sorl1基因多態(tài)性與散發(fā)性阿爾茨海默病關(guān)聯(lián)分析

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1、SORL1基因多態(tài)性與散發(fā)性阿爾茨海默病關(guān)聯(lián)分析：伍力王燕李超伍星余發(fā)春【摘要】　　目的分析SORL1基因多態(tài)性與散發(fā)性阿爾茨海默?。⊿AD）是否存在關(guān)聯(lián)。方法采用聚合酶鏈反應(yīng)限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（PCRRFLP）技術(shù)，檢測(cè)114例SAD患者及111例健康對(duì)照者的SORL1基因多態(tài)性分布特征。結(jié)果SAD組與對(duì)照組SORL1基因型及等位基因頻率分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2＝1.693，P=0.429，χ2＝0.965，P=0.326）。不同性別的SAD組與對(duì)照組SORL1基因型及等位基因頻率分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（男性：χ2＝2.324，P=0.313，χ2＝1.667，P=0.197；女

2、性：χ2＝2.878，P=0.237，χ2＝0.058，P=0.810）。結(jié)論亞洲漢族人群SORL1基因rs641120位點(diǎn)的A/GSNP多態(tài)性與SAD可能無(wú)關(guān)聯(lián)?！娟P(guān)鍵詞】阿爾茨海默病；基因表達(dá)；多態(tài)現(xiàn)象；遺傳　　阿爾茨海默?。ˋD）是一種多因素引起的原發(fā)性退行性腦變性疾病，病因未明〔1〕。AD患者中，除少數(shù)為家族性外，絕大多數(shù)為散發(fā)性。散發(fā)性阿爾茨海默?。⊿AD）的發(fā)病是多個(gè)基因和環(huán)境因素共同作用的結(jié)果。目前，定位于19號(hào)染色體的載脂蛋白E（APOE）ε4等位基因作為AD的危險(xiǎn)因子已得到廣泛認(rèn)同〔2〕，但ε4等位基因并非AD發(fā)病的充要條件〔3〕，其發(fā)病因素僅占了45%～60%，由此可

3、見尚有其他危險(xiǎn)因素參與了AD的發(fā)病。研究發(fā)現(xiàn)遺傳性或獲得性的SORL1受體表達(dá)或功能改變，可能涉及AD發(fā)生的機(jī)制〔4，5〕。本研究通過(guò)對(duì)SAD患者SORL1基因進(jìn)行多態(tài)性檢測(cè)，探討SORL1基因多態(tài)性與SAD是否存在關(guān)聯(lián)?！　?對(duì)象與方法　　1.1對(duì)象　　114例SAD患者為2006年9月至2008年3月在我院門診及住院的患者，各患者間無(wú)親緣關(guān)系，其中男44例，女70例，年齡63～85歲，平均(75.1±6.1)歲。均符合中國(guó)精神疾病分類方案與診斷標(biāo)準(zhǔn)第三版和美國(guó)精神障礙診斷和統(tǒng)計(jì)手冊(cè)第4版(DAMⅣ)的AD診斷標(biāo)準(zhǔn)〔6〕。符合MMSE評(píng)分文盲患者≤17分，小學(xué)文化患者≤20，中學(xué)及以

4、上文化程度患者≤24分。采用Hachinski缺血指數(shù)量表結(jié)合大腦影像學(xué)資料鑒別血管性癡呆和AD，排除抑郁癥所引起的假性癡呆，排除其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病、系統(tǒng)性疾病和物質(zhì)中毒所致的癡呆，排除正處于心、血管、肺、肝、腎等重大軀體疾病急性期的患者。111例健康對(duì)照老年人選自社區(qū)，滿足MMSE評(píng)分文盲患者≥17分，小學(xué)文化患者≥20，中學(xué)及以上文化程度患者≥24分。男性41例，女性70例，年齡62～87歲，平均(73.6±6.3)歲。排除正處于心、血管、肺、肝、腎等重大軀體疾病急性期的患者。兩組間的年齡、性別差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?！　?.2方法　　1.2.1位點(diǎn)　　SORL1基因接近5′端的rs6411

5、20(A/G)SNP多態(tài)性位點(diǎn)?！　?.2.2引物　　上游引物：5′CATGATCCAAATTATATGTGAAAAATTCAAT3′，錯(cuò)配引物設(shè)計(jì)，將A轉(zhuǎn)換為C，引入一個(gè)MunⅠ（MfeⅠ）的酶切識(shí)別序列：C∨AATTG；下游引物：5′CCCAAGAACATCAGGACACCAAC3′，擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度為：181bp?！　?.2.3PCR反應(yīng)條件　　95℃預(yù)變性5min，然后按96℃45s，62℃30s，72℃1min，循環(huán)35次，末次循環(huán)后72℃延伸5min，產(chǎn)物經(jīng)含EB的2%的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)?！　?.2.4SORL1基因rs641120(A/G)SNP/MunI限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性

6、(RFLP)分析取10μl擴(kuò)增產(chǎn)物，加入8個(gè)單位MunⅠ內(nèi)切酶及其緩沖液，37℃消化3h。3%的瓊脂糖凝膠電泳，分離酶切產(chǎn)物片段。溴化乙啶染色后在紫外透射反射儀下分析電泳結(jié)果?！　?.2.5驗(yàn)證結(jié)果　　各基因型隨機(jī)抽取5例樣本進(jìn)行基因測(cè)序，驗(yàn)證酶切結(jié)果。x【關(guān)鍵詞】阿爾茨海默??；基因表達(dá)；多態(tài)現(xiàn)象；遺傳　　阿爾茨海默?。ˋD）是一種多因素引起的原發(fā)性退行性腦變性疾病，病因未明〔1〕。AD患者中，除少數(shù)為家族性外，絕大多數(shù)為散發(fā)性。散發(fā)性阿爾茨海默?。⊿AD）的發(fā)病是多個(gè)基因和環(huán)境因素共同作用的結(jié)果。目前，定位于19號(hào)染色體的載脂蛋白E（APOE）ε4等位基因作為AD的危險(xiǎn)因子已得到廣泛認(rèn)

7、同〔2〕，但ε4等位基因并非AD發(fā)病的充要條件〔3〕，其發(fā)病因素僅占了45%～60%，由此可見尚有其他危險(xiǎn)因素參與了AD的發(fā)病。研究發(fā)現(xiàn)遺傳性或獲得性的SORL1受體表達(dá)或功能改變，可能涉及AD發(fā)生的機(jī)制〔4，5〕。本研究通過(guò)對(duì)SAD患者SORL1基因進(jìn)行多態(tài)性檢測(cè)，探討SORL1基因多態(tài)性與SAD是否存在關(guān)聯(lián)?！　?對(duì)象與方法　　1.1對(duì)象　　114例SAD患者為2006年9月至2008年3月在我院門診及住院的患者，各患者間無(wú)親緣