細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖與培養(yǎng)

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第2節(jié)細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖與人工培養(yǎng) 學(xué)習(xí)目的1.掌握細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的條件；2.掌握細(xì)菌與醫(yī)學(xué)相關(guān)的合成代謝產(chǎn)物及其意義；3.了解細(xì)菌的遺傳與變異； （一） 2.12 細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線活菌數(shù)的對(duì)數(shù)培養(yǎng)時(shí)間遲緩期對(duì)數(shù)期穩(wěn)定期衰退期 （二）細(xì)菌的人工培養(yǎng)1．人工培養(yǎng)的意義（1）傳染病的診斷與治療（2）生物制品的制備（3）細(xì)菌的鑒定與研究2．培養(yǎng)基是由適合于細(xì)菌生存的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。按用途可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基和厭氧培養(yǎng)基等。按物理性狀可分為液體、固體和半固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入一定量的凝固劑（多為瓊脂）即成為固體或半固體培養(yǎng)基。 3．細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象（1）細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象不同細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖可出現(xiàn)均勻混濁、沉淀和形成菌膜三種現(xiàn)象，臨床應(yīng)用的澄清透明的注射液若發(fā)現(xiàn)上述任何一種現(xiàn)象，均表明已被細(xì)菌污染，禁止使用。 （2）細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象經(jīng)常用于做動(dòng)力試驗(yàn)：即將細(xì)菌穿刺接種于半固體培養(yǎng)基中，經(jīng)培養(yǎng)后，無鞭毛的細(xì)菌沿穿刺線生長(zhǎng)，穿刺線清晰；有鞭毛的細(xì)菌則沿穿刺線向周圍擴(kuò)散生長(zhǎng)，穿刺線模糊不清，用于檢查細(xì)菌的動(dòng)力 （3）細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象菌落：把細(xì)菌接種到固體培養(yǎng)基表面，一般經(jīng)37℃，18～24小時(shí)培養(yǎng)，單個(gè)細(xì)菌就可以生長(zhǎng)繁殖成肉眼可見細(xì)菌集團(tuán)，稱之。不同細(xì)菌形成的菌落大小、形狀、顏色不同，即菌落特征，有利于鑒別細(xì)菌種類 細(xì)菌在各種培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)現(xiàn)象 人工培養(yǎng)基在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用1感染性疾病的病原學(xué)診斷和治療2細(xì)菌學(xué)研究3生物制品的制備4基因工程 第3節(jié)細(xì)菌新陳代謝1.細(xì)菌的分解代謝產(chǎn)物及其臨床意義（1） （2） 熱原質(zhì)細(xì)菌在代謝過程中產(chǎn)生的一種多糖，注入人和動(dòng)物體內(nèi)能引起發(fā)熱反應(yīng)，故名熱原質(zhì)。多由革蘭陰性菌產(chǎn)生，熱原質(zhì)耐高溫，不被高壓蒸氣滅菌（121℃30min）所破壞，常通過濾過或吸附除去液體中大部分熱原質(zhì)，蒸餾法效果最好。毒素毒素是病原菌合成的對(duì)機(jī)體有毒害作用的物質(zhì)，有內(nèi)毒素和外毒素兩種。侵襲性酶某些細(xì)菌產(chǎn)生的能增強(qiáng)侵襲力的胞外酶。2.細(xì)菌的合成代謝產(chǎn)物及其意義（1）與致病有關(guān)的合成代謝產(chǎn)物 （2）與治療疾病有關(guān)的合成代謝產(chǎn)物抗生素由某些微生物產(chǎn)生的，并能抑制或殺滅其他微生物的物質(zhì)稱為抗生素。廣泛應(yīng)用于感染性疾病的治療。維生素某些細(xì)菌合成的維生素除供自身需要外，還可分泌到細(xì)菌體外。如人體腸道的大腸埃希菌能合成B族維生素和維生素K，供人體吸收利用。 （3）與鑒別細(xì)菌有關(guān)的代謝產(chǎn)物色素是細(xì)菌產(chǎn)生的有色物質(zhì)。如金黃色葡萄球菌產(chǎn)生非水溶性金黃色色素如銅綠假單胞菌產(chǎn)生水溶性綠色色素，在細(xì)菌鑒別上有一定的意義。細(xì)菌素某些細(xì)菌可產(chǎn)生僅對(duì)有親緣關(guān)系的細(xì)菌具有抗菌作用的蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)與脂多糖的復(fù)合物，成為細(xì)菌素。 第4節(jié)細(xì)菌的遺傳與變異（1）形態(tài)結(jié)構(gòu)變異：指細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)在某些因素影響下發(fā)生的變異。