效確切，安全可靠通用名：利膽排石類別：利膽排石藥作用：清熱利濕，利膽排石。用于濕熱蘊(yùn)毒、腑氣不通所致的脅痛、膽脹，癥見脅肋脹痛、發(fā)熱、尿黃、大便不通；膽囊炎、膽石癥見上述證候者。不良反應(yīng)：尚不明確。聯(lián)合用藥：利膽排石＋膽舒膠囊＋曲匹布通＋消炎利膽片注意事項(xiàng)：1.孕婦禁用。2.體弱、肝功能不良者慎用采購(gòu)分類品名規(guī)格廠家自代利膽排石片0.43*96s山東綠因賣點(diǎn)1）消炎、排石，雙管齊下，療效一流2）品牌廠家，質(zhì)量有保證3）純中藥

8、，安全無(wú)副作用通用名：肝速康類別：治療肝病中成藥作用：本品具有降酶，降濁，調(diào)整機(jī)體免疫功能，改善代謝障礙，肝病癥狀及加速肝功能恢復(fù)等作用。用于急、慢性肝炎。不良反應(yīng)：偶有胃區(qū)不適，停藥后即可消失。聯(lián)合用藥：1.急性肝炎：肝速康＋干擾素＋護(hù)肝片＋維生素c＋降酶靈2.慢性肝炎：肝速康＋阿德福韋酯＋維生素c＋慢肝養(yǎng)陰注意事項(xiàng)：1.合并消化道出血的病人禁用。2.忌食辛辣食品采購(gòu)分類品名規(guī)格廠家自代肝速康膠囊(久歡)0.23g*36s長(zhǎng)春大政賣點(diǎn)1）三快:改善癥狀快轉(zhuǎn)陰快降酶快2）三降:降低轉(zhuǎn)氨酶和膽紅素