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《鉛硒聯(lián)合作用對原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元影響的論文》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、鉛硒聯(lián)合作用對原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元影響的論文【關(guān)鍵詞】鉛；硒；海馬；神經(jīng)元；神經(jīng)突起 摘要：目的觀察鉛、硒對原代培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元生長及存活的影響，研究硒對鉛的神經(jīng)細(xì)胞生長抑制的拮抗作用。方法建立新生ol/l鉛明顯抑制了原代培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元突起生長，引起神經(jīng)元存活率下降；單獨(dú)硒(2×10-6mol/l)有明顯促進(jìn)海馬神經(jīng)元突起生長的作用，尤其在神經(jīng)元突起生長早期；但對海馬神經(jīng)元存活率的影響不明顯。鉛和硒共同孵育時，培養(yǎng)早期硒能拮抗鉛對神經(jīng)元突起延伸的抑制，但隨著培養(yǎng)時間延長，這種拮抗作用消失；從神經(jīng)元存活率來看，在實驗劑量下，未見硒能拮
2、抗鉛對神經(jīng)元存活的抑制作用。結(jié)論鉛具有抑制神經(jīng)元生長和存活的毒性，本實驗劑量下的硒在細(xì)胞培養(yǎng)早期有促進(jìn)神經(jīng)元突起生長和拮抗鉛對神經(jīng)元生長和存活的抑制作用?！ ￡P(guān)鍵詞：鉛；硒；海馬；神經(jīng)元；神經(jīng)突起 effectofleadandseleniumonprimaryculturedhippocampalneurons. onthegroaryculturedhippocampalneurons.methodstheprimarycultureofhippocampalneuronsofnefreemediumultaneously,t
3、hegrool/l)delayedthegro(2×10-6mol/l)stimulatedthegroeofculture.thereatstudieddosageonsurvivalrateofhippocampalneurons.theresultsofcocultivatedeprolongation,theantagonisticeffectofseleniumdeclined.theantagonisticeffectofseleniumontheinhibitionofneurons'survivalrateca
4、usedbyleadpalneurons.atstudieddosageseleniumacceleratedthegropalneuronsandantagonizedtheleadtoxicityattheearlyculturetime. key;hippocampus;neuron;neurite 鉛具有顯著的神經(jīng)發(fā)育毒性。.毒理學(xué)實驗和人群流行病學(xué)調(diào)查表明，鉛能對神經(jīng)系統(tǒng)造成不可逆性損害，嚴(yán)重?fù)p壞海馬神經(jīng)元，影響學(xué)習(xí)、記憶及行為發(fā)育〔1，2〕。硒有防止鉛吸收和加速其排泄的作用，因此，硒有可能成為有效防治鉛神經(jīng)毒性的重要資
5、源〔3〕。為了解硒拮抗鉛神經(jīng)毒性的效果和研究其拮抗作用機(jī)制，同時也為更多有效地利用硒，本試驗對體外原代培養(yǎng)的ol/l的谷氨酰胺(美國sigma公司)組成］；胰酶、dnaseⅰ、左旋多聚賴氨酸和臺盼蘭(美國sigma公司)；pbcl2(上海試四赫維化工有限公司)；na2seo3(天津化學(xué)試劑研究所)。神經(jīng)元特異性烯醇化酶(nse)抗體和神經(jīng)絲蛋白(nf)抗體(北京中山生物技術(shù)有限公司)?！ ?12儀器co2細(xì)胞培養(yǎng)箱(美國shellab公司)；全自動圖像分析系統(tǒng)(德國kontron公司)；圖像攝錄輸入儀(日本jvc公司)；倒置顯微鏡(德
6、國zeiss公司)?！ ?13動物出生24h內(nèi)in，終止消化后離心、過篩、co2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。第2d更換無血清培養(yǎng)液，以后每隔2d換液1次，每次更換一半培養(yǎng)液。培養(yǎng)第2，3，4，5，6和7d在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。 122分組及染毒設(shè)對照組、pb組、se組、pb+se組和先pb后se組。對照組加入30μl的磷酸鹽緩沖液，pb組加入30μlna2seo3，pb+se組同時加入pbcl2和na2seo3各30μl，先pb后se組于培養(yǎng)第2d換液時加入30μl的pbcl2，次日半量換液并加入30μl的na2seo3。使pbcl2、
7、na2seo3的終濃度分別為1×10-5mol/l和2×10-6mol/l。以后換液時補(bǔ)入相應(yīng)量的pbcl2或na2seo3，維持終濃度不變?！ ?23神經(jīng)元存活率的測定每次到培養(yǎng)的時間終點(diǎn)，收集細(xì)胞，洗滌定容后取10μl細(xì)胞懸液臺盼蘭拒染法進(jìn)行鏡下活細(xì)胞計數(shù)，獲得各個劑量組不同時間終點(diǎn)的活細(xì)胞總數(shù)，再分析與同一觀察時間的對照組的活細(xì)胞總數(shù)，比較計算各組細(xì)胞的相對存活率?！ ?24神經(jīng)元突起的測定倒置顯微鏡下(200×)，隨機(jī)選擇3個視野，利用圖像自動分析儀測量形態(tài)可辨的所有神經(jīng)元突起的長度?！ ?結(jié)果 21海馬神經(jīng)元形態(tài)觀察對照組
8、和單獨(dú)硒作用組的海馬神經(jīng)元鏡下呈圓形，體積小，透亮，散在分布；培養(yǎng)2h后開始貼壁，6h后絕大部分細(xì)胞已貼壁，光暈明顯；12h細(xì)胞幾乎全部貼壁，且長出短小的突起；2d后細(xì)胞有明顯增長的突起，胞體飽滿多數(shù)呈梭形、錐形，胞漿豐
