丹葛解酲湯對大鼠酒精性肝損傷的保護作用研究

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1、丹葛解酲湯對大鼠酒精性肝損傷的保護作用研究：馬麗高玉杰錢月慧王琦牛陽【摘要】目的觀察丹葛解酲湯對大鼠酒精性肝損傷的保護作用。方法將40只SD大鼠隨機分為正常對照組(n=10)、模型組(n=14)和丹葛解酲湯組(n=16),采用白酒灌胃的方法建立大鼠酒精性肝損傷模型,給予丹葛解酲湯保護。12周后檢測血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)及肝組織中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;HE染色觀察肝臟的病理變化。結(jié)果與模型組比較,丹葛解酲湯組血清中ALT、AST的含量肝臟均低于模型組,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<

2、;0.05);丹葛解酲湯組肝組織中MDA含量的低于模型組,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);丹葛解酲湯組肝組織中SOD活性高于模型組,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。肝組織病理結(jié)果提示丹葛解酲湯對酒精性肝損傷大鼠具有保護作用。結(jié)論丹葛解酲湯能抑制酒精誘導(dǎo)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)對肝組織的損傷,對酒精性肝損傷有明顯保護作用?！娟P(guān)鍵詞】丹葛解酲湯;酒精性肝損傷;保護作用　隨著人民生活水平的提高,由酒精性肝損傷引起的酒精性肝病(AlcoholLiverDisease,ALD)的發(fā)病率也呈迅速增加的趨勢,成為僅次于病毒性肝炎的第二

3、大肝病[1]。因此,開發(fā)并篩選對ALD有確切防治作用的中藥復(fù)方并應(yīng)用于臨床,是當前面臨的重要課題。丹葛解酲湯是結(jié)合現(xiàn)代研究和臨床經(jīng)驗加減而成，由丹參、葛花、葛根、柴胡、黃芩、陳皮、白芍、茯苓、黨參、白術(shù)、山楂、砂仁等藥組成,對酒精性肝病有較好防治療效。本實驗觀察了丹葛解酲湯對酒精性肝損傷的保護作用和可能機制,為丹葛解酲湯防治酒精性肝病的實驗研究和臨床應(yīng)用提供可靠的理論依據(jù)?！　?材料　　1.1動物清潔級SD大鼠,雌雄各半，體質(zhì)量(200±20)g,由寧夏醫(yī)科大學(xué)動物中心提供?！　?.2藥物丹葛解酲湯由寧夏醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)門診部用韓

4、國煎藥機制做,丹葛解酲湯(等效劑量)含生藥2.58g/ml?！　?.3試劑56度紅星二鍋頭白酒(北京紅星釀酒廠生產(chǎn));谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所提供，批號090422);超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所，批號090428)。　　2方法　　2.1動物分組及處理取SD大鼠40只隨機分為3組：①模型組(14只)：56度紅星二鍋頭白酒用蒸餾水配制成酒精濃度40%的白酒,按10ml/kg每日分兩次灌胃造模(灌胃時間為上午8時和下午16時)，造模

5、12周;②丹葛解酲湯組(16只)：除每天白酒灌胃外(方法同模型組),每天中午12時灌胃丹葛解酲湯(10ml/kg)，灌胃12周;③正常對照組(10只)：給予生理鹽水灌胃(方法同模型組)灌胃12周。12周后麻醉心臟取血及剖取肝臟?！　?.2ALT、AST含量的檢測取全血分離血清,檢測ALT、AST含量?！　?.3SOD水平、MDA含量的檢測取部分肝臟,用冷生理鹽水沖洗后制備成10%的肝勻漿,采用黃嘌呤氧化酶法測定SOD活性，用硫代巴比妥酸比色法測定MDA的含量?！　?.4肝臟病理變化的觀察取大鼠肝左葉,10%中性甲醛溶液固定,常

6、規(guī)石蠟包埋、切片(片厚0.4μm),HE染色,光鏡下觀察?！　?.5統(tǒng)計分析實驗數(shù)據(jù)以±s表示,用SPSS11.5統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，組間比較采用成對t檢驗分析,以P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義?！　?結(jié)果　　3.1丹葛解酲湯對酒精性肝損傷大鼠血清ALT、AST的含量的影響結(jié)果見表1表1丹葛解酲湯對酒精性肝損傷大鼠血清由表1可知，與正常對照組大鼠相比，模型組大鼠血清中的ALT,AST的含量顯著升高(P<0.05)。丹葛解酲湯組可明顯降低大鼠血清中的ALT,AST的含量(P<0.05)?！　?討論　　中醫(yī)學(xué)中雖無

7、“酒精性肝損傷”“酒精性肝病”的病名記載，但在中醫(yī)歷代文獻中，對長期大量飲酒的危害性已有認識，根據(jù)其臨床表現(xiàn)及發(fā)病特點，可將其歸屬于祖國醫(yī)學(xué)的“傷酒”“脅痛”“酒癖”“酒脹”“酒鼓”“酒疸”等范疇。歷代醫(yī)家對酒精性肝病早有研究[2]，認為由酒毒蘊積濕熱熏蒸肝膽所致，在治療上多以疏肝解郁、清利濕熱為主，綜觀酒精性肝病的病程，始終存在“淤”的因素，因此解酒化毒與化淤保肝并重，方可相得益彰。根據(jù)中醫(yī)辨證理論，結(jié)合導(dǎo)師多年的臨床經(jīng)驗，組方丹葛解酲湯，該方具有活血調(diào)肝、解酒化毒之功效?！　∫掖荚谄浯x過程中可通過多種途徑產(chǎn)生自由基,自由

8、基能與細胞大分子反應(yīng),導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化,損傷肝細胞,引起細胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞，因此自由基及其介導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化被認為是最主要的致病因素[3]。乙醇在肝臟代謝時可產(chǎn)生大量自由基：O-2、H2O2、OH-、C2H5O-和C2H5OH-，過量的自由基可引起肝細胞膜發(fā)生脂質(zhì)過氧反應(yīng)，使細