論當歸對x線輻射損傷小鼠造血功能恢復存在的影響

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1、論當歸對X線輻射損傷小鼠造血功能恢復存在的影響摘要:目的觀察當歸對Χ線輻射損傷小鼠造血功能恢復的影響。方法用100%當歸浸出液定期給小鼠灌胃,5d后,用Χ線照射0.11CGY,1次/d,共照射5次,檢測小鼠骨髓細胞增殖和抗體的產生。結果用藥組小鼠骨髓細胞增殖和抗體產生有顯著增強作用,與照射組相比均有非常顯著性差異(P<0.001)。結論當歸有明顯抗X線輻射、促進小鼠骨髓細胞增殖和抗體產生的作用。關鍵詞:當歸骨髓細胞增殖抗體小鼠  AbstractObjectiveToresearchtheeffectofAngelic

2、asinensisDiels,(ASD)onhemopoieticrehabilitationofradiatedmice.MethodsFilledthestomachesofthemiceicearroarroarroarrol,溫火煎煮2h,去渣濃縮為200ml備用。美國Multiskan產全自動酶標儀;CO2培養(yǎng)箱由美國Forma公司生產;美國產(IE.USA)冷凍離心機;超凈工作臺由蘇州凈化設備廠生產;日本東芝DGTT為FLUKA公司產品;二甲基亞砜(DMSO)為蘇州化工研究所生產;RPMI-1640為美國GIBC

3、O公司產品?! ?.2動物分組與給藥  BALB/C小鼠36只,體重18~22g,雌雄兼有,購于北京醫(yī)科大學實驗動物中心。將動物隨機分3組,每組12只。Ⅰ組為生理鹽水對照正常組;Ⅱ組為鹽水加照射組;Ⅲ組為當歸藥物加照射實驗組。Ⅰ,Ⅱ組每天用生理鹽水灌胃,0.5ml/次,1次/d;Ⅲ組每天用當歸液灌胃,0.5ml/次,1次/d;Ⅱ,Ⅲ組于第6天在灌胃后30min行全身暴露Χ射線照射,用等效方野18cm×18cm,焦點-鼠距80cm。每天照射0.11CGY,1次/d,共照射5次?! ?.3檢測指標及方法  1.3.1骨髓細胞增殖

4、反應[1]  頸椎脫臼處死小鼠,無菌操作取小鼠雙股骨骨髓細胞,調細胞濃度至5×106/ml,取100μl加入96孔細胞培養(yǎng)板中,設5個復孔,置37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h,終止前5h,摻入MTT(5mg/ml)10μl/孔,終止培養(yǎng)時離心棄上清,每孔加入100μlDMSO溶解MTT還原產物甲臜(Formazan)溶解緩沖液,充分震蕩10min,全自動酶標儀用560nm波長測OD值,以OD值代表骨髓細胞活性。1.3.2定量溶血分光光度測定法(QHS)[2]  本法體外B細胞產生分泌抗體裂解紅細胞所釋放的血紅蛋白量(以O

5、D值表示),其結果可反應機體體液免疫功能。實驗第5天分別將5%的綿羊紅細胞0.2ml注入各組小鼠腹腔內,第11天眼球放血,頸椎脫臼致死,常規(guī)取脾臟,然后進行脾細胞計數(shù),調細胞濃度至1×107/ml,取脾細胞1ml,1∶10新鮮豚鼠血清(補體)1ml,0.2%綿羊紅細胞(SRBC)1ml,混勻,37℃水浴1h,1500r/m離心10min,取上清液用96孔細胞培養(yǎng)板于全自動酶標儀450nm波長處測A值,作為QHS反應值?! ?.4統(tǒng)計學方法  實驗結果采用組間均數(shù)差異t檢驗的方法進行統(tǒng)計學分析。2結果  當歸對小鼠骨髓細胞增殖

6、、抗體產生的影響見表1。表1當歸對小鼠骨髓細胞增殖、抗體產生的影響(略)3討論  當歸是臨床上常用的中藥,現(xiàn)代研究[3]證實,當歸有明顯的抗輻射損傷作用。用當歸對輻射損傷的家兔進行腹腔注射,引起家兔染色體畸形變率明顯下降,連續(xù)注射9d,家兔染色體畸變率完全恢復正常,體外用藥實驗結果與體內注射結果相同。對Co-γ射線輻射損傷后的小鼠通過腹腔給予當歸注射液,連續(xù)給藥80d后發(fā)現(xiàn),受輻射損傷后的卵巢于照射后第15天開始進入恢復期,比未給當歸的對照組顯著提前。當歸多糖對受照小鼠的造血細胞亦有輻射防護作用,照射前注射當歸多糖能促進照射

7、小鼠脾臟內源性造血灶形成,提高受照小鼠骨髓有核細胞計數(shù),當歸多糖對CFV-C和CFV-S的放射敏感性影響較少,但能防止照射后效應,能顯著促進小鼠CFV-C和CFV-S的恢復,這可能是其抗輻射作用原理之一。水浸液灌飼小鼠,能顯著促進血紅蛋白及紅細胞的生成,其抗貧血作用可能與所含的維生素B12、煙酸、葉酸、亞葉酸等有關。從上述實驗中可以看出,當歸可刺激小鼠抗體的產生,使抗體分泌量增加,與照射組相比有非常顯著性差異(P<0.001)。當歸對骨髓細胞增殖有明顯促進作用,與照射組相比有非常顯著性差異(P<0.001)。骨髓

8、細胞增殖歸之于集落刺激因子(CSF)的存在[4],CSF是一組在體內外均能強烈刺激造血祖細胞增殖,分泌并形成細胞集落的低分子細胞因子。本研究結果表明,當歸有明顯抗輻射的作用,調節(jié)骨髓造血和促進抗體產生的作用。口服當歸液可作為Χ線檢查病人或接觸Χ線者的保健飲品,有利于減輕Χ線接觸者免疫造血功

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