（2）菌落變異：S->R（3）毒力變異：指細(xì)菌在一定條件下毒力的減弱或增強(qiáng)。如卡介苗(BCG)（4）耐藥性變異：指細(xì)菌對(duì)某一抗菌藥物由敏感變?yōu)橛械挚沽Α?.細(xì)菌的常見變異現(xiàn)象 基因變異在醫(yī)學(xué)實(shí)踐上的意義1用來診斷疾病2疾病治療3疾病預(yù)防4基因工程方面 目標(biāo)檢測(cè)一、名詞解釋菌落耐藥性變異二、選擇題1．多數(shù)細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的最適pH是（）A．pH7.2~7.6B．pH6.5~6.8C．pH8.0~8.8　　D．pH4.4~4.6E．pH5~62．細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的條件不包括（）A．豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)　　B．必要的氣體環(huán)境C．合適的溫度　　　D．合適的酸堿度E．充足的光線3.注射液中出現(xiàn)哪種現(xiàn)象說明被細(xì)菌污染？()A．沉淀B.絮狀物C.混濁D.菌膜E.以上都是三、簡(jiǎn)答題細(xì)菌有哪些合成代謝產(chǎn)物？與致病性和醫(yī)藥有關(guān)的各是哪些？ 第3節(jié)細(xì)菌與外界環(huán)境學(xué)習(xí)目標(biāo)1、簡(jiǎn)述細(xì)菌在自然界和正常人體的分布狀況。2、列出常用的熱力消毒滅菌法及適用范圍。3、分析紫外線的殺菌原理、作用、特點(diǎn)及應(yīng)用。4、概述常用化學(xué)消毒劑的濃度、作用機(jī)制、用途及影響因素。5、了解醫(yī)院感染的概念。 細(xì)菌的分布細(xì)菌在自然界的分布土壤中的細(xì)菌水中的細(xì)菌空氣中的細(xì)菌細(xì)菌在正常人體的分布正常菌群的概念及意義 正常菌群正常人體的體表及與外界相通的腔道中，存在著不同種類、數(shù)量和比例的微生物。這些微生物在正常情況下對(duì)人體無害稱正常微生物群又稱正常菌群。 正常菌群的生理作用1.生物拮抗作用2.營(yíng)養(yǎng)作用3.免疫作用4.其他作用：抗衰老，抑制腫瘤 條件致病菌在特定條件下，正常菌群與人體之間以及正常菌群之間的平衡可被破壞而引起疾病，這些細(xì)菌稱為條件致病菌。1寄居部位發(fā)生改變2機(jī)體免疫力下降3菌群失調(diào)與菌群失調(diào)癥：又稱二重感染，常見于長(zhǎng)期應(yīng)用大量抗生素的病人。 條件致病菌引起疾病的條件細(xì)菌方面機(jī)體方面正常菌群/非致病菌條件致病菌？寄居部位改變菌群失調(diào)免疫功能下降 消毒滅菌的基本概念1清潔將被微生物污染了的無生命表面還原為安全水平的處理過程。2消毒指用物理或化學(xué)方法殺死物體或環(huán)境中病原微生物的方法3滅菌殺滅物體上所有病原性與非病原性微生物以及細(xì)菌芽孢的方法4防腐指防止或抑制微生物生長(zhǎng)繁殖的方法5無菌和無菌操作無菌是指無活的微生物防止微生物進(jìn)入機(jī)體或物體的操作技術(shù)稱為無菌操作或者無菌技術(shù)。 二，清潔法將物品用清水沖洗，再用洗滌劑刷洗，除去物品上的所有污穢，最后用清水洗凈。常用于墻壁，地面，桌椅，病床等的清潔以及物品消毒滅菌前的準(zhǔn)備。 三，消毒與滅菌法 物理消毒滅菌法熱力消毒滅菌法焚燒燒灼干烤（160℃~170℃2h）干熱消毒滅菌法濕熱消毒滅菌法巴氏消毒法62℃30min72℃30s煮沸法流通蒸汽消毒法間歇蒸汽滅菌法高壓蒸汽滅菌法121℃103kPa20~30min 2電磁波輻射殺菌法日光暴曬法：最簡(jiǎn)單，最經(jīng)濟(jì) 輻射殺菌法紫外線265~266nm殺菌原理用途與缺陷電離輻射X射線、γ射線、高速電子微波消毒法生物凈化法除菌：經(jīng)常用于手術(shù)室和病房濾過除菌法0.22μm不耐熱血清、超凈工作臺(tái)等 化學(xué)消毒滅菌法1化學(xué)消毒劑的作用機(jī)制：有的可以使菌體蛋白質(zhì)凝固變性或使酶蛋白失去活性，而致細(xì)菌代謝障礙，有的則破壞菌體細(xì)胞壁或細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)，改變其通透性，使菌體破裂，溶解，導(dǎo)致細(xì)菌死亡。2化學(xué)消毒劑的使用原則：根據(jù)消毒劑的性能和病原體的特性，選擇合適的消毒劑。嚴(yán)格掌握消毒劑的有效濃度，消毒時(shí)間和使用方法消毒前須將物品清洗擦干。浸泡消毒后的物品于使用前要用生理鹽水沖洗注意溫度和酸堿度對(duì)消毒劑作用效果的影響 化學(xué)消毒劑的使用方法浸泡法：用于耐濕不耐熱的物品的消毒噴霧法：用于空氣和物品表面如墻壁的消毒擦拭法：用于桌椅、地面、墻壁的消毒熏蒸法：用于室內(nèi)物品，空氣以及不耐濕，不耐高溫的物品 消毒劑的分類高效消毒劑：殺滅細(xì)菌的芽孢和真菌的孢子在內(nèi)的各種微生物中效消毒劑：能殺滅芽孢以外的各種微生物低效消毒劑：能殺滅大多數(shù)細(xì)菌的繁殖體及親脂性病毒 化學(xué)消毒法類型作用機(jī)制常用種類酚類蛋白質(zhì)變性，細(xì)胞膜損傷石炭酸醇類蛋白質(zhì)變性與凝固乙醇氧化劑氧化作用、蛋白質(zhì)凝固高錳酸鉀、碘酒過氧乙酸、重金屬鹽氧化作用、蛋白質(zhì)變性與凝固紅汞、硫柳汞表面活性劑蛋白變性，細(xì)胞膜損傷新潔而滅染料抑制繁殖龍膽紫酸堿類破壞膜、壁，蛋白凝固醋酸、生石灰烷化劑蛋白質(zhì)及核酸烷基化環(huán)氧乙烷 影響消毒劑作用的因素消毒劑的濃度，作用時(shí)間和性質(zhì)溫度和酸堿度細(xì)菌的性質(zhì)環(huán)境中有機(jī)物與拮抗物質(zhì)的影響