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1、ELISA法及膠體金法檢測HCV抗體的應(yīng)用分析樊少勇（廣丙玉林市第一人民醫(yī)院檢驗科537000）【摘要】目的探討和研究酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA法）檢測HCV的特異性。方法釆用EUSA法進行344例傳染病篩查患者血清的檢測，同時采用膠體金法對同組患者進行測定作為對比。結(jié)果ELISA法檢測出抗HCV陽性率為4.07%（14/344）,膠體金法檢測出陽性率為2.62%（9/344）。結(jié)論ELISA法檢測抗HCV的陽性率明顯高于膠體金檢測法，但其特異性及敏感性在木次試驗中并未能完全體現(xiàn)，仍需觀察取證?！娟P(guān)鍵詞】丙型
2、肝炎酶聯(lián)免疫吸附試驗膠體金吸附試驗【中圖分類號】R446【文獻標識碼】A【文章編號】2095-1752（2013）01-0156-01丙型肝炎病毒（HCV）是導致慢性肝病的主要病原之一，由于在感染HCV之后病情多轉(zhuǎn)入慢性，絕大多數(shù)的患者都會演變成慢性感染，最終引發(fā)肝硬化、肝癌等終末期疾病，目前臨床上對于此類疾病的預防和治療上尚沒有特效藥物,所以在對于此類疾病的篩查和早期診斷上就顯得尤為重要［1?2］。膠體金法是臨床上應(yīng)用較早的一種非檢測技術(shù)，目前己經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床的各個領(lǐng)域，雖然它具有方便、快捷、設(shè)備需求度低的
3、優(yōu)勢，但是在準確度上仍存在一定的劣勢，而酶聯(lián)免疫吸附試驗（EUSA法）則具有較好的評價。筆者就此兩種方法對HCV游離抗原的檢測效果進行了對比試驗，現(xiàn)報道如下。1臨床資料與方法1.1臨床資料選擇我院自2009年1月至2012年1月之間門診及住院患者進行傳染病篩查的344例作為研究對象，其中男性患者196例，女性患者148例，年齡在19?74歲之間，平均年齡49.1±12.4歲。1.2儀器與方法實驗儀器及試劑包括：酶標儀（美國產(chǎn)ELX800NB型酶標儀）、洗板機（芬蘭產(chǎn)Wellwash4mk2型）、低
4、溫離心機、抗HCVELISA試劑（北京萬泰生物制藥有限公司提供)、抗HCV金標試紙條(廈門英科新創(chuàng)生物科技制藥有限公司提供)，確保以上所有一起運轉(zhuǎn)正常，試劑均在保質(zhì)期內(nèi)使用。方法：所有受檢者均在清晨空腹抽取靜脈血4?6ml,用離心機進行血清分離之后分為兩份，分別用EUSA法及膠體金法對標本進行檢測，ELISA法比色采用雙波長450nm/630nm,參考波長為630nm，s/co值≥l者視為陽性；膠體金、法觀察試紙條是否在檢測線和對照線各出現(xiàn)紫紅色線條，僅對照線條出現(xiàn)者為陰性，兩者皆有則為陽性，未出現(xiàn)線條視
5、為實驗失敗。整個實驗過程嚴格按照說明書進行。1.3統(tǒng)計學分析所有數(shù)據(jù)均采用統(tǒng)計學處理軟件SPSS15.0進行統(tǒng)計學處理，組間對比采用t進行檢驗，方差值P<0.05視為具有統(tǒng)計學意義。2結(jié)果ELISA法檢測出抗HCV陽性率為4.07%(14/344),膠體金法檢測出陽性率為2.62%(9/344)。3討論目前臨床上已經(jīng)將HCV抗體檢測作為輸血、手術(shù)以及腔鏡檢查前的必做項0,這更好的防止了HCV的傳播。膠體金法檢測HCV具有特異性強、靈敏度高、方便、快捷且無需實驗儀器的特點，在臨床上被廣泛應(yīng)用。但是膠體金法作為HC
6、V快檢的方法仍存在冇假陰性的可能，分析主要原因冇人為因素及環(huán)境因素等，檢測結(jié)果往往受到檢測時間長短、反應(yīng)是否充分、氣溫改變等因素的影響。此外，標本血量不足或過量、過濾膜破裂、血液滲出導致檢測線模糊或不易觀察產(chǎn)生主觀判斷失誤等都是影響實驗結(jié)果的原因。從本文數(shù)據(jù)中我們可以看出,ELISA法檢測HCV抗體明顯更由于膠體金法，從實驗嚴密程度上而言ELISA也更勝-籌，但是由于實驗過程較為復雜，而且對于實驗儀器要求較高，故在基層醫(yī)院的開展十分首先。所以建議膠體金法僅作為初篩之用，復檢可用ELISA法進行對照，防止HCV的
7、漏檢和傳染的發(fā)生，尤其是對于需要進行腔鏡檢查的患者更是應(yīng)當做到防止疏漏［3］。在工作中檢驗人員砬當規(guī)范操作步驟，避免主觀因素造成錯誤檢測結(jié)果，對于相關(guān)知識應(yīng)當熟練掌握，避免出現(xiàn)對于僅一條陽性線而無陰性線(強陽性)判斷為陰性結(jié)果等誤判事件[4】。綜上所述，ELISA法檢測抗HCV的陽性率明顯高于膠體金檢測法，但是由于其實驗過程較為繁瑣II實驗時間較長，并不如膠體金法方便、快捷，故在臨床應(yīng)用方面比較受限。而膠體金法能夠快速的對標本做出檢測，但是由于艽存在假陰性的概率較大，建議對疑似病例采用ELISA進行復檢，防止造
8、成傳播。兩者作為篩査HCV抗體的重要手段,對于此類疾病的早期發(fā)現(xiàn)和預防冇著重要意義，恰當?shù)氖褂媚軌蚋玫木S護患者的健康。參考文獻[1】陳坤，張賀秋,宋曉國，等.金表滲透法快速檢測血清中丙型肝炎病毒抗體[」].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學雜志,2008,17(2):1.[2]KimberlyB,,HerbertH,GrazynaL,etal.CirculatingDdimerlevelsarebette
