某中藥復(fù)方對(duì)大鼠酒精性肝損傷的保護(hù)作用

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1、某中藥復(fù)方對(duì)大鼠酒精性肝損傷的保護(hù)作用麻懿馨袁雪芬孫莉楊鴻武牛璐謝韜（通訊作者）（遼寧省疾病預(yù)防控制中心毒理檢測(cè)所遼寧沈陽(yáng)110005）【摘要】目的研究中藥復(fù)方對(duì)大鼠酒精性肝損傷的保護(hù)作用。方法以不同劑量（2.65、1.33、0.44g/kg）中藥復(fù)方給大鼠連續(xù)灌胃30d后,模型組及各劑量組經(jīng)口給予50%的乙醇溶液建立大鼠肝損傷模型。16h后斷頭處死大鼠并檢測(cè)肝勻漿丙二醛、還原型谷胱甘肽、甘油三酯含量及肝組織病理學(xué)變化。結(jié)果與模型對(duì)照組比較，該中藥復(fù)方能顯著降低肝臟MDA含量，提高GSH含量，減少脂肪滴在肝臟分布的范圍和面積。結(jié)論該中藥復(fù)方對(duì)大鼠酒精性肝損傷有保護(hù)作用?！娟P(guān)鍵詞】中藥復(fù)方肝損

2、傷丙二醛谷胱甘肽酒精酒精性肝損傷是指長(zhǎng)期或大量飲用含有乙醇的飲料造成的肝臟疾患，是常見的導(dǎo)致肝硬化的原因［1］。隨著酒精性肝損傷的發(fā)病率U益增加，引起公眾及醫(yī)學(xué)界廣泛關(guān)注及高度重視?；谥嗅t(yī)理論，用多味中草藥配伍組成保護(hù)酒精性肝損傷中藥復(fù)方。木研究對(duì)該中藥復(fù)方進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究，觀察其對(duì)酒精所致大鼠急性肝損傷的保護(hù)作用。1材料與方法1.1樣品中藥復(fù)方，主要成分為水飛薊素、葛根等，每日人體推薦量為5.3g/60kgBW。1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選用SPF級(jí)健康雄性SD大鼠50只，體重180?220g,將動(dòng)物隨機(jī)分為高、中、低三個(gè)劑量組（2.65g/kgBW、1.33g/kgBW和0.44g/kgBW）、酒精

3、肝損傷模型對(duì)照組和空白對(duì)照組，每組10只動(dòng)物。各組按每天10ml/kg體重經(jīng)口灌胃，連續(xù)30d。1.3儀器與試劑電子天平（感量O.Olg）、紫外/可見分光光度計(jì)、全自動(dòng)生化分析儀（使用原廠定標(biāo)液、質(zhì)控液和試劑）、冷凍切片機(jī)、動(dòng)物組織病理影像分析系統(tǒng)。過氧化脂質(zhì)降解產(chǎn)物丙二醛(MDA)試劑盒，還原型谷胱甘肽(GSH)試劑盒均由南京建成生物工程研宄所提供。1.4實(shí)驗(yàn)方法［2］試驗(yàn)結(jié)束吋各實(shí)驗(yàn)組和模型對(duì)照組一次灌胃給予50%乙醇12ml/kgBW，空白對(duì)照組給予蒸餾水，禁食16h后斷頭處死動(dòng)物，制備肝組織勻漿，測(cè)定肝組織勻漿中的丙二醛、還原型谷胱甘肽、甘汕三酯含量；從肝左葉中部做橫切取材，冰凍切片

4、，蘇丹IV染色。用光學(xué)顯微鏡觀察脂肪滴在肝臟組織的分布、范圍和面積。1.5統(tǒng)計(jì)方法實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel建立數(shù)據(jù)庫(kù)，以SPSS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)方差分析，各實(shí)驗(yàn)組與模型對(duì)照組比較用最小顯著差法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。2結(jié)果2.1中藥復(fù)方對(duì)小鼠體重的影響實(shí)驗(yàn)前后各劑量組的小鼠的初始體重、末期體重和體重增重與模型對(duì)照組間比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)，空白對(duì)照組的體重、體重增重與模型對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)，說(shuō)明動(dòng)物的初始體重和實(shí)驗(yàn)后其體重增長(zhǎng)值在各組間較為均衡。2.2中藥復(fù)方對(duì)肝勻漿中MDA、GSH、TG含量及肝組織病理變化的影響空白對(duì)照組肝勻漿中MDA、GSH、TG含量及肝細(xì)胞內(nèi)脂肪滴

5、平均分與模型對(duì)照組比較，奮極顯著性差異(P<0.01),表明灑精性肝損傷模型成立。2.65g/kgBW、1.33g/kgBW實(shí)驗(yàn)組肝勻漿中MDA含量顯著低于模型對(duì)照組(P<0.05或P<0.01)、GSH含量顯著高于模型對(duì)照組(P<0.05或P<0.01),各實(shí)驗(yàn)組肝細(xì)胞內(nèi)脂肪滴平均分均顯著低于模型對(duì)照組(P<0.01)。(見表1)表1中藥復(fù)方對(duì)肝勻漿中MDA、GSH、TG含量及肝組織病理變化的影響注：與模型對(duì)照組比較，冇顯著性差異(P<0.05)，**,與模型對(duì)照組比較，有極顯著性差異(P<0.01)o3討論水飛薊是菊科草本植物，活性成分為水

6、飛薊素，是天然的黃酮木脂素類化合物，研宄表明其具有對(duì)抗脂質(zhì)過氧化、穩(wěn)定細(xì)胞膜、促進(jìn)肝細(xì)胞修復(fù)再生、改善肝功能的作用，對(duì)急慢性肝炎、肝硬化和代謝中毒性肝損傷有一定的療效[3]。葛根為豆科多年生落葉藤本植物野葛或甘葛藤的根，通過保護(hù)肝細(xì)胞膜、清除自由基、抗脂質(zhì)過氧化等機(jī)制實(shí)現(xiàn)對(duì)急性肝損傷的保護(hù)作用[4】。急性灑精性肝損傷的機(jī)制為乙醇被機(jī)體吸收后在乙醇脫氫酶催化下可被脫氫氧化為乙醛和乙酸鹽，生成活性氧自由基，導(dǎo)致肝細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化反應(yīng)引起肝細(xì)胞損傷[5】，冋吋使三狻酸循環(huán)障礙和脂肪酸氧化減弱而影響脂肪代謝，致使脂肪在肝細(xì)胞內(nèi)沉積[2】。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示，一次灌胃給予50%乙醇12ml/kgBW后

7、，模型組人鼠肝組織勻漿中MDA、TG含量明顯增高，GSH含量明顯下降，肝組織中脂肪滴分布范圍及面積明顯增大，提示模型組大鼠出現(xiàn)肝損害；而提前給予中藥復(fù)方能降低MDA含量、升高GSH含量，減少脂肪滴分布范圍及面積，說(shuō)明該中藥復(fù)方能對(duì)酒精引起的人鼠肝損傷冇明顯保護(hù)作用。其機(jī)制可能為降低脂質(zhì)過氧化反應(yīng)強(qiáng)度，延緩還原型谷胱甘肽的耗竭，減少脂肪在肝細(xì)胞中沉積。參考文獻(xiàn)[1】劉劍華，楊繼武，夏瓊，等.灑精性肝病發(fā)病機(jī)制研